慢病毒介導(dǎo)的shrna抑制nav1.7基因表達(dá)在大鼠骨癌痛研究中的應(yīng)用

1、蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名： 查! 棗日 期：，亭? ! 三：窒慢病毒介導(dǎo)的s h R N A 抑帶l J N a

2、v l ．7 基岡表達(dá)在大鼠骨癌痛研究一{ J 的應(yīng)用 中文摘要慢病毒介導(dǎo)的s h R N A 抑制N a v 1 ．7 基因表達(dá)在大鼠骨癌痛研究中的應(yīng)用中文摘要 中又捅要第一部分：骨癌痛大鼠D R G 部位N a v l ．7 表達(dá)變化和脊髓膠質(zhì)細(xì)胞活化目的觀察骨癌痛大鼠背根神經(jīng)節(jié)( D o r s a l R o o tG a n g l i o n ，D R G ) 部位N a v l ．7 表達(dá)變化和脊髓膠質(zhì)細(xì)胞的活化情況。方法

3、3 0 只雌性S D 大鼠，體重1 8 0 ～2 2 0 9 ，隨機(jī)分為3 組：正常組( N 組，n = 6 ) ，假手術(shù)組( S h a m 組，n = 6 ) 和模型組( C a 組，n = 1 8 ) 。正常組不做處理，假手術(shù)組和模型組大鼠分別于左脛骨近端骨髓腔注射生理鹽水或W a l k e r 2 5 6 乳腺癌細(xì)胞( 1 ×1 0 7 ／m 1 ) 1 0 M 1 。三組均在建模前、建模后第3 、6 、9 、1 2

4、 d 測(cè)定大鼠左后肢機(jī)械縮足閾值( M e c h a n i c a l W i t h d r a w a l T h r e s h o l d ，M W T ) ，正常組和假手術(shù)組大鼠于建模后第1 8 d 處死，模型組于建模后第8 、1 2 、1 8 d 各處死6 只大鼠，取D R G 和L 4 ～6 脊髓組織，用R T - P C R 和W e s t e r n - B l o t 方法檢測(cè)大鼠D R G 部位N a y l

5、 ．7 和脊髓G F A P ( 星形膠質(zhì)細(xì)胞激活標(biāo)志) 、O X 4 2 ( 小膠質(zhì)細(xì)胞激活標(biāo)志) 的表達(dá)變化情況。結(jié)果建模后6 ～1 2 d ，模型組大鼠左后肢機(jī)械縮足反射閾值顯著下降，且呈時(shí)間依賴性進(jìn)展；建模后第8 d ，D R G 部位N a v l ．7 的轉(zhuǎn)錄和蛋白水平顯著增高( P < 0 ．0 5 ) ，1 2 d 、1 8 d 繼續(xù)增高( J P < O ．0 5 ) ；建模后第8 d 、1 2 d ，脊髓

6、O X 4 2 的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)也顯著增高( P < O ．0 5 ) ；建模后1 2 d 、1 8 d 時(shí)G F A P 的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)顯著增高( P < O ．0 5 ) 。結(jié)論骨癌痛大鼠D R G 部位N a v l ．7 表達(dá)增高，相應(yīng)節(jié)段的脊髓膠質(zhì)細(xì)胞激活。關(guān)鍵詞骨癌痛；D R G ；N a v l ．7 ；膠質(zhì)細(xì)胞第二部分：抑制N a v l ．7 表達(dá)的s h R N A 慢病毒載體的構(gòu)建目的設(shè)計(jì)合成針對(duì)大鼠N a