苯丙氨酸衍生物的手性拆分.pdf

1、手性高效液相色譜法是目前手性化合物拆分最有效的方法之一，利用手性固定相和手性流動(dòng)相法對(duì)化合物對(duì)映體的控制是手性液相色譜研究的兩大方向。本論文主要用配基交換型流動(dòng)相法、冠醚手性固定相法和多糖類手性固定相法對(duì)苯丙氨酸衍生物對(duì)映體進(jìn)行分離研究。主要包括以下內(nèi)容:
　　一、以配基交換型手性流動(dòng)相法，對(duì)苯環(huán)取代的6種苯丙氨酸衍生物進(jìn)行手性拆分。
　　在Ultimate XB-C18柱上，以甲醇與水中添加銅鹽與配體氨基酸水溶液為流動(dòng)相，

2、對(duì)6種苯環(huán)取代的苯丙氨酸對(duì)映體進(jìn)行手性拆分，結(jié)果顯示6種苯丙氨酸衍生物對(duì)映體都得到了很好地分離。通過(guò)對(duì)銅鹽種類和濃度，配體種類，銅鹽與配體氨基酸的比例，甲醇含量，流動(dòng)相pH，流速，柱溫等因素對(duì)分離影響的考察，得出:多巴、3，5-二碘-酪氨酸、苯丙氨酸及4-F-苯丙氨酸適合在以N，N-二甲基-L-苯丙氨酸為配體的流動(dòng)相中進(jìn)行拆分，而4-Cl和4-CF3-苯丙氨酸適合在以脯氨酸為配體的流動(dòng)相中進(jìn)行拆分。流動(dòng)相中銅鹽和配體氨基酸的配比會(huì)影響絡(luò)

3、合平衡，當(dāng)CuSO4∶N，N-二甲基-L-苯丙氨酸為1∶3.5，CuSO4∶L-脯氨酸為1∶4.0時(shí)，流動(dòng)相中銅鹽和手性氨基酸配體形成較高濃度的二元絡(luò)合物，容易提供較多的作用位點(diǎn)，與被拆分的手性苯丙氨酸衍生物形成三元配合物。流動(dòng)相的pH宜控制在3.5～3.8之間，當(dāng)流動(dòng)相中的pH小于3.5時(shí)，絡(luò)合物容易解離，二元絡(luò)合物穩(wěn)定性降低，pH大于3.8，色譜峰拖尾嚴(yán)重，銅鹽易形成氫氧化物，配位功能消失。熱力學(xué)研究表明，六種對(duì)映體在固定相上的拆分

4、均為焓控過(guò)程，降低柱溫有利于對(duì)映體分離。對(duì)3，5-二碘-酪氨酸色譜拆分方法進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果表明，對(duì)映體分離度，方法線性、靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度、耐用性、穩(wěn)定性等的測(cè)試結(jié)果均符合方法驗(yàn)證的要求，適于L-3，5-二碘-酪氨酸中D-3，5-二碘-酪氨酸的定量控制。
　　二、以冠醚手性固定相法，對(duì)苯環(huán)取代的6種苯丙氨酸衍生物進(jìn)行手性拆分。
　　在Crown pak CR(+)柱上，HClO4的酸性條件下，對(duì)6種苯環(huán)取代的苯丙氨酸對(duì)映體

5、進(jìn)行手性拆分，6種對(duì)映體都達(dá)到了很好地分離。通過(guò)考察流動(dòng)相pH，甲醇含量，柱溫，流速等影響因素，得出:流動(dòng)相中甲醇含量增大，流動(dòng)相極性減弱，疏水性增強(qiáng)，R-NH3+進(jìn)入疏水性固定相的18-冠-6環(huán)空腔中，與氧原子的氫鍵作用增強(qiáng)，溶質(zhì)的保留增強(qiáng)。高氯酸溶液pH值增大，對(duì)映體中的伯胺基團(tuán)質(zhì)子化生成銨離R-NH3+的能力減弱，氫鍵作用減弱，保留減弱，分離度減小。六種對(duì)映體在冠醚固定相上的拆分均為焓控過(guò)程，降低柱溫，分離度增大，但保留時(shí)間也延長(zhǎng)

6、。3，5-二碘-酪氨酸的色譜方法驗(yàn)證結(jié)果顯示，該手性色譜方法的準(zhǔn)確度、精密度、耐用性、穩(wěn)定性等的測(cè)試結(jié)果均符合手性對(duì)映體控制的定量要求。
　　三、以多糖類手性固定相法，對(duì)氨基-羧基保護(hù)后的5種苯丙氨酸進(jìn)行手性拆分。
　　在Chiralpak AD-H柱上，研究了氨基或羧基被保護(hù)后的5種苯丙氨酸對(duì)映體的分離情況，結(jié)果表明這5種對(duì)映體在以下色譜條件下都獲得很好地分離:正己烷∶異丙醇∶三氟乙酸=90∶10∶0.2;柱溫:30℃;流