生化實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)三-蛋白質(zhì)顏色反應(yīng)及沉淀反應(yīng)

1、實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三蛋白質(zhì)顏色反應(yīng)及沉淀反應(yīng)蛋白質(zhì)顏色反應(yīng)及沉淀反應(yīng)一、目的一、目的1、掌握鑒定蛋白質(zhì)的原理及方法。2、熟悉蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)。3、進(jìn)一步掌握蛋白質(zhì)的有關(guān)性質(zhì)。二、原理二、原理蛋白質(zhì)分子中的某種或某些基團(tuán)與顯色劑作用，可產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)，不同蛋白質(zhì)所含氨基酸種類不同，顏色反應(yīng)亦不同。顏色反應(yīng)不是蛋白質(zhì)的專一反應(yīng)，一些非蛋白物質(zhì)亦可產(chǎn)生相同的顏色反應(yīng)，因此不能僅根據(jù)顏色反應(yīng)的結(jié)果決定被測物質(zhì)是否是蛋白質(zhì)。顏色反應(yīng)是一些常用的蛋白質(zhì)

2、定量測定的依據(jù)。多數(shù)蛋白質(zhì)是親水膠體，當(dāng)其穩(wěn)定性被破壞或與某些試劑結(jié)合成不溶解的鹽后，即產(chǎn)生沉淀。三、實(shí)驗(yàn)器材三、實(shí)驗(yàn)器材1、雞蛋白2、試管3、吸管4、滴管5、水浴鍋等四、實(shí)驗(yàn)試劑四、實(shí)驗(yàn)試劑1、卵清蛋白液：將雞蛋白用蒸餾水稀釋2040倍，23層紗布過濾，濾液冷藏備用。2、0.1%茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶于95%乙醇并稀釋至100ml。3、10%氫氧化鈉溶液：10g氫氧化鈉溶于蒸餾水并稀釋至100ml。4、濃硝酸：比重1.42。5、

3、1%硫酸銅溶液：硫酸銅1g溶于蒸餾水，稀釋至100ml。6、飽和硫酸銨溶液：蒸餾水100ml加硫酸銨至飽和。7、95%乙醇。8、結(jié)晶氯化鈉。9、1%醋酸鉛：1g醋酸鉛溶于蒸餾水并稀釋至100ml。10、飽和苦味酸溶液。11、1%醋酸溶液：冰醋酸1ml用蒸餾水稀釋至100ml。五、操作五、操作1、顏色反應(yīng)：、顏色反應(yīng)：A、雙縮脲反應(yīng)：、雙縮脲反應(yīng)：蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵，與兩分子尿素經(jīng)過加熱形成的雙縮脲的結(jié)構(gòu)相似，能與硫酸銅結(jié)合成紅紫色的絡(luò)

4、合物。取一支試管，加蛋白質(zhì)溶液10滴，再加10%NaOH溶液10滴及1%CuSO4溶液2滴，混勻，觀察是否出現(xiàn)紫玫瑰色。B、黃色反應(yīng)：、黃色反應(yīng)：蛋白質(zhì)分子中含有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的氨基酸。遇硝酸可硝化成黃色物質(zhì)，此物質(zhì)在堿性環(huán)境中變?yōu)殚冱S色的硝苯衍生物。2、沉淀反應(yīng)結(jié)果項(xiàng)目結(jié)果（是否有沉淀產(chǎn)生）鹽析作用乙醇沉淀作用重金屬鹽沉淀作用生物堿試劑沉淀作用七、思考題1、簡述茚三酮與蛋白質(zhì)進(jìn)行顏色反應(yīng)的原理。2、維持蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定性的因素有哪些？乙醇