在大腸桿菌中利用苯丙氨酸生產(chǎn)L-酪氨酸及其衍生物的研究.pdf

1、L-酪氨酸是一種芳香族蛋白氨基酸，經(jīng)常被用來作為食品和動(dòng)物飼料的補(bǔ)充劑，以及各種藥學(xué)上或工業(yè)上（生物）合成前體的重要部分。為構(gòu)建高效率及高成本效益的L-酪氨酸生產(chǎn)菌株，目前已進(jìn)行了廣泛的代謝工程及基因工程改造研究。傳統(tǒng)的策略通常集中于消除內(nèi)在反饋抑制和調(diào)整莽草酸途徑中的碳通量。在本課題中，我們發(fā)現(xiàn)，四氫生物蝶呤(MH4)可以利用苯丙氨酸羥化酶(P4H)可以在大腸桿菌中繞過反饋抑制，連續(xù)利用自身代謝中的苯丙氨酸，并將其轉(zhuǎn)化成L-酪氨酸，從

2、而在培養(yǎng)中得到L-酪氨酸積累。具體研究?jī)?nèi)容包括:
　　1、在大腸桿菌野生型菌株中表達(dá)質(zhì)粒pZE-XcABM，得到L-酪氨酸產(chǎn)物，產(chǎn)量為262 mg·L-1，驗(yàn)證了研究策略的可行性。
　　2、構(gòu)建了質(zhì)粒pCS-AX及質(zhì)粒pCS-APTA-AX，并在之前構(gòu)建的菌株中表達(dá)，通過發(fā)酵條件的優(yōu)化，在原有基礎(chǔ)上，提高了L-酪氨酸產(chǎn)物產(chǎn)量，達(dá)到401 mg·L-1。
　　3、進(jìn)一步構(gòu)建了質(zhì)粒pSA-hpaBC，并在大腸桿菌基因工程菌