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文檔簡介
1、page 0 © 2010 Roche,,HPV -DNA檢測現(xiàn)狀及2012最新國際宮頸癌篩查指南,內(nèi)容:1. HPV介紹2. HPV-DNA檢測產(chǎn)品及各自特點3. 2012最新國際宮頸癌篩查指南,HPV介紹,根據(jù)感染組織類型分為:皮膚組織
2、粘膜組織,HPV介紹,E:早期基因區(qū)編碼早期6個蛋白L:晚期基因區(qū)編碼晚期2個蛋白,感染后的存在狀態(tài):狀態(tài)一:非整合狀態(tài)狀態(tài)二:整合到宿主細胞,http://www.nature.com/nrc/journal/v2/n1/slideshow/nrc700_F1.html,HPV介紹,,,,HPV-DNA檢測(進口并取得FDA注冊證),,,,HPVDNA檢測(國產(chǎn)),,,,HPV-DNA檢測(按不同原理分類),HPVDNA檢測,Q
3、IAGEN HC2,原理:基于信號放大的酶標板技術(shù)的化學(xué)發(fā)光檢測的核酸雜交檢測方法(雜交捕獲)流程:裂解-雜交-捕獲-反應(yīng)-沖洗-信號收集-判讀時間:手工操作3.5小時,儀器操作4.5小時結(jié)果:檢測13種HPV高危型,不分型主要問題:與個別HPV亞型會發(fā)生交叉反應(yīng),無內(nèi)對照,約5%假陽性率,DML2000,HPVDNA檢測,Hologic Cervista HRHPV,原理:基于專利Invader® 酶切信號放大技術(shù)
4、流程:磁珠分離核酸提?。盖行盘柗糯螅瓱晒鈾z測時間:4小時自動化孵育 + 2小時人工操作(半自動)結(jié)果:14種高危型16、31、33、52、58、18、39、45、66、68、51、56、66,不分型主要問題:可能與其它HPV如HPV67和70發(fā)生交叉反應(yīng),從而產(chǎn)生假陽性結(jié)果,HPVDNA檢測,Hologic Cervista(r)HPV 16/18,原理:基于專利Invader® 酶切信號放大技術(shù)流程:磁珠分離核酸提
5、?。盖行盘柗糯螅瓱晒鈾z測時間:4小時自動化孵育 + 2小時人工操作(半自動)結(jié)果:僅對16、18分型主要問題:可與高水平的高危型HPV31發(fā)生交叉反應(yīng)。非常低的HPV感染或樣本可能導(dǎo)致假陰性,HPVDNA檢測,ROCHE PCR-多色熒光探針法,原理:基于PCR反應(yīng)結(jié)合不同熒光染料的探針檢測高危型HPV并對16、18分型流程:核酸提?。璓CR擴增檢測時間:5小時(手工操作時間15分鐘)結(jié)果:Cutoff值,14種高危型,并
6、對16、18分型最新產(chǎn)品,文獻見美國ATHENA實驗(Lancet Oncol),cobas 4800 HPV檢測系統(tǒng),GT 16,高危型混合 (12 GT),GT 18,,,,,31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68,HPVDNA檢測,凱普21種人乳頭狀瘤病毒(HPV)分型檢測試劑盒,原理:PCR+基因芯片導(dǎo)流雜交技術(shù)流程:核酸提取—PCR擴增—導(dǎo)流雜交-顯色時間: 3.5
7、-4個小時(手動)結(jié)果:21格某格顯色即為某HPV亞型陽性(13+5+3),對21種HPV分型(含其它HPV亞型)主要問題:手工操作,易交叉污染,沒有經(jīng)過臨床實驗,HPVDNA檢測方法,亞能人乳頭瘤病毒基因分型(23型)檢測試劑盒,原理:使用自行設(shè)計的HPV基因組中的特異性引物,對待測樣品中可能存在的HPV 基因型進行PCR擴增并進行生物素標記,再將PCR擴增產(chǎn)物與固定在芯片上的23個特異性探針進行特異性的分子雜交,并通過化學(xué)顯色方
8、式判讀結(jié)果( PCR-反向點雜交法)流程:核酸提取—PCR擴增—導(dǎo)流雜交-顯色結(jié)果:膜條顯色直接提示感染的HPV亞型,23種亞型(18+5)(含其它HPV亞型)主要問題:手工操作,易交叉污染,沒有經(jīng)過臨床實驗,HPVDNA檢測,透景l(fā)uminex,原理:流式熒光技術(shù),PCR產(chǎn)物和微球上交聯(lián)的探針根據(jù)堿基互補配對的原理雜交,加入熒光標記反應(yīng),最后在流式熒光檢測儀上檢測熒光信號。流程:核酸提?。璓CR擴增-微球雜交-熒光標記反應(yīng)-熒
9、光分析結(jié)果:26種亞型(19+7),含其它HPV亞型主要問題:沒有經(jīng)過臨床實驗,HPV-DNA檢測主要產(chǎn)品對比表,2012最新國際宮頸癌篩查指南,2012年刊登在美國癌癥學(xué)會雜志(ACS)和美國陰道鏡及宮頸病理學(xué)會雜志( ASCCP)---宮頸癌預(yù)防及早期診斷指南,2012年,ACS/ASCCP/ASCP 最新指南HPV聯(lián)合細胞學(xué)篩查:30-65歲的婦女,Pap & HPV,ASC-US & HPV+ or ≥L
10、SIL,NILM & HPV+,Repeat co-test,HPV16 or HPV16/18 genotyping,Colposcopy,1 year,1 year,NILM & HPV-ASC-US & HPV-,Colposcopy,5 years,,+,,-,,+,5 years,,-,Saslow D, et al. Am J Clin Pathol 2012; 137:516-42,Cytolog
11、y alone is noted as an acceptable (but not preferred) option for women 30-65 yrs old every 3 years,immediately,舊指南與新指南的區(qū)別,19,1. ASC-US triage (≥21 years),2. Adjunct screening (≥30 years),ASC-US,,HPVDNA,Colposcopy,Re-scr
12、een (LBC; 1 year),Negative Cytology(NILM),,,,,,–,+,HPVDNA,,+,,+,HPV16/18,Colposcopy,Re-screen (LBC & HPV; 1 year),,,,–,+,Screen (≥3 year),,,–,Re-screen (LBC & HPV; 1 year),Re-screen (LBC; 3 years *acceptab
13、le OR LBC and HPV; 5 years *preferred),,Re-screen (5 years),,co-testing (30-65 years),,For women (30 – 65 yrs), cytology alone every 3 years is noted as an acceptable (but not preferred) option only,聯(lián)合檢測將是未來的篩查方向!,21,,
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