湖北海棠提取物制劑前評(píng)價(jià)研究.pdf

1、目的:以根皮苷為指標(biāo)成分，考察湖北海棠提取物的平衡溶解度、油水分配系數(shù)、穩(wěn)定性、吸濕性、溶血性、腸吸收特性、藥代動(dòng)力學(xué)以及組織分布特征，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用湖北海棠奠定基礎(chǔ)。
　　方法:
　　(1)采用高效液相色譜法測(cè)定湖北海棠提取物在水和有機(jī)相中的平衡溶解度，采用搖瓶法測(cè)定湖北海棠提取物在正辛醇-水/緩沖鹽溶液中的表觀油水分配系數(shù)。(2)采用過(guò)飽和溶液法，考察湖北海棠提取物的吸濕率；通過(guò)體外試管法以及改進(jìn)的體外溶血性試驗(yàn)法考察

2、湖北海棠提取物的溶血作用。(3)采用高效液相法測(cè)得在高溫、高濕、強(qiáng)光、不同pH條件、金屬離子影響下，根皮苷的含量變化，考察湖北海棠提取物在不同條件下的穩(wěn)定性情況。(4)采用離體、在體腸吸收實(shí)驗(yàn)考察湖北海棠提取物在大鼠腸道的吸收特征；(5)正常大鼠按灌胃給予根皮苷42.50 mg·kg-1，靜脈注射5 mg·kg-1于不同時(shí)間點(diǎn)收集血液，HPLC-MS/MS法測(cè)定血漿中根皮苷濃度。(6)正常大鼠按靜脈注射5.0 mg·kg-1、灌胃42.

3、50 mg·kg-1給予藥液后10、20、45、60 min取心、肝、脾、肺、腎、腦組織，各組織勻漿后，HPLC-MS/MS法測(cè)定勻漿液中根皮苷濃度。
　　結(jié)果:(1)25℃下湖北海棠提取物在水中的平衡溶解度為2.95 mg·mL-1，表觀油水分配系數(shù)為1.72( LogP=0.74)；常用有機(jī)溶劑甲醇和乙醇對(duì)湖北海棠提取物溶解性較好，分別為8.76 mg·mL-1和4.72 mg·mL-1。(2)湖北海棠提取物吸濕特性曲線對(duì)三項(xiàng)

4、式方程模型有較好的適應(yīng)性，其臨界相對(duì)濕度約為65％。pH值、溫度、金屬離子、氧化劑、還原劑等對(duì)根皮苷和湖北海棠提取物總黃酮的穩(wěn)定性均有不同程度的影響，其中堿性、AL3+、Fe3+、H2O2、亞硫酸鹽等對(duì)根皮苷和湖北海棠提取物總黃酮的穩(wěn)定性有影響。湖北海棠提取物總黃酮的溶血濃度為0.28 mg·mL-1，且隨著總黃酮濃度的增加溶血率也在增加，直至接近100%。肉眼觀察法和分光光度法結(jié)果一致。(3)離體腸吸收表明，不同腸段對(duì)湖北海棠提取物中

5、根皮苷的吸收具有顯著性差異P<0.05，不同腸段對(duì)湖北海棠提取物中根皮苷具有不同的吸收。湖北海棠提取物在空腸腸段的吸收性最好。在體腸吸收研究表明同一質(zhì)量濃度下湖北海棠提取物中根皮苷在各腸段的吸收不同，各腸段的表觀吸收系數(shù)Papp大小依次為：空腸>十二指腸>結(jié)腸>回腸。湖北海棠提取物在空腸腸段吸收最好；不同質(zhì)量濃度下湖北海棠提取物中根皮苷在空腸段的吸收均具有顯著性差異(P<0.01)。在加入P-gp前后湖北海棠提取物中根皮苷的Papp差異

6、具有顯著性差異(P<0.01)，提示根皮苷可能是P-gp的底物。(4)本實(shí)驗(yàn)研究表明，大鼠口服根皮苷后吸收快，5 min即可檢測(cè)到原藥，在45 min之前達(dá)到最大血藥濃度，AUC以及Cmax分別為445.17±51.73μg·L-1·h-1、352.33±23.64μg·L-1，t1/2為1.38±0.26 h，說(shuō)明口服吸收迅速；大鼠靜脈注射根皮苷后，5 min亦可以檢測(cè)到原藥， AUC以為457.296±55.72μg·L-1·h-1

7、，t1/2為2.502±0.67 h說(shuō)明根皮苷在體內(nèi)代謝緩慢。(5)組織分布實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示10、20、45、60 min各組織中均能測(cè)到根皮苷，灌胃組45 min時(shí)達(dá)到分布峰值，靜脈注射組一直呈現(xiàn)根皮苷含量衰減的狀態(tài)。肝腎中的含量在每個(gè)時(shí)段都最高。
　　結(jié)論:以湖北海棠提取物根皮苷為主要指標(biāo)對(duì)其進(jìn)行研究分析，發(fā)現(xiàn)湖北海棠提取物具有較為穩(wěn)定的理化性質(zhì)，在腸道內(nèi)易被吸收，組織分布迅速，藥代動(dòng)力學(xué)特征明顯，具有新藥開(kāi)發(fā)的潛質(zhì)。本文為湖北海