分析室系統(tǒng)化研究

1、分析室系統(tǒng)化研究及申報資料的撰寫,2,,,,,,3,4,1. 撰寫調研報告,1.1. 參加合成室（或制劑室）組織的開題報告會 項目名稱 注冊類別 研究現狀 上市情況 可能的合成路線（或處方工藝） 專利情況,5,1.2.查閱文獻,6,1.3.設計研究方案 1.3.1. 起始原料、中間體研究方案,7,1.3.2. 原料藥研究方案1.3.2.1.理化性質,8,1.3.2. 原料藥研究方案1.3.2.2.鑒別

2、 選擇專屬性強，靈敏度高，重現性好，操作簡便、快速的鑒別方法。,9,1.3.2. 原料藥研究方案1.3.2.3.檢查,10,1.3.2.3.檢查（續(xù)表）,11,1.3.2. 原料藥研究方案1.3.2.3. 含量測定,12,1.3.3. 藥物制劑研究方案1.3.3.1. 性狀 應具體描述藥品的顏色和外型，片劑如為包衣片，應除去包衣后，就片心的顏色進行描述。膠囊劑應在說明為膠丸或硬膠囊后，對內容物的顏色形狀均應記述。注射

3、液一般應為澄明液體，顏色應根據藥品顏色色號相應描述，以黃色標準比色液為基準，淺于1號稀釋一倍的為“無色”，介于1、2號間的為“幾乎無色”，介于2、4號間為“微黃色”，介于4、6號間為“淡黃色”，介于6、8號間為“黃色”。,13,1.3.3. 藥物制劑研究方案1.3.3.2. 鑒別制劑的鑒別試驗，在設計試驗方案時除盡可能采用與原料藥相同方法外，還應注意以下幾點：（1）制劑中均加有輔料，不宜用物理常數作為鑒別；（2）某些制劑的主藥含

4、量甚微必須采用靈敏度較高、專屬性較強、操作較簡便的方法。（3）由于制劑中共存藥物（復方制劑）和輔料的干擾，應分離除去。（4）對于含量測定采用紫外分光光度法或HPLC、GC法測定的藥品，可以最大吸收波長（或特定波長下吸光度吸光度比值）及保留時間的一致性作鑒別。（5）對異構體藥物制劑應有專屬性強的鑒別方法。,14,1.3.3. 藥物制劑研究方案1.3.3.3. 檢查,15,1.3.3. 藥物制劑研究方案1.3.3.3. 檢查（續(xù)表

5、）,16,1.3.3. 藥物制劑研究方案1.3.3.4. 含量測定,17,1.4. 對照品、儀器、試劑計劃對于項目研究中所涉及到對照品（包括雜質對照品、重要中間體）、對照制劑（國內外已上市銷售的制劑），要查清生產廠家（或供應公司）、價格，計算質量研究用量，并提前做購買計劃。另外對研究中所用的特殊儀器和試劑，也需提前計劃。自制對照品應當在質量研究前計算用量，同時需進行相應的結構確證和質量研究工作，并制訂質量標準。,18,1.5. 工

6、作計劃對起始原料、中間體、質量研究、穩(wěn)定性考察等研究時間進行初步安排。1.6. 撰寫調研報告及開題報告撰寫調研報告及開題報告內容應包括：文獻綜述、初步研究方案、工作計劃、可能遇到的困難及需相關部門提供的資料、樣品等，其中開題報告需采用PPT形式。,19,2. 原輔料、中間體內控質量標準的制訂,2.1. 起始原料 2.1.1.質量要求 起始原料應質量穩(wěn)定、可控，應有來源、標準和供貨商的檢驗報告，必要時應根據制備工藝的要求

7、建立內控標準。對由起始原料引入的雜質、異構體，必要時應進行相關的研究并提供質量控制方法；對具有手性的起始原料，應制訂作為雜質的對映異構體或非對映異構體的限度，同時應對該起始原料在制備過程中可能引入的雜質有一定的了解。,20,2.1. 起始原料 2.1.2. 質量研究 首先按照生產廠家提供的質量標準對樣品進行檢驗，對標準的合理性進行驗證。一般廠家的標準都比較簡單，有時無含量測定項或無有關物質測定項，按照廠家提供的反應原料、中間體

8、對含量或有關物質測定方法進行研究，含量測定方法最好采用容量法，以指示劑顏色變化確定終點，同時以電位滴定法對方法的可行性進行驗證，如容量法不可行，可采用HPLC法；有關物質測定方法可選用TLC法、HPLC法、GC法等，研究方法同成品，需進行流動相選擇、波長選擇、分離度、檢測限測定、破壞性、溶液穩(wěn)定性等試驗，并根據實際測定結果和合成工藝的需要制訂合理的范圍。另外按照起始原料的需要及工藝要求，增加比旋度、折光率、餾程、對映體含量等的標準。,2

9、1,2.1. 起始原料 2.1.3. 內控標準 一般要求對產品質量有一定影響的起始原料、試劑應制訂內控標準。內控標準應重點考慮以下幾個方面：（1）對名稱、化學結構、理化性質要有清楚的描述；（2）要有具體的來源，包括生產廠家和簡單的制備工藝；（3）提供證明其含量的數據，對所含雜質情況（包含有毒溶劑）進行定量或定性的描述；（4）如果需要采用起始原料或試劑進行特殊反應，對其質量應有特別的要求，如對于必須在干燥條件下進行的

10、反應，需要對起始原料或試劑中的水分含量進行嚴格的要求和控制；若起始原料為手性化合物，需要對對映異構體或非對映異構體的限度有一定的要求。,22,2.1. 起始原料 2.1.4. 樣品檢測 起始原料的內控質量標準制訂好以后，對樣品進行檢驗并發(fā)檢驗報告，并按“原始記錄撰寫要求”記錄起始原料、中間體的原始記錄本上。對于不符合內控標準的起始原料或試劑，應對精制后的樣品重新檢測并發(fā)報告。,23,2.2. 中間體2.2.1. 新結構的中間體

11、一般情況下應對其結構進行確證，并對理化常數、質量控制（定性、定量）進行研究。結構研究：一般應進行紅外、紫外、核磁共振（碳譜、氫譜，必要時進行二維相關譜）和質譜等研究，以確證該中間體的結構。理化常數研究一般包括：熔點、沸點、比旋度、溶解度等。質量研究一般包括：性狀、異構體、有關物質、含量等。,24,2.2. 中間體2.2.2. 已知結構的關鍵中間體一般情況下應對其理化常數、質量（定性、定量）進行研究，根據結構確證研究的需要，提

12、供相應的結構研究資料。理化常數測定一般應包括：熔點、沸點、比旋度、溶解度等，并與文獻報道的有關數據比較。質量控制一般包括：性狀、異構體、有關物質、含量等。結構研究：如果因終產品結構確證的需要，應對其結構進行確證，并應與有關的文獻資料進行比較。,25,2.2. 中間體2.2.3. 已知結構的關鍵中間體一般情況下應對其理化常數進行研究，并與文獻資料進行比較，同時還應對其質量進行研究，并根據結構確證研究的需要，提供相應的結構研究資料

13、。理化常數測定一般包括：熔點、沸點、比旋度、溶解度等。質量研究一般包括：采用 TLC、HPLC、GC 等方法，對其在反應過程中進行定量或定性控制。結構研究：如果由于終產品結構確證研究的需要，應對其結構進行確證，并應與有關的文獻資料進行比較。,26,2.2. 中間體2.2.4.質量研究及內控標準的制訂 （1）熔點：根據文獻數據和實際測定結果制訂熔點范圍；（2）折光率：對于液態(tài)中間體需要檢測折光率；（3）含量：最好采用容量法，

14、如果能購買到對照品，也可采用紫外分光光度法和色譜法（HPLC法、GC法），研究方法及原始記錄的撰寫依照成品進行；（4）有關物質：可采用TLC法、HPLC法、GC法等；（5）光學純度：對于有手性中心的藥物，可以通過測定比旋度進行初步的控制，然后采用HPLC法對手性中間體進行異構體分離，并按照工藝需要制訂合適的限度。（6）干燥失重（水分測定）：對于合成工藝中對水含量要求較高的中間體需進行該項檢查。（7）其他：按照工藝路線要求及中間體

15、的特性需要增加的特殊檢驗項目。 要求：對于每個中間體都需進行詳細質量研究，研究方法同成品，根據研究結果制訂內控質量標準，對中間體進行檢驗并發(fā)報告。所有的研究過程及研究結果都要按“原始記錄撰寫要求”記錄在起始原料、中間體的原始記錄本上。,27,2.2. 中間體2.2.4.質量研究及內控標準的制訂 （1）熔點：根據文獻數據和實際測定結果制訂熔點范圍；（2）折光率：對于液態(tài)中間體需要檢測折光率；（3）含量：最好采用容量法，如果

16、能購買到對照品，也可采用紫外分光光度法和色譜法（HPLC法、GC法），研究方法及原始記錄的撰寫依照成品進行；（4）有關物質：可采用TLC法、HPLC法、GC法等；（5）光學純度：對于有手性中心的藥物，可以通過測定比旋度進行初步的控制，然后采用HPLC法對手性中間體進行異構體分離，并按照工藝需要制訂合適的限度。（6）干燥失重（水分測定）：對于合成工藝中對水含量要求較高的中間體需進行該項檢查。（7）其他：按照工藝路線要求及中間體的特

17、性需要增加的特殊檢驗項目。 要求：對于每個中間體都需進行詳細質量研究，研究方法同成品，根據研究結果制訂內控質量標準，對中間體進行檢驗并發(fā)報告。所有的研究過程及研究結果都要按“原始記錄撰寫要求”記錄在起始原料、中間體的原始記錄本上。,28,2.3. 制劑原輔料的檢測 （1） 原料：對于購買其他廠家生產的制劑用原料，需要供應商提供質量標準、檢驗報告等，原料進廠后，需按質量標準對原料進行全檢，并按制劑工藝的要求適當增訂項目。（2）

18、輔料：對于常用的且經過質保部檢驗的輔料，將不再對其檢驗。對非常用的且未經質保部檢驗的輔料，需供應商提供質量標準、檢驗報告，并按質量標準對輔料進行檢驗，按制劑工藝的要求對質量標準進行修訂。 要求：對于原輔料的質量標準（及修訂后的質量標準）、檢驗結果、檢驗白報告都要詳細記錄在原輔料的原始記錄上。,29,2.4. 初步質量研究 按照設計方案對主要項目（包括熔點、溶出度、含量、含量均勻度、有關物質、光學純度等）進行初步質量研究

19、。如有關物質采用TLC法時，需要選擇展開劑、顯色劑，同時進行分離度（包括中間體、副產物、降解產物、成品的分離）試驗、破壞性試驗、溶液穩(wěn)定性試驗；而采用HPLC法時，需要確定色譜柱、流動相（對多種流動相進行選擇）、檢測器（檢測波長）、流速、樣品制備方法等，采用GC法時，需要確定色譜柱、載氣、檢測器、升溫方式、樣品制備方法等，均需對方法的可行性進行驗證。如對溶出度初步研究時，需要確定溶出介質、轉速、檢測方法等。 要求：對重點檢測項目

20、都要進行細致的研究，對方法的可行性進行初步的驗證，研究過程和驗證資料都要詳細記錄在原始記錄中，為今后正式質量研究打下良好的基礎。,30,3.質量研究、穩(wěn)定性考察及申報資料的撰寫,3.1.質量研究及申報資料的撰寫 3.1.1.原料藥質量研究及申報資料的撰寫 3.1.1.1. 原料及對照品來源原料：需寫明原料的生產單位及批號。對照品（包括雜質對照品）：需注明對照品的生產廠家、批號、含量、雜質（若為已知雜質需注明雜質名稱及含量，另

21、外需寫明最大未知雜質的含量）、光學純度等。 3.1.1.2. 含量限度 根據現行版中國藥典的要求及三批樣品（或多批樣品）的測定結果（注明測定方法，如采用非水滴定法），制訂含量測定限度。一般為按干燥品（或無水物）計算含量（應寫明分子式）不得少于98.5%（或98.0%、99.0%），上限一般為101.0%，如上限為102.0%，則應寫為含量應為98.5%（或98.0%、99.0%）～102.0%。,31,3.1.1.原料藥質量研究及申

22、報資料的撰寫 3.1.1.1. 原料及對照品來源原料：需寫明原料的生產單位及批號。對照品（包括雜質對照品）：需注明對照品的生產廠家、批號、含量、雜質（若為已知雜質需注明雜質名稱及含量，另外需寫明最大未知雜質的含量）、光學純度等。 3.1.1.2. 含量限度 根據現行版中國藥典的要求及三批樣品（或多批樣品）的測定結果（注明測定方法，如采用非水滴定法），制訂含量測定限度。一般為按干燥品（或無水物）計算含量（應寫明分子式）不得少于

23、98.5%（或98.0%、99.0%），上限一般為101.0%，如上限為102.0%，則應寫為含量應為98.5%（或98.0%、99.0%）～102.0%。,32,3.1.1.3.1. 外觀性狀對于性狀中描述為“結晶性”顆粒或粉未，需使用偏振光顯微鏡進行檢測，而不能僅僅采用目測，在申報資料中需注明儀器型號、生產廠家。對顏色范圍的制訂需通過多批樣品的測定結果。對藥物的遇光變色、易吸濕（需進行引濕性試驗）、風化、揮發(fā)等情況應進行如實描述。

24、3.1.1.3.2. 熔點（1）儀器：寫明儀器型號及生產廠家。（2）方法及結果：按照中國藥典2005年版二部附錄Ⅵ C測定，傳溫液為硅油，升溫速度為1.5℃/分，并將試驗結果列表。在結論要將熔點制訂的范圍進行說明，如文獻依據等。,33,3.1.1.原料藥質量研究及申報資料的撰寫 3.1.1.3. 理化常數 3.1.1.3.3. 溶解度 （1）試劑（列出每種試劑的名稱、生產廠家、級別、批號）（2）方法及結果： 根據現行版

25、中國藥典二部凡例溶解度項下的有關規(guī)定，分別稱取樣品細粉適量，加入不同的溶劑，在25℃每隔5分鐘振搖30秒，觀察30分鐘內溶解情況，測定結果列表。對產品在上述溶劑中的溶解情況進行小結。（在質量研究時可對5種以上不同極性且比較常用的溶劑或酸液、堿液進行溶解度試驗，但在制訂質量標準時溶劑種類一般不要超過5種。）,34,3.1.1.3.4. 比旋度（1）儀器及試劑：（需寫明儀器的型號、生產廠家，試劑的名稱、生產廠家、級別、批號）。（2）方

26、法與結果：寫明樣品的配制方法，依法測定（中國藥典2005年版二部附錄Ⅵ E），對檢驗結果列表并進行小結。注：需要對比旋度限度范圍提供依據，多是根據文獻數據；另外最好采用不同的溶劑（在申報資料中均要列出）考察其旋光性質，并測定旋光度或比旋度。不要將旋光度和比旋度混淆，旋光度的單位為“°”，英文為The optical rotation；而比旋度單位為“(°)·ml·dm-1·g-1”，

27、 但在國內習慣將“°”作為其單位，英文為The specific optical rotation。）,35,3.1.1.3.5. 折光率（1）儀器：（需寫明儀器的型號、生產廠家）（2）方法與結果：取本品依法（中國藥典2005年版二部附錄Ⅵ F）測定，結果列表。（采用鈉光譜的D線，除另有規(guī)定外，供試品溫度為20℃） 結論：（在結論中也需說明限度范圍的選擇依據。）3.1.1.3.6. 相對密度（1）采用方法：注明

28、是比重瓶法還是韋氏比重秤法（適合于測定易揮發(fā)的液體），采用比重瓶法時，需寫明規(guī)格（常用5、10、25或50ml），而使用韋氏比重秤時需寫明儀器型號及生產廠家。（2）結果：將測得結果列表，并需說明限度范圍的選擇依據。 注：相對密度可反映物質的純度。純物質的相對密度在特定條件下為不變的常數。若純度不夠，其相對密度的測定值會隨著純度的變化而改變。液體原料藥應考察其相對密度。,36,3.1.1.3.7. 凝點和餾程（1）方法：均要寫

29、明參照現行版藥典方法。將試驗過程中出現的異?，F象及注意事項在資料中注明。（2）結果：將測得結果列表，并將結論放在表后。注：凝點系指一種物質由液體凝結為固體時，在短時間內停留不變的最高溫度。物質的純度變更，凝點亦隨之改變。液體原料藥應考察其是否具有一定的凝點。某些液體藥物具有一定的餾程，測定餾程可以區(qū)別或檢查藥物的純雜程度。,37,3.1.1.3.8. 酸值（碘值、皂化值、羥值）（1）試劑：需寫明名稱、生產廠家、級別、批號。（2

30、）方法與結果：取本品依法（中國藥典2005年版二部附錄Ⅶ H）測定，結果見表。（對于有特殊要求的藥物需要寫在資料中注明。）結論：（在結論中需說明限度范圍的制訂依據。）注：碘值、酸值、皂化值、羥值等是脂肪與脂肪油類藥物的重要理化性質指標，在此類藥物的質量研究中應進行研究。,38,3.1.1.4. 鑒別3.1.1.4.1. 化學鑒別（1）試劑：需寫明試劑名稱、生產廠家、級別、批號。（2）反應機理：對反應機理進行描述，說明由于藥品結

31、構中存在的何種基團而引起的顏色、沉淀、產生氣體等反應。（3）方法及結果：詳細寫明試驗方法，必要時需進行空白試驗，并將試驗結果列表。在表后寫上結論。,39,3.1.1.4.2. 紫外鑒別（1）儀器及試劑：（需寫明紫外儀器的型號、生產廠家，所使用試劑的名稱、生產廠家、級別、批號），若紫外鑒別采用含量測定項下方法，此項則不用寫。（2）方法與結果：寫明樣品的制備及檢測方法，將檢測結果列表，并進行小結。（3）在資料后需附上紫外掃描圖。

32、 注：紫外分光光度法應規(guī)定在指定溶劑中的最大吸收波長，必要時，規(guī)定最小吸收波長；或規(guī)定幾個最大吸收波長處的吸光度比值或特定波長處的吸光度，以提高鑒別的專屬性。,40,3.1.1.4.3. HPLC鑒別（1）儀器及試劑：（需寫明HPLC儀器、色譜柱的型號、生產廠家，所使用試劑的名稱、生產廠家、級別、批號）。（2）方法與結果：寫明樣品的制備及檢測方法（包括色譜條件），將檢測結果列表，并進行小結。（3）在資料后需附上HPLC鑒別圖。

33、如HPLC鑒別采用含量測定項或有關物質測定項下的方法，則儀器及試劑、色譜條件則不用重述。,41,3.1.1.4.4. TLC鑒別（1）儀器及試劑：需寫明所用儀器（包括紫外燈、烘箱等）的型號、生產廠家及使用試劑（包括固定相）的名稱、生產廠家、級別、批號，另外還需寫明對照品的生產廠家、批號及顯色劑（現行版中國藥典未登錄）的制備方法。對于薄層板需要特殊處理的在資料中要詳細說明。（2）方法與結果：寫明樣品、對照品的制備及檢測方法（注明展開

34、劑的比例、烘箱的溫度、紫外燈的波長等），將檢測結果列表，并進行小結。（3）在資料后需附上TLC鑒別圖。,42,3.1.1.4.5. 紅外鑒別（1）儀器及試劑：（需寫明紅外儀器的型號、生產廠家，所使用溴化鉀（或氯化鉀）等試劑的名稱、生產廠家、級別、批號）。（2）方法與結果：（寫明樣品的處理方法及測定結果，并進行小結）。如稱取溴化鉀約200mg于研缽中，研成細粉，加入供試品約2mg，充分混合并研成均勻的細粉，參照中國藥典2005年版二

35、部附錄Ⅵ C方法進行測定。 注：對于通過加入溶劑或重結晶改變晶型或者通過其他方式處理樣品，需在申報資料中詳細說明。,43,3.1.1.5. 檢查檢查項目通常應考慮安全性、有效性和純度三個方面的內容。藥物按既定的工藝生產和正常貯藏過程中可能產生需要控制的雜質，包括工藝雜質、降解產物、異構體和殘留溶劑等，因此要進行質量研究，并結合實際制訂出能真實反映產品質量的雜質控制項目，以保證藥品的安全有效。3.1.1.5.1. 溶液的澄清度

36、及顏色（1）試劑：需寫明名稱、生產廠家、級別、批號。（2）方法與結果：如取本品約0.5g，加甲醇25ml溶解，溶液應澄清無色；如顯渾濁，與2號濁度標準液（中國藥典2005年版二部附錄Ⅸ B）比較，不得更濃；如顯色，與黃色1號標準比色液（中國藥典2005年版二部附錄Ⅸ A）比較，不得更深。將檢測結果列表并進行小結。注：檢查該項的溶劑應首選水，對選擇其他溶劑需要在資料中進行說明依據。,44,3.1.1.5.2. pH值測定（1）儀

37、器及試劑：（需寫明酸度計的型號、生產廠家，若使用水以外的其他溶劑需注明名稱、生產廠家、級別、批號）。（2）方法與結果：說明樣品溶液的配制方法，并將測定結果列表。在表后進行小結，對pH值制訂范圍進行說明。（3）需注明測定過程中的注意事項。,45,3.1.1.5.3. 干燥失重（1）儀器：需寫明烘箱的型號、生產廠家。（2）方法與結果：寫明烘箱（或恒溫減壓）干燥溫度、干燥時間，對檢驗數據進行列表。注：如果在干燥失重過程中出現樣品升華

38、、熔化或不能恒重需在資料中說明。3.1.1.5.4. 水分測定（1）儀器及試劑：寫明水分測定儀的的型號、生產廠家，費休氏液及溶劑（一般使用甲醇）生產廠家、級別、批號。（2）方法與結果：寫明試驗方法，對檢驗數據進行列表。注：如果選擇甲醇以外的其他溶劑需要說明，并注明試驗過程中的注意事項（如濕度等），對于含結晶水的藥物通常應測定水分，再結合其他試驗研究確定所含結晶水的數目，質量研究中一般應同時進行干燥失重和水分測定，并對二者結果進行

39、比較。,46,3.1.1.5.5. 熾灼殘渣（1）儀器及試劑：寫明馬沸爐的的型號、生產廠家，硫酸的生產廠家、級別、批號。（2）方法與結果：寫明試驗方法，對檢驗數據進行列表。一般取樣品1.0g進行試驗，對于氟化物需選擇鉑坩堝。 注：應注明試驗過程中的注意事項，一般化藥熾灼殘渣的范圍不得過0.1%，若超過該限度則需進行說明。3.1.1.5.6. 重金屬（1）試劑：寫明試劑的生產廠家、級別、批號。（2）方法與結果：寫明試驗方

40、法（現行藥典中有3種方法），對檢驗數據進行列表。如：取熾灼殘渣項下的殘渣，按照中國藥典2005年版二部附錄Ⅷ H重金屬檢查第二法，依法檢查。對測定結果列表。注：一般注射劑、皮膚制劑所用原料重金屬的限度一般不得超過百萬分之十。,47,3.1.1.5.7. 異構體測定3.1.1.5.7.1. 異構體名稱及結構式3.1.1.5.7.2. 文獻資料：列出所研究項目手性分離的文獻，并對文獻內容進行小結，按照文獻初步選擇試驗方法。（若無文獻，

41、一般首先采用HPLC法進行試驗，一方面采用手性柱直接分離，并對正相法和反相法進行比較；另一方面，可先將被測藥物衍生化，再用普通色譜柱。另外還可采用毛細管電泳法等。）3.1.1.5.7.3. 儀器及試劑（1）儀器：將所用重要儀器均要列出，包括HPLC儀器、天平等的型號及生產廠家。（2）試劑：將所用試劑名稱、生產廠家、級別、批號均要列出。（3）對照品：寫明對照品的來源、批號、含量、有關物質、光學純度等。3.1.1.5.7.4. 方

42、法初步選擇 按照文獻方法及設計的方法進行逐一試驗，從中初步選擇一種簡單、方便、分離度高的檢驗方法。方法一：方法二：……每種方法均要寫明色譜條件、試驗方法、試驗結果。然后選擇一種較好的方法進行驗證。,48,3.1.1.5.7. 異構體測定（續(xù)）3.1.1.5.7.5. 方法驗證（1）流動相選擇：對三種以上的流動相進行選擇；（2）檢測限測定：對兩種對映體檢測限均要進行測定；（3）溶液穩(wěn)定性試驗：溶液穩(wěn)定性試驗需做12

43、小時以上。（4）線性范圍測定：（5）加樣回收率試驗：（6）檢測方法：根據上述研究結果確定對映體檢測方法，根據文獻資料、對映體的毒副作用、實際測定結果確定限度。3.1.1.5.7.6. 樣品測定3.1.1.5.7.7. 小結,49,3.1.1.5.8. 有關物質測定 包括TLC、HPLC、GC、毛細管電泳等方法，現以HPLC法為例。3.1.1.5.8.1. 合成路線 將藥品的合成工藝路線（包括起始原料合成路線）

44、列出，從路線中確定起始原料（需注明生產廠家、批號）、中間體、副產物及試劑。3.1.1.5.8.2. 文獻資料：列出所查閱文獻內容，并對文獻資料進行小結，通過文獻獲知主要的降解產物，按照文獻初步選擇試驗方法。（若查不到文獻，則需根據藥品結構設計有關物質的研究方法。）3.1.1.5.8.3. 儀器及試劑（1）儀器：將所用重要儀器均要列出，包括HPLC儀器、天平等的型號及生產廠家。（2）試劑：將所用試劑名稱、生產廠家、級別、批號均要列

45、出。,50,3.1.1.5.8. 有關物質測定（續(xù)二） 3.1.1.5.8.4. 方法初步選擇按照文獻方法及設計的方法（需包括正相系統(tǒng)和反相系統(tǒng)）進行逐一試驗，從中初步選擇一種簡單，方便，能使起始原料（包括起始原料合成時所用的原料、中間體）、中間體、副產物、降解產物、聚合物和成品有效分離的檢測方法。波長的初選：取起始原料（包括起始原料合成路線中的反應原料、中間體）、中間體、副產物、降解產物、聚合物和成品適量，加甲醇溶解并稀釋至含2

46、0～50µg/ml的溶液，在190～600nm波長范圍內掃描，綜合考慮選擇初始波長。然后以此波長進行下列試驗：方法一：方法二：……每種方法均要寫明色譜條件、試驗方法、試驗結果。然后選擇一種較好的方法進行驗證。,51,3.1.1.5.8. 有關物質測定（續(xù)三） 3.1.1.5.8.5. 方法驗證（1）流動相選擇：按初步確定的方法對三種以上流動相選擇，對的流動相進行選擇（波長為初選波長），對選擇結果進行列表，表中數據包

47、括保留時間、分離度、理論板數、拖尾因子等。（2）波長選擇：① 取起始原料（包括起始原料合成路線中的反應原料、中間體）、中間體、副產物、降解產物、聚合物和成品的混合溶液注入液相色譜儀，采用DAD檢測器，通過等紫外吸收圖選擇各成分都有較強吸收的波長；② 取破壞性試驗項下的溶液進行DAD檢測，通過等紫外吸收圖選擇降解產物均有較強吸收的波長；（3）破壞性試驗：取成品分別進行酸、堿、氧化、高溫破壞，破壞后主成分應保留80%以上，通過外標法

48、計算物料平衡（若樣品不能完全溶解，可通過將溶劑蒸干，再選擇合適的溶劑溶解）。（4）溶劑干擾試驗：一般采用流動相作溶劑，有時因溶解需要選用甲醇、乙腈等有機溶劑，在方法研究時需進行溶劑干擾試驗。（5）檢測限測定：對起始原料（包括起始原料合成路線中的反應原料、中間體）、中間體、副產物、降解產物、聚合物和成品檢測限均要進行測定；,52,3.1.1.5.8. 有關物質測定（續(xù)四）（6）溶液穩(wěn)定性試驗：溶液穩(wěn)定性試驗需做12小時以上。（7）

49、耐用性：考察流動相組成、不同廠家及不同批次色譜柱、流速、柱溫等的微小變化對有關物質測定的影響。（8）線性范圍：對于采用對照品測定雜質時需進行線性范圍測定，考察范圍應為擬規(guī)定限度的±20%。（9）準確度（相當于回收率）：在樣品中加入已知量的雜質進行測定，一般需考慮在規(guī)定的范圍內，制備3個不同濃度的試樣，各測定3次，共測定9次，計算已加入量回收率。（10）檢測方法：根據上述研究結果確定有關物質測定的檢測方法。根據文獻資料、雜

50、質的毒副作用、實際測定結果、及雜質測定技術指導原則確定限度。對于已知雜質可采用對照品法或校正因子法（已知雜質對主成分的相對響應因子在0.9-1.1范圍內時，可以用主成分的自身對照法計算含量，超出0.9-1.1范圍時，宜用雜質對照品法計算含量）。對含量較低的未知雜質可采用自身對照法。理想的有關物質測定方法為已知雜質對照品法和未知雜質不加校正因子的自身對照法。,53,3.1.1.5.8. 有關物質測定（續(xù)五）原料藥雜質限度（技術指導原則）

51、由于各種分析方法均具有一定的局限性，因此在進行雜質分析時，應注意不同原理的分析方法間的相互補充與驗證，如 HPLC 與 TLC 及 HPLC 與 CE 的互相補充，反相 HPLC系統(tǒng)與正相 HPLC 系統(tǒng)的相互補充，HPLC 不同檢測器檢測結果的相互補充等。 3.1.1.5.8.6. 樣品測定：對超過質控限度的雜質需進行詳細說明，并對樣品穩(wěn)定性進行重點考察。3.1.1.5.8.7. 小結,54,3.1.1.5.9.

52、有機殘留溶劑測定 采用氣相色譜法，對“有關物質測定”項下合成路線中所使用溶劑、反應溶劑、反應副產物的檢測方法進行研究。根據文獻內容選擇氣相色譜柱及了解各種溶劑的出峰順序，溶解樣品的溶劑一般選擇DMF、DMAc、DMSO、水等。3.1.1.5.9.1. 儀器及試劑（1）儀器：氣相色譜儀、色譜柱、天平等的型號及生產廠家。（2）試劑：將所用試劑名稱、生產廠家、級別、批號均要列出。3.1.1.5.9.2. 方法初步選擇按照文獻

53、方法及設計的方法進行逐一試驗，從中初步選擇一種簡單，方便，分離度高的檢測方法。方法一：方法二：……每種方法均要寫明色譜條件（特別是程序升溫）、試驗方法、試驗結果。然后選擇一種較好的方法進行驗證。,55,3.1.1.5.9. 有機殘留溶劑測定（續(xù)） 3.1.1.5.9.5. 方法驗證（1）分離度試驗：對分離結果進行列表（內容包括：保留時間、分離度、理論板數）。（2）線性范圍測定：對各種溶劑均需進行線性范圍測定。（3）檢測限

54、測定：信噪比3:1（4）定量限測定：信噪比10:1（5）準確度（回收率）：一般采用定量加入法來驗證方法的穩(wěn)定性。（6）耐用性：載氣及流速、不同廠牌及批號色譜柱、擔體、柱溫、進樣口和檢測器溫度等。（7）檢測方法：根據上述研究結果確定殘留溶劑的檢測方法。按照現行版藥典要求制訂每種溶劑的限度。3.1.1.5.9.6. 樣品測定3.1.1.5.9.7. 小結,56,3.1.1.6. 含量測定 一般采用容量法（如非水滴定法）、

55、UV法、HPLC法、GC法等。3.1.1.6.1. 非水滴定法采用非水溶液滴定法測定樣品的含量時，一般采用比較簡單、方便的指示劑法，以電位法確定測定終點時顏色的變化，指示劑終點顏色以電位滴定時的突躍點為準。3.1.1.6.1.1. 儀器與試劑寫明電位滴定計、電極等的型號及生產廠家，高氯酸、冰醋酸等試劑生產廠家、批號、級別。3.1.1.6.1.2. 試驗方法及結果 精密稱取供試品適量，加冰醋酸（或冰醋酸-醋酐混合液）溶解

56、，（如果是鹽酸鹽、溴化物等，需加入適量的醋酸汞試液），再加入萘酚苯甲醇（或結晶紫）指示液1～2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L），依法進行電位滴定，觀察指示劑顏色變化并記錄電位變化和滴定液體積。繪制(⊿E/⊿V)-V和 (⊿2E/⊿2 V)-V曲線，(⊿2E/⊿2 V)-V曲線過零時的滴定液體積為滴定終點體積，指示劑顏色的變化為滴定終點到達時顏色的變化，同時做空白試驗。 滴定結果見下表，滴定曲線需附圖。（需列出三個平行樣的數據）,5

57、7,3.1.1.6.1. 非水滴定法（續(xù)二）供試品含量測定結果(20080107-1#)含量%=99.92%,58,3.1.1.6.1. 非水滴定法（續(xù)三）3.1.1.6.1.3. 電位滴定法和指示劑法測定結果的比較 每種測定法各檢測3個數據，對測定結果列表并進行小結。3.1.1.6.1.4. 指示劑法測定含量重復性試驗 取樣品適量，共6份，按照含量測定方法進行滴定，根據滴定結果計算RSD%。

58、結果列表（見表3-3）并進行小結。3.1.1.6.1.5. 樣品含量測定 寫出檢測方法，并對檢測結果列表。3.1.1.6.1.6. 小結,59,3.1.1.6.2. UV法 根據藥品的性質選擇合適溶劑，一般首選水，其次可選0.1mol/L鹽酸、乙醇等。3.1.1.6.2.1. 儀器及試劑（1）儀器：寫明UV分光光度計等儀器的型號及生產廠家。（2）試劑：寫明所用試劑名稱、生產廠家、級別、批號。3.1.1.6.2

59、.2. 波長選擇取供試品，加適當溶劑溶解并稀釋至含10～50µg/ml的溶液，在190～600nm波長范圍內掃描，一般選擇最大吸收波長作為含量測定波長。3.1.1.6.2.3. 檢測方法3.1.1.6.2.4. 方法驗證 （1）線性范圍測定：試驗方法、試驗結果及結論（2）重復性試驗：指在同樣的操作條件下，在較短時間間隔內，由同一分析人員測定所得結果的精密度?？稍谝?guī)定的范圍內，至少用9個測定結果進行評價，如3種濃

60、度，各測3 次，另外將試驗結果列表，并進行小結。（3）中間精密度：系指在同一實驗室內，由于實驗條件的改變，如分析人員、時間、設備、儀器改變所測結果的精密度。將試驗結果列表并進行小結。（4）重現性：指在不同實驗室由不同人員所測得結果的精密度。將試驗結果列表并進行小結。（5）溶液穩(wěn)定性試驗：試驗方法、試驗結果及結論3.1.1.6.2.5. 樣品測定3.1.1.6.2.6. 小結,60,3.1.1.6.3. HPLC法 一般

61、采用有關物質測定的色譜條件進行含量測定方法研究。驗證法和UV法相同，但需進行耐用性試驗。,61,3.1.1.制劑質量研究及申報資料的撰寫 3.1.2.1. 樣品及對照品來源 需提供樣品的生產單位及批號。 需提供對照品（包括雜質對照品）及對照制劑的生產單位及批號，另外對照品需提供含量、雜質（包括最大雜質和已知雜質）含量。3.1.2.2. 含量限度 根據制劑品種劑型特點、規(guī)格及現行版藥典要求制訂含量限度，一般為

62、90%～110%，有時也訂為93%～107%、95%～105%等。3.1.2.3. 性狀 應對制劑的外觀、顏色進行描述，對膠囊等產品需對內容物的形狀、顏色進行描述。如片劑應描述是什么顏色的壓制片或包衣片（包薄膜衣或糖衣），除去包衣后片芯的顏色，以及片子的形狀，如異形片（長條形，橢圓形，三角形等）；片面有無印字或刻痕或有商標記號等也應描述。注射液一般為澄明液體（水溶液），但也有混懸液或粘稠性溶液，需注意對顏色的描述，還應考察貯藏

63、過程中性狀是否有變化。,62,3.1.2.4. 鑒別 參照原料藥鑒別方法進行試驗，并需同時進行空白輔料及復方制劑中其他成分的干擾試驗。鑒別試驗一般至少采用二種以上不同類的方法，如化學法和 HPLC 法等。必要時對異構體藥物應有專屬性強的鑒別試驗。（同原料藥一樣，需寫明所用試劑的名稱、生產廠家、批號、級別。）3.1.2.5. 檢查 各種制劑需進行的檢查項目，除應符合相應的制劑通則中的共性規(guī)定（具體內容請參照現行版《中華人

64、民共和國藥典》附錄中制劑通則）外，還應根據其特性、工藝及穩(wěn)定性考察結果，制訂其他的檢查項目。如口服片劑、膠囊劑除按制劑通則檢查外，一般還應進行溶出度、雜質（或已知雜質）等檢查；緩控釋制劑、腸溶制劑、透皮吸收制劑等應進行釋放度檢查；小劑量制劑（主藥含量低）應進行含量均勻度檢查；注射劑應進行 pH 值、顏色（或溶液的顏色）、雜質（或已知雜質）檢查，注射用粉末或凍干品還應檢查干燥失重或水分，大體積注射液檢查重金屬與不溶性微粒等。,63,3.1

65、.2.5.1. 溶液的澄清度及顏色一般注射劑（粉針劑）、溶液劑需檢查該項。在申報資料中需寫明方法及結果，并將檢測結果列表。3.1.2.5.2. pH值測定（1）儀器：需寫明酸度計的型號、生產廠家，若使用水以外的其他溶劑需注明名稱、生產廠家、級別、批號。（2）方法與結果：說明樣品溶液的檢測方法，并將測定結果列表。在表后進行小結，對pH值制訂范圍進行說明。（3）需注明測定過程中的注意事項。,64,3.1.2.5.3. 異構體

66、 按照原料的方法進行試驗，需排除空白輔料及復方制劑中其他成分的干擾。3.1.2.5.4. 有關物質首先按照原料的有關物質測定方法進行試驗，如果輔料對測定結果有干擾，需重新進行方法學研究，研究過程及資料撰寫同原料。制劑的雜質限度：,65,3.1.2.5.5. 含量均勻度 一般采用含量項下的測定方法，主要包括UV法、HPLC法等。若采用的方法和含量測定方法不同，則需進行系統(tǒng)研究，如選擇UV法測定時，則要對檢測波長進行選擇，

67、然后進行方法學驗證（包括線性、重復性、中間精密度、溶液穩(wěn)定性等試驗），對各種試驗結果列表并小結。3.1.2.5.6. 崩解時限（1）儀器：寫明所用崩解儀的型號、生產廠家；（2）方法及結果：寫明檢測方法，對試驗結果列表，表中數據應包括：樣品的崩解時間、平均值及標準偏差。并對結果進行小結，說明試驗中的異?，F象和需注意的事項。3.1.2.5.7. 重量差異（或裝量差異）（1）儀器：寫明所用天平的型號、生產廠家；（2）方法及結果：寫

68、明檢測方法，對試驗數據列表，并對結果小結。,66,3.1.2.5.8. 溶出度（或釋放度）3.1.2.5.8.1. 儀器及試劑（1）儀器：將所用溶出儀等儀器的型號、生產廠家列出。（2）試劑：將所用試劑名稱、生產廠家、級別、批號均要列出。3.1.2.5.8.2. 檢測方法3.1.2.5.8.3. 方法的建立（1）溶出介質選擇：一般需采用水、0.1mol/L鹽酸溶液、磷酸鹽緩沖液（pH3～8）三種介質進行選擇，若藥品在這三種介質