食堿戈登氏菌YC-RL2對鄰苯二甲酸二(2-乙基己)酯的生物降解研究.pdf

1、菌株YC-RL2是一株從石油污染土壤中分離的細菌，可以利用環(huán)境激素鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）為唯一碳源生長。通過16S r RNA基因分析和Biolog測試，確定YC-RL2為一株登氏菌。它降解過程的最優(yōu)條件為30 ℃和pH=8。YC-RL2具有優(yōu)越的耐鹽性，在添加有DEHP的微量元素培養(yǎng)基中可以耐受0~5％的NaCl，但是隨著鹽濃度的增加DEHP的降解率逐漸下降。該菌株在較寬的pH范圍內(nèi)均表現(xiàn)出良好降解能力（6.0~1

2、1.0）。同時，YC-RL2能夠耐受高濃度的DEHP（100~800mg/L），且降解率均在94%以上。使用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS)的方法檢測DEHP的代謝中間產(chǎn)物，對降解途徑進行了初步的推測。菌株YC-RL2通過鄰苯二甲酸單（2-乙基己基）酯（MEHP），將DEHP被轉(zhuǎn)化為鄰苯二甲酸（PA），PA進一步脫羧生成苯甲酸（BA），BA則通過苯甲酸代謝途徑被菌株所利用。通過對已有報道的鄰苯二甲酸酯降解酶基因設(shè)計引物，從菌株YC

3、-RL2中克隆獲得了一個編碼水解MEHP為PA的酶基因，并對該基因進行了克隆、表達及功能驗證。進一步研究發(fā)現(xiàn)，該酶能催化多種單烷基鄰苯二甲酸酯轉(zhuǎn)化為PA。為了研究YC-RL2在修復(fù)污染場地方面的應(yīng)用潛力，通過模擬原位土壤修復(fù)實驗研究，發(fā)現(xiàn)添加菌株YC-RL2至滅菌土壤DEHP的降解率76%，而在非滅菌土壤中只有44%的降解率。本研究獲得了一株耐鹽菌可降解多種鄰苯二甲酸酯的戈登氏細菌YC-RL2，對菌株的降解特性、降解機理及其在鄰苯二甲酸