內(nèi)皮細胞ea.hy926氧化損傷及藥物保護的脂質(zhì)組學研究

1、天津大學博士學位論文內(nèi)皮細胞EA.hy926氧化損傷及藥物保護的脂質(zhì)組學研究姓名：楊潔申請學位級別：博士專業(yè)：制藥工程指導教師：元英進2009-08A B S T R A C TT h es t u d y o fp h o s p h o l i p i d s m e t a b o l i s m c h a n g e s i n o x i d a t i v e s t r e s s i n d u c e de n d

2、o t h e l i a lc e l l s ( E C s ) i si m p o r t a n t t oe l i c i tt h el i n kb e t w e e n e n d o t h e l i u md y s f u n c t i o na n d c e r e b r a l ／c a r d i o v a s c u l a r d i s e a s e s , I n t h i s r

3、 e s e a r c h ，w e s e t e x o g e n o u s H 2 0 2i n d u c e dh u m a n u n b i l i cv e i ne n d o t h e l i a lc e l l l i n eE A ．h y 9 2 6 a s t h em o d e l ，a n da p p l i e dl i p i d o m i c s w i t h s i g n a

4、 l t r a n s d u c t i o n s t r a t e g y t o g e t h e r t o e x p l o r e t h e u n d e r l y i n gm e c h a n i s m s o ft e t r a m e t h y l p y r a z i n e ( T M P ) a n db u t y l i d e n e p h t h a l i d e ( B

5、P ) p r o t e c t i o no f e n d o t h e l i a lc e l l sa g a i n s to x i d a t i v es t r e s s ．I nt h i s r e s e a r c h ，w ee s t a b l i s ht h ep h o s p h o l i p i d sp r o f i l eo fE A ．h y 9 2 6 c e l l u s

6、 i n gh i g h —t h r o u g h p u tL C ／E S I ／M S ”t e c h n i q u e s ．E i g h tm a i nc l a s s e s ( P G , P E ，P C ，P I ，P S ，P A ，L P C a n d L P E ) i n c l u d i n gm o r et h a n2 0 0s p e c i e so f p h o s p h

7、o l i p i d sw a s d e t e c t e da n da n a l y z e dq u a l i t a t i v e l ya n dq u a n t i t a t i v e l y ．B y m u l t i —s t a t i s t i c a n a l y s i s ，w ef o u n dt h ep h o s p h o l i p i d sw i t hl o n gc

8、 a r b o nc h a i n ，p o l y u n s a t u r a t e df a t t ya c i d s ( P U F A s ) o re t h e rl i n k i n s n - 1 p o s i t i o n ( e t h e r p h o s p h o l i p i d s ) t a k ep r i o r i t i e s i n o x i d a t i v ed

9、 e g r a d a t i o n ；m e a n w h i l e ，p h o s p h o l i p a s e A 2 w a s a c t i v a t e d t o g e n e r a t e d a g r e a t a m o u n t o f】y s o p h o s p h o l i p i d s i n c l u d i n gL P Ca n dL P E 。T h e s e

10、a b o v et w om a i n f i n d i n g s w e r er e s p o n s i b l e t ot h ei n j u r yo f E C s ．O u r r e s u l t ss h o w e dt h a t w i t hT M P p r e t r e a t m e n t ，c o n t e n to f P C s ，e s p e c i a l l yt h

11、eP C sw i t h l o n g c a r b o n c h a i n ，P U F A s o r e t h e r P C s i n i n j u r e d c e l l s w a sl a r g e l yi n c r e a s e da n d ，c o n t e n t so f L P C a n dL P E w e r ed e c r e a s e d ．T h e s er e

12、s u l t si n d i c a t e dt h ea n t i o x i d a t i o na c t i v i t ya n di n h i b i t i o no f P L A 2 e f f e c to f T M P ．B e s i d eo f t h e s ep r o p e r t i e s ，B P a l s oh a di n h i b i t o r ye f f e c t

13、o v e rP I —P L Ca n dc o n s e q u e n t i a l l yi n c r e a s e dP Ic o n t e n t s ．T M P a n d B P s h o w e de x t r a o r d i n a r ya b i l i t i e si n p r o t e c t i o no f E C s f o ri t sa n t i o x i d a t

14、i o no f p h o s p h o l i p i d sa n d a l t e r a t i o no f p h o s p h o l i p a s e a c t i v a t i o np r o p e r t i e s ．S i n c eP L A ，w a so n eo f t h e k e yf a c t o r s i n o u rr e s u l t s ，w ea d dP D

15、9 8 0 5 9a n dE T Y A ，i n h i b i t o r s o fM A P Kp a t h w a ya n d o fC O X ，L O Xp a t h w a y w h i c h w e r es u p p o s e dt o b et h eu p s t r e a ma n dd o w n s t r e a ms i g n a lo f P L A 2 ，t ot h e i n

16、 j u r ym o d e l ．W i t hm u l t i ．s t a t i s t i c a n a l y s i s ，w ef i n d s i m i l a r i t yi n p h o s p h o l i p i d sm e t a b o l i s mp a R e r nb e t w e e n E T Y A a n dT M P p r e t r e a t e dE C s ．

17、H o w e v e r , E T Y A s h o w e d s t r o n g e rp r e f e r e n c eo v e re t h e rP C t h a nP C sw i t hl o n gc a r b o nc h a i n o rp o l y u n s a t u r a t e df a t t ya c i d s ，w h i c hi n d i c a t e d t h

18、a tt h e a n t i o x i d a t i o na c t i v i t y o f E T Y A w a s n o ta sg o o da sT M E S i m i l a r i t yi n p h o s p h o l i p i d sm e t a b o l i s m p a R e r nb e t w e e nB Pa n dP D 9 8 0 5 9 p r e t r e a