熒光酮類試劑-鉬（VI）光譜探針測(cè)定蛋白質(zhì)的研究.pdf

1、該文詳細(xì)介紹了蛋白質(zhì)定量分析的一些主要方法及其在生物化學(xué)、藥物、食品、臨床醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用概況,這些方法包括最早的濁度法、凱氏定氮法,和目前研究最多、應(yīng)用最廣、操作較為簡(jiǎn)便的分光光度法、熒光光度法,還有新進(jìn)展起來的共振瑞利散射法、高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳分析法.實(shí)驗(yàn)中選取以苯基熒光酮、水楊基熒光酮為母體、具有不同取代基的苯基熒光酮(PF)、鄰硝基苯基熒光酮(o-NPF)、間硝基苯基熒光酮(m-NPF)、鄰氯苯基熒光酮(o-CPF)、間氯

2、苯基熒光酮(m-CPF)、對(duì)氯苯基熒光酮(p-CPF)、2′、4′-二氯苯基熒光酮(2′、4′-DCPF)、二溴羥基苯基熒光酮(DBH-PF)、水楊基熒光酮(SAF)、5′-硝基水楊基熒光酮(5′-NSF)、3′、5′二溴水楊基熒光酮(3′、5′-DBSF)等十一種三羥基熒光酮類試劑.三羥基熒光酮類試劑-鉬(VI)配合物作為定量測(cè)定蛋白質(zhì)的光譜探針,用分光光度法系統(tǒng)地研究了其與蛋白質(zhì)分子的反應(yīng)條件,如酸度、介質(zhì)及用量、顯色劑用量、反應(yīng)時(shí)

3、間、離子強(qiáng)度、干擾離子、最大結(jié)合數(shù)、摩爾吸光系數(shù)ε等,建立了一系列定量測(cè)定蛋白質(zhì)的新方法;并首次將微乳液作為介質(zhì)用于蛋白質(zhì)測(cè)定中,起到了增溶增敏的作用,提高了體系的靈敏度.該論文的系統(tǒng)性、科學(xué)性和新穎性:1.系統(tǒng)性:該論文系統(tǒng)地研究了具有不同取代基的三羥基熒光酮類試劑-鉬(VI)配合物光譜探針與蛋白質(zhì)分子的反應(yīng)條件(酸度、介質(zhì)及用量、顯色劑用量、反應(yīng)時(shí)間、離子強(qiáng)度、干擾離子、最大結(jié)合數(shù)、摩爾吸光系數(shù)ε)及取代基、取代基位置對(duì)體系靈敏度的

4、影響,為建立高靈敏度定量測(cè)定蛋白質(zhì)的方法奠定了基礎(chǔ).2.科學(xué)性:熒光酮類試劑-金屬離子配合物光譜探針光度法測(cè)定蛋白質(zhì)靈敏度高且抗干擾能力強(qiáng),成為微量蛋白質(zhì)檢測(cè)的一種靈敏方法.該論文通過大量的科學(xué)實(shí)驗(yàn)建立了更靈敏的方法,靈敏度比文獻(xiàn)記載的方法高5.4倍,應(yīng)用于人尿樣、人血樣、奶粉中蛋白質(zhì)的分析測(cè)定上,取得了令人滿意的結(jié)果.3.新穎性:首次將微乳液作為介質(zhì)用于蛋白質(zhì)測(cè)定中,起到了增溶增敏的作用,提高了體系的靈敏度;論文中所用的大部分熒光酮類