高表達(dá)于cd439;cd2539;調(diào)節(jié)性t細(xì)胞中的新型fr4變異體的確認(rèn)和鑒定

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文高表達(dá)于CD4CD25調(diào)節(jié)性T細(xì)胞中的新型FR4變異體的確認(rèn)和鑒定姓名：趙韌申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：吳玉章20090501第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文F R 吖和F R - 丫’由于缺乏供G P I 錨定附著的信號而組成性地被分泌。F R ．a(chǎn) 表達(dá)在正常成體組織極化上皮細(xì)胞的腔面，包括腎小管基底部，肺內(nèi)I 型和Ⅱ型肺泡上皮，脈絡(luò)從，卵巢，輸卵管，子宮，附睪，下頜唾液腺，支氣管淋巴結(jié)，胎盤的滋養(yǎng)層以及

2、視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞基底膜。F R ．B 表達(dá)在正常骨髓細(xì)胞生成晚期以及胎盤，脾和胸腺中，也表達(dá)在慢性粒細(xì)胞性白血病( C M L ) 、急性粒細(xì)胞性白血病( A M L ) 的白血病原始細(xì)胞中。n Ⅵ表達(dá)在正常和惡性造血細(xì)胞中，包括脾，骨髓，胸腺，以及卵巢癌，宮頸癌和子宮癌。鼠類F R 亞型在文獻(xiàn)中稱為F R l ，2 和3 ，經(jīng)常被認(rèn)為分別對應(yīng)于人類的F 黜．a(chǎn) ，一B和吖。通過基因數(shù)據(jù)庫搜索的方法發(fā)現(xiàn)第三種小鼠葉酸受體．F R 4

3、，并發(fā)現(xiàn)F l u 主要表達(dá)于脾臟和胸腺，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)F R 4 主要表達(dá)于脾淋巴細(xì)胞、成熟胸腺細(xì)胞，特別是T 淋巴細(xì)胞表達(dá)F R 4 而不是F R l 和F I 也的I l l ：鼢隊和蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)現(xiàn)天然調(diào)節(jié)性T細(xì)胞( n 刪T r e 曲組成性高表達(dá)F R 4 。但是，到底F I Ⅵ是分泌性蛋白還是錨定在細(xì)胞膜上仍然不清楚。我們在克隆小鼠脾細(xì)胞F I Ⅵ的C D S 區(qū)時發(fā)現(xiàn)F R 4 存在一種新的變異體，命名為F I Ⅵv

4、，其C D S 區(qū)全長大小為8 4 3 b p ，并且含有一個1 0 8 b p 的完整的內(nèi)含子成分。w e s t 鋤b 1 0 t 分析表明F R 4 v 存在不同于F R 4 的相應(yīng)蛋白，大小介于3 1 ．3 8 k D a 。 我們通過用P I ．P L C 處理小鼠脾細(xì)胞后進(jìn)行w e s t 鋤b l o t 和流式分析，第一次證實H H 變異體主要是通過G P I 錨定在細(xì)胞表面的膜相關(guān)蛋白。我們利用F A C S 分選出小

5、鼠脾細(xì)胞中高純度的C D 8 + ．C D 4 + C D 2 5 。，C D 4 + C D 2 5 + T 細(xì)胞，w e s t 鋤b l o t 檢測表明，F(xiàn) R 4 v 組成性表達(dá)在C D 4 + C D 2 5 + 調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞( T r e g ) 中。綜上所述，我們確認(rèn)并鑒定了一種通過選擇性剪切，保留內(nèi)含子而產(chǎn)生的新型F R 4變異體，其編碼蛋白F R 4 v 通過G P I 錨定在細(xì)胞表面，并且組成性表達(dá)在T r e