體外擴增對臍血cd13339;細胞歸巢相關分子表達的影響的研究

1、．蠶．能夭晉碩士學位論文( 2 0 0 6 屆)體外擴增對臍血C D l 3 3 + 細胞歸巢相關分子表遮的影響的研究S t u d y o n t h e e l f e e l so f e x v i v o e x p a n s i o n o n t h eh o m i n g —r e l a t e dm o l e c u l e s e x p r e s s i o no f U C B C D l 3 3 +

2、c e l l s研究生姓名——叢垂垂指導教師姓名 堂! I 塾籃)專業(yè)名稱 立壁壘壅莖研究方向 魚壘疸盟些墨} 當，墮盎型五～．論文提交1 3 期 ；Q 逝±i 旦體外擴增對臍血C D l 3 3 + 細胞歸巢相關分子表達的影響的研究 中文摘要受體的表達。結果1 ． 擴增前的新鮮臍血中，C D l 3 3 + 細胞的含量為0 ．5 8 + 0 ．2 9 ％，經(jīng)M A C S方法分離純化后，單份臍血可獲得1 ．2 2 a ：0

3、 ．6 8 x 1 0 6 個C D l 3 3 + 細胞，純度為9 5 ．0 2 - - 1 = 2 ．4 0 ％。2 ． 經(jīng)在1 4 天的體外擴增，各階段的H S P C 均得到有效擴增；至1 4 天時，總有核細胞數(shù)和C D l 3 3 + 細胞數(shù)分別擴增了6 1 3 ．4 8 倍和2 5 ．8 3倍，表達相關粘附分子的各C D l 3 3 + 細胞亞群均有不同程度的擴增。3 ．9 0 ％以上的臍血C D l 3 3 + 細胞表達粘

4、附分子C D 4 9 d ，C D 5 4 和C D 3 1 ，5 0 ％左右的臍血C D l 3 3 + 細胞表達粘附分子C D l l a ，2 0 ％左右的臍血C D l 3 3 + 細胞表達粘附分子C D 6 2 L 。擴增早期C D 5 4 、C D l l a 和C D 6 2 L表達上調，而C D 4 9 d 和C D 3 1 的表達無明顯變化，隨著擴增時間的延長，各粘附分子的表達均有不同程度的下調。4 ． 擴增后C D

5、l 3 3 + C X C R 4 + 細胞的數(shù)量也明顯增加，但是趨化因子受體C X C R 4 在C D l 3 3 + 細胞上的表達卻于擴增4 天時呈下降趨勢，1 0 天、1 4 天時顯著低于擴增前細胞水平( p < 0 ．0 5 ) 。結論1 ． 采用M i n i M A C S 分離方法，經(jīng)兩次免疫磁珠親和過柱分離后，可獲得純度達9 5 ．0 2 _ + 2 ．4 0 ％的C D l 3 3 + 細胞，提示這是一種從臍血

6、中分選C D l 3 3 + 造血干／祖細胞的高效而實用的方法。2 ． 經(jīng)有核細胞計數(shù)以及流式細胞術等檢測手段證明，在含血清、無基質細胞支持的條件下，采用S C F 、I L ．6 、T P O 及F L 組成的造血因子聯(lián)合擴增系統(tǒng)，對T N C 及C D l 3 3 + 造血干／祖細胞均有顯著擴增效果。3 ． 在此擴增體系中，隨著擴增時間的延長，所有的粘附分子以及趨化因子受體的表達均有不同程度的下降；而細胞因子短期刺激( 4 到7T