spio標記內(nèi)皮祖細胞活體示蹤裸鼠腦膠質瘤1.5tmr成像的實驗研究

1、第三軍醫(yī)大學碩士學位論文SPIO標記內(nèi)皮祖細胞活體示蹤裸鼠腦膠質瘤1.5T MR成像的實驗研究姓名：王舒楠申請學位級別：碩士專業(yè)：影像醫(yī)學與核醫(yī)學指導教師：張偉國20090501第二軍醫(yī)大學碩士學位論文發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)細胞漿內(nèi)有內(nèi)皮細胞的特征性結構W e i b e l —P a l a d e 小體，細胞內(nèi)存在較多線粒體、內(nèi)質網(wǎng)等細胞器，提示細胞代謝旺盛。免疫熒光檢測陽性表示其正逐漸向內(nèi)皮細胞分化，成血管實驗側面證實了培養(yǎng)細胞具有內(nèi)皮細胞的部

2、分功能。( 2 ) 體外s P I o 標記E P C s 后經(jīng)普魯士藍染色見胞漿內(nèi)有藍染顆粒，電鏡下亦可見胞漿內(nèi)大量高密度物質。隨著s P I O 濃度的提高，標記的效率也隨之提高，但對細胞的毒性也越大。在S P I O濃度為2 5 u ∥I n l 和5 0 u ∥向條件下，臺盼藍染色計數(shù)死細胞數(shù)約為9 ％～1 2 ％，與未標記細胞( 約1 0 ％) 相比無明顯統(tǒng)計學差異。大于5 0 u g ／“條件下( 7 5 u g ／皿、l

3、O O u ∥m l 、1 2 5 u ∥l l l l ) ，臺盼藍計算死細胞的比例分別約為2 1 ％、3 3 ％和4 9 ％，明顯高于未標記細胞( 約1 0 ％) ( P < o ．0 5 ) 。M T T 生長曲線證實E P C s 的增值活力在S P I O 濃度小于5 0 u ∥皿條件下無明顯改變，高于7 5 u ∥叫細胞增殖活力顯著減低。( 3 ) 細胞移植后第1 天在T 2加權像上即可發(fā)現(xiàn)腫瘤內(nèi)有低信號顯示，隨著時間

4、的延長，低信號越明顯，而在移植未標記細胞的對照組及實驗組裸鼠的對側正常腦組織則沒有明顯的信號變化。病理切片普魯士藍染色與M R I 所示的低信號區(qū)相吻合，腦腫瘤內(nèi)藍染的E P c s 顯著高于對側正常腦組織和其他器官( 心臟、肝臟、脾臟、腎臟和肺臟) ，主要聚集于腫瘤區(qū)微血管豐富的部位。結論：( 1 ) 人臍帶血來源豐富、取材方便，是獲得E P c s 的理想來源，分離出的E P C s在特定的培養(yǎng)條件下能定向向內(nèi)皮細胞分化。( 2 )

5、 用一定濃度的S P I O —P L L 復合物標記細胞效率高、毒性小，能用于M R 進行活體示蹤，是一種簡便實用的細胞標記工具，其標記E P C s 的最佳濃度在2 5 ～5 0 u ∥“之間。( 3 ) E P C s 靶向歸巢至膠質瘤區(qū)，可以作為分子靶向治療的有效載體及早期診斷膠質瘤的影像標記物；1 ．5 TM R I 能夠活體示蹤磁性標記的E P C s 在膠質瘤中的遷移、分布和轉歸，是監(jiān)測移植細胞的有效方法。關鍵詞：膠質瘤；