丙戊茶堿對切口痛大鼠鎮(zhèn)痛機(jī)制與MKP-1-p-p38關(guān)系的研究.pdf

1、本文從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分 計算Ro318220對絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1的IC50值
　　目的：計算鞘內(nèi)注射Ro318220對大鼠脊髓MKP-1表達(dá)的IC50值。
　　方法：采用健康、雄性、SD大鼠30只，體重250-280g、月齡1.5-2.0，按隨機(jī)數(shù)字表法分為5組（n=6）：Naive組（Ⅰ組）、Ro31822010ug/20ul組（Ⅱ組）、Ro31822020ug/20ul組（Ⅲ組）、Ro3

2、1822040ug/20ul組（Ⅳ組）、Ro31822080ug/20ul組（Ⅴ組）。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組分別鞘內(nèi)注射Ro31822010、20、40、80ug/20ul，Ⅰ組不做處理。鞘內(nèi)注射24h后各組大鼠用Western blot法檢測脊髓MKP-1的表達(dá)量，用SPSS軟件計算Ro318220抑制大鼠脊髓MKP-1表達(dá)的IC50值。
　　結(jié)果：Ro318220抑制大鼠脊髓MKP-1表達(dá)的IC50值為33ug。
　　結(jié)論：R

3、o318220能有效抑制大鼠脊髓MKP-1的表達(dá)，其IC50值為33ug。
　　第二部分 丙戊茶堿對切口痛大鼠鎮(zhèn)痛機(jī)制與MKP-1/p-p38關(guān)系的研究
　　目的：評價鞘內(nèi)注射丙戊茶堿對切口痛模型大鼠鎮(zhèn)痛效果及此效果與MKP-1/p-p38的關(guān)系。
　　方法：采用SPF級健康、雄性、SD大鼠90只，體重250-300g、月齡1.5-2.0，按隨機(jī)數(shù)字表法分6組：空白組（Naive組，n=6）、生理鹽水組（NS組，n=6

4、）、二甲基亞砜組（DMSO組，n=6）、切口痛組（IP組，n=30）、丙戊茶堿組（PPF組，n=36）、抑制劑組（Ro組，n=6）。IP、PPF、Ro組制備大鼠急性切口痛模型，NS組鞘內(nèi)注射10ul NS，DMSO組鞘內(nèi)注射10ul10％DMSO，PPF組術(shù)后30min鞘內(nèi)注射PPF10ug/10ul，Ro組術(shù)前鞘內(nèi)注射Ro31822040ug/20ul，術(shù)后30min鞘內(nèi)注射PPF10ug/10ul。Naive,NS,DMSO,Ro組

5、于術(shù)前和術(shù)后1d測機(jī)械縮足反應(yīng)閾值（MWT），IP組和PPF組于術(shù)前和術(shù)后2h、5h、1d、2d、3d測MWT。PPF組大鼠術(shù)后72h待行為學(xué)測試完畢用免疫熒光雙標(biāo)法檢測脊髓MKP-1表達(dá)位置，剩余大鼠待行為學(xué)檢測完畢用Western blot法檢測脊髓MKP-1/p-p38表達(dá)量。
　　結(jié)果：與Naive組比較，NS組和DMSO組MWT、MKP-1和p-p38表達(dá)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；與術(shù)前比較，IP組術(shù)后2h、5

6、h、1d、2d、3d大鼠MWT均降低（P<0.05）；與術(shù)前比較，IP組術(shù)后5h、1d、2d、3d大鼠脊髓MKP-1表達(dá)均下降（P<0.05），p-p38表達(dá)均增多（P<0.05）；與IP組比較，PPF組給藥后2h、5h、1d、2d、3d大鼠MWT均升高（P<0.05）；與IP組比較，PPF組給藥后5h、1d、2d、3d大鼠脊髓MKP-1表達(dá)均升高（P<0.05），p-p38表達(dá)均下降（P<0.05）；與PPF組比較，Ro組鞘內(nèi)預(yù)先注射