乏氧再氧合條件下39;60coγ射線照射對(duì)人喉鱗癌hep2細(xì)胞hif1α、p53蛋白表達(dá)的影響

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文乏氧再氧合條件下Coγ射線照射對(duì)人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞HIF-1α、p53蛋白表達(dá)的影響姓名：張繼華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師：王寶山20080301中文摘要乏氧再氧合條件下6 0 C o y 射線照射對(duì)人喉鱗癌H e p 。2 細(xì)胞H I F —l a 、p 5 3 蛋白表達(dá)的影響摘 要目的：頭頸腫瘤也同其它大多數(shù)實(shí)體腫瘤一樣，瘤體內(nèi)的部分細(xì)胞處于乏氧環(huán)境之中，因而降低了其對(duì)放療的敏感性。目前

2、乏氧引起的頭頸腫瘤對(duì)放療抵抗性增加的確切機(jī)制尚不明了，因此有必要深入研究乏氧同頭頸腫瘤放療抵抗的關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)將模擬在體腫瘤細(xì)胞微環(huán)境，體外建立不同氧供狀態(tài)下的細(xì)胞模型，探討常氧、乏氧及乏氧再氧合三種條件下6 0 C o y 射線照射對(duì)入喉鱗癌H e p ．2 細(xì)胞凋亡的影響，并以p 5 3 蛋白為切入點(diǎn)，探討其作用機(jī)制。以為頭頸腫瘤的治療奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法：人喉鱗癌( H e p ．2 ) 細(xì)胞培養(yǎng)于含1 0 ％d x 牛血清、青霉素(

3、 1 0 0 U ／m 1 ) 、鏈霉素( 1 0 0 } t g ／m 1 ) 的R P M I ．1 6 4 0 培養(yǎng)基中，置于3 7 ℃，5 ％C 0 2 ，2 0 ％0 2 ( 常氧) 和／或3 7 ℃，5 ％C 0 2 ，2 ％0 2 ，9 3 ％N 2 ( 乏氧) 的培養(yǎng)箱，常規(guī)傳代培養(yǎng)。待細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后，將細(xì)胞分為6 組：A 組( 常氧組) 、B組( 乏氧組) 、C 組( 乏氧再氧合組) 、D 組( 常氧放療組) 、

4、E 組( 乏氧放療組) 、F 組( 乏氧再氧合放療組) 。乏氧條件下培養(yǎng)B 、C 、E 、F 組細(xì)胞2 4 h ，之后C 、F 組細(xì)胞再于常氧條件下繼續(xù)培養(yǎng)4 h ，D 、E 、F 三組細(xì)胞分別接受照射劑量S G y 的6 0 C o y 射線照射，照射后換新培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)2 4 h ，收集各組細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測(cè)H I F ．1 a ( H y p o x i a I n d u c i b l eF a c t o r1a l p