抗疏健骨方提取工藝及制劑前評價研究.pdf

1、目的:通過對抗疏健骨方中各藥味的提取工藝進行研究，確定最佳工藝條件，并對其主要指標成分的理化性質及體內(nèi)外腸吸收情況進行考察，為抗疏健骨方的劑型選擇奠定基礎。
　　方法:1、根據(jù)《中國藥典》2010年版（一部）各飲片項下的有關規(guī)定，對抗疏健骨方中各藥味進行鑒別、檢查及含量測定;2、以β-蛻皮甾酮含量及浸膏得率為評價指標，通過單因素設計試驗及L9(34)正交設計試驗篩選抗疏健骨方最佳水提取工藝;在單因素試驗的基礎上，采用星點設計-效應

2、面法優(yōu)化醇提取工藝條件:以乙醇濃度、溶劑用量、提取時間為自變量，以淫羊藿苷、總黃酮含量及浸膏得率的加和為因變量，對自變量各水平進行多元線性回歸及二項式擬合，用效應面法優(yōu)選最佳工藝條件，并進行預測分析;以β-蛻皮甾酮、淫羊藿苷、丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量轉移率為工藝評價指標，采用高效液相色譜法對常壓干燥和減壓干燥工藝條件進行篩選和比較。3、采用高效液相色譜法對抗疏健骨方主要指標成分的表觀溶解度、油水分配系數(shù)進行研究。4、建立大鼠離體外翻腸囊

3、模型和大鼠在體腸灌流模型，通過離體法和在體法相結合，研究抗疏健骨方主要指標成分的腸吸收特性。
　　結果:1、實驗所用各飲片均符合《中國藥典》2010年版（一部）各項下的質量要求;2、影響水提取工藝各因素的作用主次為:C提取次數(shù)＞B提取時間＞A溶劑用量，最佳提取工藝條件是A2B2C3D1:用10倍量水，提取3次，每次90min;醇提取工藝最佳條件為:8倍量70％乙醇（首劑量10倍），回流提取3次，每次120min;通過比較減壓干燥樣

4、品中的β-蛻皮甾酮、淫羊藿苷、丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量轉移率均明顯高于常壓干燥，且損失少、含量穩(wěn)定，轉移率分別為80.5％、77.7％、74.09％和76.36％。3、37℃下淫羊藿苷在水中24h的平衡溶解度為83.25mg/L，表觀油水分配系數(shù)為2.32(logPapp=0.36);37℃下β-蛻皮甾酮在水中24h的平衡溶解度為16.87mg/L，表觀油水分配系數(shù)為0.37(logPapp=-0.41);37℃下丹酚酸B在水中24h的

5、平衡溶解度為3035.18mg/L，表觀油水分配系數(shù)為0.038(logPapp=-1.410)。4、在離體腸吸收試驗中淫羊藿苷的吸收率最高，丹酚酸B的吸收率最差，在十二指腸段和空腸段對淫羊藿苷、β-蛻皮甾酮和丹酚酸B的吸收均高于回腸段;在體腸吸收實驗顯示:淫羊藿苷以空腸部位的吸收最高，且與回腸的Ka和P(o)ff有顯著性差異（P＜0.05），十二指腸次之，回腸部位吸收最慢。對β-蛻皮甾酮而言，吸收同樣以空腸段最高，但各腸段間(P＞0.

6、05)均無顯著性差異。丹酚酸B的吸收以十二指腸段最高，空腸次之，回腸吸收較差，各腸段間（P＞0.05)均無顯著性差異。因此初步判斷十二指腸與空腸是抗疏健骨方中淫羊藿苷、β-蛻皮甾酮和丹酚酸B的主要吸收部位，三種成分間以淫羊藿苷吸收最好，丹酚酸B吸收最差。
　　結論:抗疏健骨方分別采用水提?。ò仔g、牛膝）、70％乙醇提?。ㄒ蜣?、杜仲）、丹參單獨乙醇回流-水提取的方案提取主要的有效部位，驗證試驗結果表明該法合理可行，為抗疏健骨方的提