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1、重慶醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文1.Ghrelin促進(jìn)大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外血管生成的研究2.冠心病患者血漿ghrelin水平及其基因多態(tài)性的研究姓名:王麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專(zhuān)業(yè):老年醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:陳慶偉201205重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文結(jié)論:G h r e l i n 及其受體G H S R 在大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞上均有表達(dá),1 0 一、1 0 ‘7 M g h r e l i n 可明顯促進(jìn)大鼠心肌微血管內(nèi)皮的增殖、遷移及M
2、a t r i g e l 小管樣結(jié)構(gòu)的生成。關(guān)鍵詞:G h r e l i n ;G H S R ;心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞;血管生成第二部分G h r e I In 促進(jìn)大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及M a t rig e I 小管樣結(jié)構(gòu)生成的分子機(jī)制研究目的:探討生長(zhǎng)激素促分泌物受體的內(nèi)源性配體g h r e l i n 促進(jìn)大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及M a t r i g e l /j 、管樣結(jié)構(gòu)生成的分子機(jī)制。方法:(
3、1 ) 分別用1 0 。9 M ~l O 擊M g h r e l i n 孵育心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞1 5 r a i n 后,或10 - 7 M g h r e l i n 孵育細(xì)胞0 ~6 0 m i n 后,收集細(xì)胞W e s t e r n .b l o t 檢測(cè)E R K 、A k t 和e N O S 磷酸化表達(dá)的變化。( 2 ) 分別用E R K 、A k t , e N O S 和G H S R l a 的特異性抑制劑P
4、D 9 8 0 5 9 、L Y 2 9 4 0 0 2 、L - N A M E 和[ D .L y s 3 ] .G H R P .6 預(yù)處理心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞3 0 m i n ,再用g h r e l i n 孵育細(xì)胞1 5 m i n 后,收集細(xì)胞W e s t e r n —b l o t 檢測(cè)其E R K 、A k t 和e N O S 磷酸化表達(dá)的變化。( 3 ) 分別用E R K 、A k t 、e N O S 和G
5、H S R l a 的特異性抑制劑P D 9 8 0 5 9 、L Y 2 9 4 0 0 2 、L - N A M E 和[ D - L y s 3 1 一G H R P - 6 干預(yù)心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞后,檢鋇t J g h r e l i n對(duì)心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和M a t r i g e l t j 、管樣結(jié)構(gòu)生成的影響,及其一氧化氮生成的變化。結(jié)果:G h r e l i n 可呈時(shí)間和劑量依賴(lài)性的促進(jìn)心肌微血管內(nèi)皮細(xì)
6、胞E R K 、A k t和e N O S 的磷酸化表達(dá)。G h r e l i n 在促進(jìn)心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外血管生成的同時(shí)伴有E R K 、A k t 和e N O S 的磷酸化表達(dá),及其一氧化氮的釋放增加。G H S R .1 a 的特異性抑制劑【D - L y s 3 ] - G H R P .6 可完全抑常l J g h r e l i n 促心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外血管生成效應(yīng)、磷酸化蛋白的表達(dá)及其一氧化氮的釋放增加。E R
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