葛根異黃酮的提取、純化及水解工藝的研究.pdf

1、本試驗(yàn)以野葛為原料，探索了野葛中異黃酮的提取、純化及水解工藝，從而為葛根異黃酮的利用和生產(chǎn)提供參考。分別采用亞臨界水法和超聲輔助提取法這兩種方法提取葛根異黃酮，并對(duì)這兩種提取方法進(jìn)行了比較。接下來(lái)運(yùn)用超濾技術(shù)對(duì)葛根總異黃酮粗提物進(jìn)行初步純化。然后分別采用鹽酸和“Amano”β-葡萄糖苷酶水解超濾純化后的葛根總異黃酮產(chǎn)品，使其水解為葛根素和黃豆苷元。最后用高速逆流色譜對(duì)異黃酮水解產(chǎn)物進(jìn)行純化，得到了高純度的葛根素和黃豆苷元。
　　

2、 采用亞臨界水法提取葛根中的總異黃酮，通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)確定其最優(yōu)工藝為提取時(shí)間為30 min、提取溫度為130℃、壓力為0.9 MPa、液料比為25 mL/g，在此條件下葛根總異黃酮得率為7.85％。
　　 采用超聲輔助提取法提取葛根中的總異黃酮，通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)確定其最優(yōu)工藝為提取時(shí)間為45min、提取溫度為50℃、乙醇濃度為70%、超聲功率為400W、液料比為30 mL/g，在此條件下葛根總異黃酮的得率為6.76%。

3、
　　 對(duì)亞臨界水法和超聲輔助提取法進(jìn)行比較，結(jié)果表明：亞臨界水法提取葛根異黃酮較超聲輔助提取法更省時(shí)、更高效、更環(huán)保。
　　 采用超濾技術(shù)對(duì)葛根總異黃酮粗提物進(jìn)行初步純化，確定了純化條件為：選擇截留分子量為5000的聚醚砜膜，超濾壓力選擇68kPa，超濾溫度為40℃。在此條件下，總固形物截留率為80.6%，葛根總異黃酮固態(tài)產(chǎn)品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)由超濾前的24.9%提高到36.2%。
　　 采用鹽酸水解經(jīng)超濾純化的葛根異

4、黃酮產(chǎn)品，通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)確定其最優(yōu)水解工藝。結(jié)果表明：水解葛根素糖苷的最佳工藝為水解時(shí)間為7h、鹽酸濃度為4mol/L、水解溫度為70℃，在此條件下葛根素水解得率為92.8%；水解黃豆苷的最佳工藝為水解時(shí)間為7h、鹽酸濃度為4mol/L、水解溫度為50℃，在此條件下黃豆苷元的水解得率為95.1%。
　　 采用“Amano”β-葡萄糖苷酶水解經(jīng)超濾純化的葛根異黃酮產(chǎn)品，通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)確定其最優(yōu)水解工藝。結(jié)果表明：水解葛

5、根素糖苷的最佳工藝為水解時(shí)間為120min、酶液濃度為40 mg/L、水解溫度為45℃、體系pH為4.5，在此條件下葛根素水解得率為93.9%；水解黃豆苷的最佳工藝為水解時(shí)間為120min、酶液濃度為40 mg/L、體系pH為4.5、水解溫度為50℃，在此條件下黃豆苷元的水解得率為96.2%。
　　 對(duì)兩種水解方法進(jìn)行比較，結(jié)果表明：采用“Amano”β-葡萄糖苷酶水解葛根異黃酮較酸法水解，反應(yīng)條件更溫和、反應(yīng)時(shí)間更短、異黃酮苷