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文檔簡介
1、一 教學要求,學習凝集反應的類型及原理掌握間接法檢測血清類風濕因子的方法,實驗三 間接凝集反應檢測血清類風濕因子,二 實驗原理,(1)凝集反應原理 細菌和細胞等顆粒性抗原與相應抗體特異性結合后,在適量的電解質存在下,可以出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象,并將此種反應稱為抗原抗體的凝集反應。根據(jù)檢測凝聚反應的條件可將起分為玻片法,試管法和微量法。根據(jù)試驗中抗原與抗體的檢測方式分為2類:a.直
2、接凝集反應,顆粒性抗原與抗體直接反應而凝集;b.間接凝集反應,將可溶性抗原事先吸附或偶聯(lián)于與免疫無關的顆粒載體表面,制成致敏載體顆粒,再與相應抗體反應。 此方法比較簡單,但因敏感性較差,一般只用在顆??乖庖吆罂贵w效價的檢測、血型配型檢測和細菌檢測等方面。,(2)間接凝集反應檢測類風濕因子原理 類風濕因子(RF)是由于細菌、病毒等感染因子,引起體內產生的以變性IgG(一種抗體)為抗原的一種自身抗體
3、。目前已知有四種類風濕因子,即IgM型、IgA型、IgG型、IgE型。其中IgM和IgA類風濕因子易于檢測,而IgG類風濕因子難于測出。IgA類風濕因子及IgM類風濕因子對類風濕關節(jié)炎診斷有較好的參考價值。 一般醫(yī)院主要采用乳膠凝集法和酶聯(lián)免疫吸附法測定類風濕因子。 將IgG吸附于聚苯乙烯膠乳上,RF與其反應可產生凝集現(xiàn)象。,三 材料與器材(略),,四 操作步驟,(1)在3塊載玻片上分別加一滴RF陽性血清
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