葛根渣異黃酮酶法提取的應(yīng)用基礎(chǔ)研究.pdf

1、本文將酶處理與直接醇提工藝相結(jié)合，并利用大孔樹(shù)脂對(duì)獲得的異黃酮進(jìn)行了純化，取得如下研究成果： 在醇提之前采用纖維素酶和木聚糖酶對(duì)葛根渣進(jìn)行預(yù)處理，并對(duì)預(yù)處理?xiàng)l件進(jìn)行了優(yōu)化。直接醇提法總異黃酮得率為0.84％。用10FPIU(以每g葛根渣計(jì)，下同)的纖維素酶處理12h后，總異黃酮得率可以增至1.14％；300IU的木聚糖酶處理6h，總異黃酮得率可以增至1.28％。纖維素酶和木聚糖酶之間存在著協(xié)同作用：當(dāng)木聚糖酶用量為300IU時(shí)，

2、添加少量的纖維素酶協(xié)同處理6h可進(jìn)一步提高總異黃酮得率，而纖維素酶添加量為7.5FPIU時(shí)，總異黃酮得率可達(dá)1.38％。采用黑曲霉菌株A.nigerZU-01，以葛根渣為主要原料進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，利用微生物產(chǎn)生的酶系破壞細(xì)胞壁的纖維結(jié)構(gòu)，促進(jìn)異黃酮的溶出。優(yōu)化后的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中葛根渣和麩皮組成比例為7：3，含水率70％。在30℃下發(fā)酵120h，總異黃酮提取得率為1.53％。HPLC圖譜顯示：固態(tài)發(fā)酵后大豆苷元的含量下降，而糖苷型異黃酮的含

3、量明顯增加，其中葛根素含量比直接醇提法提高了70％。在同樣的培養(yǎng)基條件下，選取另一種黑曲霉菌株A.nigerZU-02對(duì)葛根渣在30℃進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，144h后，總異黃酮得率達(dá)到1.47％。HPLC圖譜顯示：該菌株固態(tài)發(fā)酵后，除葛根素含量有所下降之外，大豆苷、大豆苷元、染料木苷和染料木素含量均有不同程度的增加。 采用大孔樹(shù)脂吸附法對(duì)異黃酮進(jìn)行了精制。經(jīng)過(guò)靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)，從六種樹(shù)脂中篩選異黃酮回收率較高的HZ801樹(shù)脂，并對(duì)其進(jìn)行動(dòng)態(tài)