基因疫苗pcdna3.0psma抑瘤效應及免疫機制的實驗研究

1、中山大學碩士學位論文基因疫苗pcDNA3.0-PSMA抑瘤效應及免疫機制的實驗研究姓名：汪波申請學位級別：碩士專業(yè)：免疫學指導教師：曹開源20060429中山大學2 0 0 3 級碩士學位論文苗在荷瘤小鼠模型中的抑瘤效應及誘導產生特異性免疫應答的特征，為前列腺癌基因疫苗研究拓展了新思路，同時也為前列腺癌的預防和免疫治療提供了實驗基礎與理論依據。方法一：脂質體轉染法分別將P S M A —p c D N h 3 ．O 質粒和D c D N

2、 A 3 ．0 質粒轉染至S P 2 ／O細胞，G 4 1 8 篩選后獲得了穩(wěn)定生長的陽性克隆細胞抹，R T —P C R ，間接免疫熒光法，w E S T E R N B L O T 檢測P S M A 蛋白的表達。二：將B A L B ／c 小鼠分為免疫組和對照組，免疫組肌注P s M A —p c D N A 3 ．0 質粒，對照組肌注p c D N A 3 ．0 質粒進行免疫，共免疫4 次，免疫后2 周將S P 2 ／O —P

3、S M A 腫瘤細胞皮下注入小鼠，建立荷瘤小鼠模型，通過比較空載組與免疫組小鼠的腫瘤形成與破潰時間，成瘤率，腫瘤大小，平均瘤重，生存率觀察P S M A —p c D N A 3 ．0基因疫苗的抗瘤效應。三：將B A L B ／c 小鼠分為免疫組和對照組，免疫組肌注P S M A - p c D N A 3 ．0 質粒，對照組肌注p c D N A 3 ．0 質粒，共4 次，提取每次免疫后兩周小鼠的血清和脾淋巴細胞，對血清抗體和脾淋巴細

4、胞的增殖和殺細胞毒效應進行觀察來探討抑瘤效應的免疫學機制。結果一：R T —P C R ，間接免疫熒光法和W E S T E R N B L O T 均證明成功構建了穩(wěn)定表達P S M A 小鼠腫瘤細胞模型。= ：成功構建了荷瘤小鼠模型?？蛰d組小鼠腫瘤形成與破潰時間為1 0 天與2 2 天，成瘤率為1 0 0 ％，平均瘤重達8 ．3 2 8 ±1 ．3 2 克，腫瘤生長迅速，生存率低。免疫組小鼠腫瘤形成與破潰時間為1 5 天和