hiv抗體確認試劑國家參考品的建立_宋愛京

1、中國圖書分類號R39233文獻標識碼A文章編號10045503(2007)0320904=診斷制品HIV抗體確認試劑國家參考品的建立宋愛京許四宏李秀華王佑春=摘要目的建立評價HIV抗體確認試劑的國家參考品。方法從我國部分地區(qū)收集HIV感染者或可疑感染者以及非HIV感染者血漿樣品并對其進行HIV抗體、核酸以及抗體條帶等檢測從中篩選出有代表性的樣品組成參考品用4家不同的HIV抗體確認試劑進行檢測和標化。結果共篩選出27份樣品組成HIV抗體確

2、認試劑參考品其中10份為HIV抗體確認陽性參考品12份為HIV抗體確認陰性參考品5份為HIV抗體不確定參考品。用4家不同的HIV抗體確認試劑標化12次10份HIV抗體確認陽性參考品均檢測為確認陽性5份不確定參考品均檢測為確認陽性或不確定無檢測為陰性者12份陰性參考品10次均檢測為確認陰性。結論該參考品可用于評價HIV抗體確證試劑的質(zhì)量。=關鍵詞人免疫缺陷病毒抗體確認試劑EstablishmentofNationalReferencefC

3、onfirmationReagentofHIVAntibodySONGAijingXUSihongLIXiuhuaetal(NationalInstituteftheControlofPharmaceuticalBiologicalProductsBeijing100050China)=AbstractObjectiveToestablishanationalreferencefevaluationofconfirmationreage

4、ntofHIVantibody.MethodsCollectplasmasamplefromthepatientsdoubtfulpatientswithHIVinfectionaswellasthosefromdonswithoutHIVinfectioninvariousregionsfdeterminationofHIVantibodyRNAantibodyb.Establishthenationalreferencebyscre

5、eningtherepresentativesamplescalibratewiththeHIVconfirmationreagentsfrom4manufacturers.ResultsThenationalreferenceconsistingof27sampleswasestablishedofwhich10wereconfirmedasHIVantibodypositive12asnegative5asindefinite.Af

6、ter12calibrationsallthe10HIVantibodypositivereferenceswereconfirmedaspositive12negativesamplesasnegative.The5indefinitesampleswereconfirmedaspositiveindefinitebutnotnegative.ConclusionTheestablishednationalreferencemight

7、beusedftheevaluationofqualityofHIVantibodyconfirmationreagen.t=KeywdsHumanimmunodeficiencyvirus(HIV)AntibodyConfirmationreagent截至2005年底估計我國艾滋病病毒感染者和患者約65萬人艾滋病疫情仍呈上升趨勢且由高危人群向一般人群擴散。為深入、正確和客觀地了解我國HIV疫情需要對HIV感染者做出準確的診斷。目前一般

8、是采用HIV抗體檢測試劑對可疑人群的樣品進行檢測若呈陽性反應則需要用確認試劑對其抗體進一步確認只有確認HIV抗體陽性者才能最終判斷為HIV感染。因此確認試劑的質(zhì)量對最終判斷是否為HIV感染至關重要。目前國內(nèi)外已有多家實驗室、試劑生產(chǎn)廠家公司研制、生產(chǎn)HIV抗體確認試劑。HIV抗體確認試劑主要分兩大類一類為蛋白印跡類確認試劑其原理是將HIV全病毒裂解抗原用SDSPAGE按其相對分子質(zhì)量大小進行分離然后通過電轉移法將凝膠中的HIV蛋白轉移至

9、硝酸纖維薄膜上。這類基金項目:國家十五攻關課題資助項目(編號2004BA71907).作者單位:中國藥品生物制品檢定所細胞室(北京100050).通訊作者:王佑春Emai:lwangyc@nicpbp.g.cn試劑的抗原種類齊全包括膜區(qū)抗原gp160、gp120和gp41核心抗原p55、p24和p17聚合酶抗原p66、p51和p31另外還有HIV2型特異性抗原另一類試劑為噴膜類確認試劑其原理是將基因工程表達的抗原噴涂在固相載體膜上其抗原

10、條帶不如全病毒裂解抗原種類齊全但包含有主要的抗原條帶且不同單位生產(chǎn)的該類試劑其抗原成分也可能不同。由于生產(chǎn)條件不一標準各異試劑的靈敏度及精密性等會有所差異因此建立統(tǒng)一的HIV抗體確認試劑國家參考品對于保證HIV抗體確認試劑的質(zhì)量具有重要意義?，F(xiàn)將HIV抗體確認試劑國家參考品的研制情況報道如下。材料與方法11樣品從河南、廣西、四川、山西、北京、廣東、湖北等地收集HIV感染者和疑似感染者的血漿樣品151份從北京、重慶以及陜西等地區(qū)收集獻血員

11、血漿樣品30余份從國外采購HIV2型血漿樣品1份。所有#209#中國生物制品學雜志2007年3月第20卷第3期ChinJBiologicalsMarch2007Vo1.20No.3DOI：10.13200j.cjb.2007.03.62.songaj.018樣品時有3份出現(xiàn)抗體帶型見表2。51質(zhì)量標準的確定根據(jù)研制參考品時的實驗數(shù)據(jù)以及參考品標化的數(shù)據(jù)考慮對不同檢測試劑靈敏度、精密度的要求初步確定以下標準:10份HIV抗體確證陽性參考品

12、必須為HIV抗體確認陽性反應(1010)12份HIV抗體確認陰性參考品必須為HIV抗體確認陰性反應(1212)5份HIV抗體不確定參考品不得出現(xiàn)HIV抗體陰性反應(55)。表1HIV抗體確認參考品候選樣品的篩選(ELISA檢測結果均為SCO)Tab11ScreeningofsamplesfestablishmentofnationalreferencefconfirmationreagentofHIVantibody(AlltheELI

13、SAresultsareexpressedasSCO)SampleGenotypeAkzo(HIV)HBsAgAntiHCVGenelabsHIVBlot212ChironCOBASEasyQP1B2415801304129gp160gp120p66p55p51gp41p31p24p17231281156E033150E02P2B1513601464150gp160gp120p66p55p51gp41p31p24p17231901133

14、E053110E04P3BC1418901434165gp160gp120p66p55p51gp41p31p24p17221641134E048120E03P4CBC1515301374164gp160gp120p66p55p51gp41p31p24p17231461142E052140E04P5BC1614201354113gp160gp120p66p55p51gp41p31p24p17211783110E041130E04P6BC1

15、710601330115gp160gp120p66p55p51gp41p31p24p17171561140E045160E03P7B1612601394136gp160gp120p66p24p17251351195E04717E03P8BC712801351139gp160gp120p24p17231652131E042190E04P9AE1314501744144gp160gp120p24p17111101119E022180E04P

16、10ND12129321060138gp160p31p24HIV2NDNDNDIND1B919201344128p24151811127E031180E04IND2B1213901294111gp160gp120p24111143126E037120E03IND3ND13171321910132gp160gp12051823111E018130E01IND4B6197321610116gp1608106Undetectable3160E

17、01IND5B8109331545101gp160gp120p248182Undetectable1120E02N1014201370117NospecificbNDNDNDN2010201330113NospecificbNDNDNDN3010201330115NospecificbNDNDNDN4010801400113NospecificbNDNDNDN5010501300115NospecificbNDNDNDN60105015

18、60115NospecificbNDNDNDN7011101590118NospecificbNDNDNDN8010801352127NospecificbNDNDNDN90108101560114NospecificbNDNDNDN10010751430113NospecificbNDNDNDN11010701350111NospecificbNDNDNDN12011001320115NospecificbNDNDNDNote:N1N

19、12aredetectedwithHIVantibodydetectionreagentmanufacturedbyShanghaiKehuaCo.Ltd.表2候選參考品的標化結果Tab21CalibrationofcidatereferencesReferenceHIVBlot2121234NewLAVBlot12INNOLIATMHIV123HangzhouAoya123Positive10101010101010101010101