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文檔簡(jiǎn)介
1、白芷為傘形科植物白芷Angelica dahurica( Fisch.ex Hoffm.) Benth. et Hook.f.或杭白芷A.dahurica( Fisch.ex Hoffm.) Benth.et Hook.f.var.Formvsana( Boiss) Shan et Yuan的干燥根,主要含香豆素類及揮發(fā)油類成分。白芷的不同提取部位,對(duì)黑色素合成的限速酶酪氨酸酶有抑制或激活作用,臨床上可分別用于美白和治療白癜風(fēng)。本論文采
2、用譜效關(guān)系、成分敲出、血清藥理學(xué)的物質(zhì)基礎(chǔ)研究方法,對(duì)白芷中酪氨酸酶活性功效關(guān)聯(lián)成分進(jìn)行探索,篩選出對(duì)酪氨酸酶有激活或抑制作用的化合物。本論文包括以下內(nèi)容:
第一章、中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究綜述
中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究是中藥現(xiàn)代化進(jìn)程的重要環(huán)節(jié)之一。隨著現(xiàn)代醫(yī)藥科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的研究方法從傳統(tǒng)的借鑒天然藥物化學(xué)的化學(xué)分離、活性導(dǎo)向分離,向越來(lái)越貼近中藥成分復(fù)雜、協(xié)同藥效特點(diǎn)的方向發(fā)展,計(jì)算機(jī)、化學(xué)、生物學(xué)、中醫(yī)學(xué)等多學(xué)
3、科、多技術(shù)、多方式的交叉融匯,中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的研究層層深入。本章就中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究的思路和方法進(jìn)行歸納總結(jié),以期能為中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究提供借鑒。
第二章、基于譜效關(guān)系的白芷酪氨酸酶活性成分研究
運(yùn)用HPLC法測(cè)定不同加熱條件處理的白芷藥材水提液的特征圖譜,并通過(guò)體外酪氨酸酶活性測(cè)定法分別測(cè)定上述各白芷水提液對(duì)酪氨酸酶活性的影響,運(yùn)用偏最小二乘法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,研究白芷量化特征圖譜色譜峰和酪氨酸酶活性的相關(guān)性,篩選出S
4、6、S14、S18、S21、S35、S36、S37、S40、S41峰與白芷水提液酪氨酸酶抑制活性呈正相關(guān)且相關(guān)系數(shù)較大;S8、S9、S11、S12、S22、S30峰與白芷水提液酪氨酸酶抑制活性呈負(fù)相關(guān),且相關(guān)系數(shù)的絕對(duì)值較大。
第三章、基于成分敲出的白芷酪氨酸酶活性成分研究
通過(guò)HPLC法進(jìn)行成分敲出試驗(yàn),制備得到敲出化合物及其陰性樣品,與原提取液同時(shí)進(jìn)行體外酪氨酸酶活性測(cè)定,確定白芷酪氨酸酶活性相關(guān)成分及該成分與其
5、他成分的相互作用。
共制備21個(gè)敲出化合物,高分辨質(zhì)譜結(jié)果表明S24的敲出成分為水合氧化前胡素,S25的敲出成分為白當(dāng)歸素,S30的敲出成分為佛手柑內(nèi)酯,S40的敲出成分為歐前胡素,S41的敲出成分為蛇床夫內(nèi)酯,S42的敲出成分為異歐前胡素。當(dāng)各樣品的濃度為相當(dāng)于原藥材1g·mL-1時(shí),S4、S6、S7、S23、S24、S28、S34-35、S37、S40、S41、S42的目標(biāo)成分均對(duì)酪氨酸酶有抑制作用,其中S4、S7、S24
6、的目標(biāo)成分對(duì)酪氨酸酶的抑制作用較強(qiáng);S8、S12、S19、S21、S25、S30、S31-32、S33、S38、S39的目標(biāo)成分均對(duì)酪氨酸酶有激活作用,其中S12、S38的目標(biāo)成分均對(duì)酪氨酸酶的激活作用較強(qiáng)。
S4、S7、S23、S24、S34-35、S37、S40、S42、S8、S12、S31-32、S33、S38、S25的目標(biāo)成分與陰性樣品之間存在拮抗作用;S6、S28、S19、S21、S30、S39、S41的目標(biāo)成分與陰
7、性樣品之間存在協(xié)同作用。當(dāng)樣品濃度為相當(dāng)于原藥材1g·mL-1時(shí),S6、S41的目標(biāo)成分對(duì)酪氨酸酶的活性結(jié)果與“譜效關(guān)系”分析結(jié)果一致。
第四章、基于血清藥理學(xué)的白芷對(duì)大鼠血清酪氨酸酶含量影響的研究
通過(guò)血清藥理學(xué)方法考察不同加熱條件處理的白芷水提液對(duì)大鼠酪氨酸酶含量的影響。制備白芷水提液,大鼠灌胃給藥1.05g·kg-1,1次·d-1,共7d。末次給藥1h后腹主動(dòng)脈取血,室溫下靜置2-3h,3000rpm離心20m
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