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文檔簡介
1、花色苷(Anthocyanins)是一類水溶性類黃酮組群,廣泛存在于水果和蔬菜中,具有抗氧化、抗動脈粥樣硬化、抗炎等多種生理功能。研究采用熒光光譜法、紫外-可見吸收光譜法、圓二色譜法及分子對接等技術(shù)手段,對矢車菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)與牛血清蛋白(BSA)、血紅蛋白(Hb)以及肌紅蛋白(Mb)之間的相互作用進行了探究,并計算了C3G與蛋白質(zhì)結(jié)合后的游離濃度,為研究花色苷在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運、分布、貯存和發(fā)揮生理功效提供了理論依據(jù)。在此研
2、究基礎(chǔ)上,利用Langendorff離體心臟灌流技術(shù),進一步研究了C3G對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷(MIRI)的保護作用,揭示了C3G對大鼠心臟MIRI的保護機制可能與自噬有關(guān),為花色苷功能食品、藥品的開發(fā)提供理論參考。
研究內(nèi)容主要分為以下兩個部分:
1.第一部分運用熒光光譜、紫外-可見吸收光譜、圓二色譜以及分子對接等多種方法研究了在體外模擬生理條件下C3G與三種蛋白質(zhì)(BSA、Hb和Mb)之間的相互作用。熒光光
3、譜以及時間分辨熒光試驗結(jié)果表明,C3G與三種蛋白質(zhì)相互作用的猝滅機制均為靜態(tài)猝滅;根據(jù)結(jié)合常數(shù)Ka值的大小可判斷與C3G結(jié)合能力排序是:BSA>Mb>Hb;三種蛋白質(zhì)與C3G的熱力學參數(shù)及分子對接試驗表明C3G與BSA、Hb和Mb之間的作用力類型主要為氫鍵與范德華力;C3G與BSA、Hb和Mb的結(jié)合距離分別為2.52 nm、2.53 nm和2.62nm。同步熒光光譜、三維熒光光譜和圓二色譜的研究結(jié)果均表明,C3G與三種蛋白質(zhì)之間發(fā)生了相
4、互作用,并且使蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化;在加入C3G后,BSA的α-螺旋含量降低了,而Hb和Mb的α-螺旋含量相比之前有所增加。經(jīng)過計算,與BSA和Hb相互作用后的游離C3G的濃度分別為:fu>92%和fu>93%。
2.第二部分采用Langendorff離體心臟灌流技術(shù)研究了C3G對大鼠心臟缺血再灌注的保護作用。心率監(jiān)測結(jié)果顯示,對大鼠離體心臟進行C3G前處理,能明顯改善大鼠心肌功能。理化指標的檢測結(jié)果表明,C3G的加入可
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