門靜脈耐受中cd,439;cd,2539;foxp,339;調(diào)節(jié)性t細(xì)胞及th17細(xì)胞的作用及機(jī)制研究

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文門靜脈耐受中CDCDFoxp調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及Th17細(xì)胞的作用及機(jī)制研究姓名：何凡申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)（器官移植）指導(dǎo)教師：陳知水20090501華 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文 華 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文 3 測證實(shí)，過繼輸注 PVI 小鼠 CD4 +T 后，術(shù)后第 7d，移植物中淋巴細(xì)胞浸潤明顯減輕，心肌結(jié)構(gòu)基本正常。 結(jié)論： 結(jié)論：門靜脈輸注同種抗原可以誘導(dǎo)抗原特異

2、性的免疫耐受，過繼輸注耐受小鼠的CD4 +T 細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移耐受，而過繼輸注耐受小鼠 CD8 +T 細(xì)胞無此效應(yīng)。 關(guān)鍵詞 關(guān)鍵詞：T 細(xì)胞，門靜脈輸注，免疫耐受 第二部分 第二部分 CD4 +CD25 +Foxp3 +調(diào)節(jié)性 調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞在門靜脈耐受中的作用 細(xì)胞在門靜脈耐受中的作用 目的： 目的： 探討門靜脈耐受模型中 CD4 +CD25 +Foxp3 +調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞的比例，及其在誘導(dǎo)耐受中的作用及機(jī)制。 方法： 方法： 于

3、門靜脈輸注同種抗原后第 7，14 及 21 天，取小鼠血、肝及脾臟，流式細(xì)胞儀檢測 CD4 +CD25 +Foxp3 +調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞的比例。流式細(xì)胞儀分選 PVI 小鼠 CD4 +CD25 +T 細(xì)胞，以不同的濃度加入 C57 所刺激的 Balb/c 小鼠淋巴細(xì)胞混培體系中，觀察對細(xì)胞增殖的影響。分別于門靜脈輸注后第 1，3，5 天給予 CD25 單抗腹腔注射，第 7 天檢測CD4 +CD25 +Foxp3 +調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞的比例

4、；并于第 7 天行 C57 小鼠的心臟移植，觀察移植物存活。門靜脈輸注后，給予 CD25 單抗（或同型對照抗體）腹腔注射，ELISPOT 檢測外周血淋巴細(xì)胞分泌 IL-2，IL-4，IL-10 及 IFN-γ 的能力；TUNEL 染色檢測肝內(nèi) CD4 + T細(xì)胞 CD8 + T 細(xì)胞的凋亡比例。 結(jié)果： 結(jié)果：門靜脈輸注同種抗原后，CD4 +CD25 + T 細(xì)胞的比例明顯升高，術(shù)后第 7 天達(dá)到高峰，之后逐漸下降，至第 21 天仍然維

5、持在高于正常小鼠的水平。CD4 +CD25 +Foxp3 +T 占CD3 +T 比例表現(xiàn)出同樣的趨勢。CD4 +CD25 +T 在體外可以明顯抑制 C57 細(xì)胞所刺激的Balb/c 小鼠淋巴細(xì)胞增殖， 并呈現(xiàn)出濃度依賴性。 CD25 單抗腹腔注射可以清除體內(nèi) 70% CD4 +CD25 +T 細(xì)胞，門靜脈輸注小鼠給予 CD25 單抗腹腔注射后，后續(xù)的心臟移植物存活時(shí)間明顯縮短，伴隨著 CD4 +CD25 +Foxp3 +T 占 CD3