sur1過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案_第1頁(yè)
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1、SUR1SUR1過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂粚?shí)驗(yàn)?zāi)康模菏筍UR1基因在植物體內(nèi)超表達(dá)二實(shí)驗(yàn)方法：二實(shí)驗(yàn)方法：三實(shí)驗(yàn)步驟三實(shí)驗(yàn)步驟①RTPCR將RNA反轉(zhuǎn)錄成CDNARNARNA提取（提?。?0℃70℃保存）保存）1.組織剪碎加入1mlTrizol，冰上勻漿（邊勻漿邊暫停）2.轉(zhuǎn)入一新EP管中（1.5ml），室溫保存5min3.加氯仿0.2ml，振蕩混合（手搖劇烈），室溫放置5min4.10000rpm4℃離心15m

2、in851AAATTGGCTGGATCGCCTTGAATGATCCCGAGGGCGTTTTCGAGACCACC901AAGGTGTTACAATCCATCAAACAGAATCTTGACGTAACTCCTGACCCTGC951CACAATAATTCAGGCTGCACTTCCAGCGATCCTGGAGAAAGCGGACAAAA1001ACTTCTTTGCAAAGAAGAACAAGATACTCAAACATAATGTTGATTTGGTG1051T

3、GTGATAGGCTCAAGGACATCCCCTGTGTCGTCTGTCCCAAGAAACCTGA1101GTCTTGCACTTACTTATTGACAAAGTTGGAGCTGTCATTGATGGATAATA1151TCAAGGACGATATAGATTTTTGCGTAAAACTGGCCAGAGAGGAGAATCTC1201GTGTTTCTACCAGGGGATGCTCTGGGTTTGAAGAACTGGATGAGGATAAC1251CATCG

4、GAGTCGAAGCTCATATGCTTGAGGATGCACTTGAGAGACTGAAGG1301GTTTCTGTACACGTCATGCCAAGAAGACAGAGACAGAAACTGAGTCACTT1351CAAGCTTTGAAACTGAGTGATAATAATCTCGAAATGTAA根據(jù)引物設(shè)計(jì)原則，利用軟件Primerpremier5.0設(shè)計(jì)上下游引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到目的基因SUR1③載體的構(gòu)建圖1：過(guò)表達(dá)載體User載體的連接Us

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