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文檔簡介
1、1有關基因工程中的酶切問題有關基因工程中的酶切問題一、單選題:1已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點,如圖中箭頭所指,如果該線性DNA分子在3個酶切位點上都被該酶切斷,則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的DNA片段?,F(xiàn)在多個上述線性DNA分子,若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種類數(shù)是A3B4C9D122現(xiàn)有一長度為1000堿基對
2、(bp)的DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶EcI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp,用KpnI單獨酶切得到400bp和600bp兩種長度的DNA分子,用EcI、KpnI同時酶切后得到200bp和600bp兩種長度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是的3.現(xiàn)有一長度為3000堿基對(bp)的線性DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶酶切后,進行凝膠電泳,使降解產(chǎn)物分開。用酶H單獨酶切,結果如圖1;用酶B單獨酶切,結果如圖2;用酶H和酶B
3、同時酶切,結果如圖3。該DNA分子的結構及其酶切圖譜是()4在DNA測序工作中,需要將某些限制性內(nèi)切核酸酶的限制位點在DNA上定位,使其成為DNA分子中的物理參照點。這項工作叫做“限制酶圖譜的構建”。假設有以下一項實驗:用限制酶HindⅢ,BamHⅠ和二者的混合物分別降解一個4kb(1kb即1千個堿基對)大小的線性DNA分子,降解產(chǎn)物分別進行凝膠電泳,在電場的作用下,降解產(chǎn)物分開,如右圖所示。據(jù)此分析,這兩種限制性內(nèi)切核酸酶在該DNA分
4、子上的限制位點數(shù)目是以下哪一組?AHindⅢ1個,BamHⅠ2個BHindⅢ2個,BamHⅠ3個CHindⅢ2個,BamHⅠ1個DHindⅢ和BamHⅠ各有23引物序列,圖2為引物對與模板結合示意圖。請判斷哪一對引物可采用較高的退火溫度?__________。(3)圖1步驟③所用的DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求?。(4)為將外源基因轉入馬鈴薯,圖1步驟⑥轉基因所用的細菌B通常為。(5)對符合設計要求的重組質粒T
5、進行酶切,。假設所用的酶均可將識別位點完全切開,請根據(jù)圖1中標示的酶切位點和表2所列的識別序列,對以下酶切結果作出判斷。①采用EcⅠ和PstⅠ酶切,得到_________種DNA片斷。②采用EcⅠ和SmaⅠ酶切,得到_________種DNA片斷。3.3.(0909江蘇卷)江蘇卷)(7分)蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(為抗氨芐青霉素基因),據(jù)圖回答下列問題。ramp(1)將
6、圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反應管中有種DNA片段。(2)圖中②表示HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程,此過程可獲得種重組質粒;如果換用Bstl與BamHⅠ酶切,目的基因與質粒連接后可獲得種重組質粒。(3)目的基因插入質粒后,不能影響質粒的。(4)圖中③的Ti質粒調(diào)控合成的vir蛋白,可以協(xié)助帶有目的基因的T—DNA導人植物細胞,并防止植物細胞中對T—DNA的降解。(5)已知轉基因植物中毒素蛋白只結
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