mba論文羅非魚性別分化相關(guān)基因縱向表達(dá)模式的研究pdf

1、學(xué)位論文答辯委員會(huì)組i I l主席：廂叫委一 殤鰳1 垤旋彰菪．定 r J ／廣J ’導(dǎo)師： 哆先軍時(shí)間：≯，鄉(xiāng)．皇．歲D羅非魚性別分化相關(guān)基因縱向表達(dá)模式的研究摘要性別分化是一些誘導(dǎo)信號(hào)作用下性別決定基因選擇性地表達(dá)的結(jié)果。溫度和外源性激素是生產(chǎn)上誘導(dǎo)單性魚常用的手段。為了了解溫度、1 7 a 一甲基睪丸酮( 1 7 a ．m e t h y l t e s t o s t e r o n e ，M T ) 對(duì)羅非魚性別分化相關(guān)基因縱

2、向表達(dá)的影響模式，本研究以吉富品系尼羅羅非魚( O r e o c h r o m i sn i l o t i c u s ，G I F Ts t r a i n ) 為研究對(duì)象，通過(guò)B o x ．B e h n k e n 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，利用R T - P C R 技術(shù)檢測(cè)不同誘導(dǎo)環(huán)境下羅非魚性別分化期S o x 9 a 、A R a 和G A T A 4 基因的縱向表達(dá)水平，并運(yùn)用響應(yīng)曲面法( R e s p o n s es u r

3、 f a c em e t h o d o l o g y 。R S M ) 分析這些性別相關(guān)基因的縱向表達(dá)模式，旨在為羅非魚性別分化機(jī)制的進(jìn)一步研究提供參考。具體研究如下：( 一) 溫度及M T 聯(lián)合誘導(dǎo)下S o x 9 a 基因表達(dá)的縱向變化S o x 9 是雄性性別決定主效基因S r y 的直接下游靶基因，S o x 9 a 己被證明在魚類睪丸形成和發(fā)育中起重要作用。結(jié)果顯示：溫度的一次效應(yīng)和二次效應(yīng)對(duì)吉富魚性腺組織中S o x

4、9 a 表達(dá)有極顯著影響( P0 ．0 5 ) ，但二次效應(yīng)極顯著( p誘導(dǎo)持續(xù)時(shí)間> 1 7 n ．甲基睪丸酮。經(jīng)響應(yīng)曲面分析，隨著溫度逐漸升高，S o x 9 a 表達(dá)先出現(xiàn)輕微下調(diào)，之后呈上調(diào)趨勢(shì)；隨著誘導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)，S o x 9 a 基因表達(dá)呈先上升后下降的拋物線型。實(shí)驗(yàn)建立的性腺S o x 9 a 表達(dá)回歸模型的決定系數(shù)R 2 和校正決定系數(shù)A a j ．R 2 分別為0 ．9 7 7 8 、0 ．9 4 9 3 ，表

5、明構(gòu)建的模型擬合恰當(dāng)，可以為溫度、1 7 a 一甲基睪丸酮誘導(dǎo)下吉富魚性別分化期S o x 9 a 基因表達(dá)的縱向變化提供參考依據(jù)。( 二) 溫度及M T 聯(lián)合誘導(dǎo)下A R a 基因表達(dá)的縱向變化雄激素的生理作用主要是通過(guò)雄激素受體( a n d r o g e nr e c e p t o r , A R ) 介導(dǎo)的。結(jié)果表明：溫度、1 7 a 一甲基睪丸酮和誘導(dǎo)持續(xù)時(shí)間三因子的一次效應(yīng)和二次效應(yīng)對(duì)A R a 基因表達(dá)都有極顯著( P