PEO-b-P4VP用于毛細管電泳分離蛋白質(zhì)的研究.pdf

1、毛細管電泳(CE)作為一種強有力的分析技術(shù)，在生物工程、醫(yī)學(xué)藥物和食品檢測等生命科學(xué)和化學(xué)所涉及的領(lǐng)域都顯示了極其重要的應(yīng)用前景，由于CE的理論分離柱效與樣品組分擴散系數(shù)成反比，使其在生物大分子(如蛋白質(zhì)和核酸)的分離方面應(yīng)用比較廣泛。但由于毛細管內(nèi)表面的硅羥基電離(pH>3)形成帶負電的吸附點，使管壁對生物大分子尤其是堿性蛋白質(zhì)產(chǎn)生強烈的吸附，導(dǎo)致峰拖尾、峰形展寬、分離效率與遷移時間的重復(fù)性下降，甚至形成不可逆吸附使分離無法進行。

2、 目前，人們通常采用極端pH、添加劑、外加徑向電場和聚合物涂層等幾種方法來抑制蛋白質(zhì)在管壁的吸附。極端pH和添加劑的方法會降低分離選擇性甚至引起蛋白質(zhì)變性；外加徑向電場又需要特殊的儀器裝置：聚合物涂層方法穩(wěn)定、高效，是解決此問題的有效途徑之一。毛細管涂層的形成大致可分為三類：動態(tài)涂覆，化學(xué)鍵合和物理吸附。其中，動態(tài)涂覆方法最簡單，但是穩(wěn)定性差：化學(xué)鍵合涂層穩(wěn)定性較好但制作工藝麻煩；物理吸附方法既簡便易行又具有較高穩(wěn)定性，并且涂層可再

3、生，因而備受親睞。已用于化學(xué)鍵合方法改性毛細管壁的聚合物包括聚丙烯酰胺(PAM)，聚乙烯醇(PVA)，聚乙二醇(PEG)，聚N，N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)等：通過物理吸附方法改性毛細管壁的聚合物包括聚乙烯醇(PVA)，聚環(huán)氧乙烷(PEO)，聚醚(PEO-PPO-PEO三嵌段共聚物)，聚N，N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)，聚羥乙基丙烯酰胺(PHEA)，聚氨基葡萄糖(Chitosan)，聚乙烯亞胺(PEI)等。 本論文通過原子轉(zhuǎn)

4、移自由基聚合(AXRP)方法合成了兩嵌段聚合物聚(乙二醇-4-乙烯基吡啶)(PEO-b-P4VP)，并將其作為毛細管電泳分離堿性蛋白質(zhì)的涂層，取得了較好效果，具體研究內(nèi)容包括以下幾個方面： 一、將聚N，N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)作為物理吸附的涂層，研究了毛細管預(yù)處理過程對電滲流及堿性蛋白質(zhì)分離的影響，優(yōu)化了分離條件。 二、通過ATRF方法合成了一組不同分子量的PEO-b-P4VP嵌段聚合物，并用核磁(NMR)、體積排