養(yǎng)精膠囊提取液對Leydig細(xì)胞睪酮合成的影響及機制研究.pdf

1、[目的]
　　 觀察養(yǎng)精膠囊提取液對睪酮合成的影響，并探討其具體的作用機制。
　　 [方法]
　　 以體外MLTC-1細(xì)胞培養(yǎng)為模型，加入養(yǎng)精膠囊提取液(0.01～1mg/mL)作用24h。用放射免疫法測定細(xì)胞上清的睪酮濃度；用Real-timeRT-PCR和WesternBlot技術(shù)方法測定快速調(diào)節(jié)蛋白、細(xì)胞色素膽固醇側(cè)鏈裂解酶和3β-羥類固醇脫氫酶mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。用無血清培養(yǎng)液誘導(dǎo)MLTC-1細(xì)胞凋亡

2、，然后加入養(yǎng)精膠囊提取液（0.01～1mg/mL）作用48h，用MTT法檢測細(xì)胞的活性；用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期和凋亡；用real-timeRT-PCR和分光光度法檢測caspase-3的表達(dá)。
　　 [結(jié)果]
　　 養(yǎng)精膠囊提取液作用MLTC-1細(xì)胞24h后，能增加睪酮的合成；蛋白激酶A抑制劑-H89能顯著抑制養(yǎng)精膠囊提取液合成睪酮的功能；養(yǎng)精膠囊提取液能提高快速調(diào)節(jié)蛋白、細(xì)胞色素膽固醇側(cè)鏈裂解酶和3β-羥類固醇脫氫酶