中藥白芷對酪氨酸酶活性功效關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、白芷為傘形科植物白芷Angelica dahurica( Fisch.ex Hoffm.) Benth. et Hook.f.或杭白芷A.dahurica( Fisch.ex Hoffm.) Benth.et Hook.f.var.Formvsana( Boiss) Shan et Yuan的干燥根，主要含香豆素類及揮發(fā)油類成分。白芷的不同提取部位，對黑色素合成的限速酶酪氨酸酶有抑制或激活作用，臨床上可分別用于美白和治療白癜風(fēng)。本論文采

2、用譜效關(guān)系、成分敲出、血清藥理學(xué)的物質(zhì)基礎(chǔ)研究方法，對白芷中酪氨酸酶活性功效關(guān)聯(lián)成分進(jìn)行探索，篩選出對酪氨酸酶有激活或抑制作用的化合物。本論文包括以下內(nèi)容：
　　第一章、中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究綜述
　　中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究是中藥現(xiàn)代化進(jìn)程的重要環(huán)節(jié)之一。隨著現(xiàn)代醫(yī)藥科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的研究方法從傳統(tǒng)的借鑒天然藥物化學(xué)的化學(xué)分離、活性導(dǎo)向分離，向越來越貼近中藥成分復(fù)雜、協(xié)同藥效特點的方向發(fā)展，計算機、化學(xué)、生物學(xué)、中醫(yī)學(xué)等多學(xué)

3、科、多技術(shù)、多方式的交叉融匯，中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的研究層層深入。本章就中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究的思路和方法進(jìn)行歸納總結(jié)，以期能為中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究提供借鑒。
　　第二章、基于譜效關(guān)系的白芷酪氨酸酶活性成分研究
　　運用HPLC法測定不同加熱條件處理的白芷藥材水提液的特征圖譜，并通過體外酪氨酸酶活性測定法分別測定上述各白芷水提液對酪氨酸酶活性的影響，運用偏最小二乘法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，研究白芷量化特征圖譜色譜峰和酪氨酸酶活性的相關(guān)性，篩選出S

4、6、S14、S18、S21、S35、S36、S37、S40、S41峰與白芷水提液酪氨酸酶抑制活性呈正相關(guān)且相關(guān)系數(shù)較大；S8、S9、S11、S12、S22、S30峰與白芷水提液酪氨酸酶抑制活性呈負(fù)相關(guān)，且相關(guān)系數(shù)的絕對值較大。
　　第三章、基于成分敲出的白芷酪氨酸酶活性成分研究
　　通過HPLC法進(jìn)行成分敲出試驗，制備得到敲出化合物及其陰性樣品，與原提取液同時進(jìn)行體外酪氨酸酶活性測定，確定白芷酪氨酸酶活性相關(guān)成分及該成分與其

5、他成分的相互作用。
　　共制備21個敲出化合物，高分辨質(zhì)譜結(jié)果表明S24的敲出成分為水合氧化前胡素，S25的敲出成分為白當(dāng)歸素，S30的敲出成分為佛手柑內(nèi)酯，S40的敲出成分為歐前胡素，S41的敲出成分為蛇床夫內(nèi)酯，S42的敲出成分為異歐前胡素。當(dāng)各樣品的濃度為相當(dāng)于原藥材1g·mL-1時，S4、S6、S7、S23、S24、S28、S34-35、S37、S40、S41、S42的目標(biāo)成分均對酪氨酸酶有抑制作用，其中S4、S7、S24

6、的目標(biāo)成分對酪氨酸酶的抑制作用較強；S8、S12、S19、S21、S25、S30、S31-32、S33、S38、S39的目標(biāo)成分均對酪氨酸酶有激活作用，其中S12、S38的目標(biāo)成分均對酪氨酸酶的激活作用較強。
　　S4、S7、S23、S24、S34-35、S37、S40、S42、S8、S12、S31-32、S33、S38、S25的目標(biāo)成分與陰性樣品之間存在拮抗作用；S6、S28、S19、S21、S30、S39、S41的目標(biāo)成分與陰

7、性樣品之間存在協(xié)同作用。當(dāng)樣品濃度為相當(dāng)于原藥材1g·mL-1時，S6、S41的目標(biāo)成分對酪氨酸酶的活性結(jié)果與“譜效關(guān)系”分析結(jié)果一致。
　　第四章、基于血清藥理學(xué)的白芷對大鼠血清酪氨酸酶含量影響的研究
　　通過血清藥理學(xué)方法考察不同加熱條件處理的白芷水提液對大鼠酪氨酸酶含量的影響。制備白芷水提液，大鼠灌胃給藥1.05g·kg-1，1次·d-1，共7d。末次給藥1h后腹主動脈取血，室溫下靜置2-3h，3000rpm離心20m