激素、肽類的毛細管電泳分離研究.pdf

1、毛細管電泳(CE)又稱高效毛細管電泳(HPCE)或毛細管電分離法(CESM)，是一類以毛細管為分離通道、以高壓直流電場為驅(qū)動力、依據(jù)樣品各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的高效、高選擇性的新型液相分離分析技術。該方法具有高效、快速、自動化程度高、試劑消耗少、環(huán)境污染小等優(yōu)點，在十幾年的時間中，特別是在最近幾年，受到分離分析科學家的極大關注，成為生物化學和分析化學中最受矚目，發(fā)展最快的分離分析新技術之一。 激素(hormo

2、ne)音譯為荷爾蒙，就是高度分化的內(nèi)分泌細胞合成并直接分泌入血的化學信息物質(zhì)，它通過調(diào)節(jié)各種組織細胞的代謝活動來影響人體的生理活動。激素的分泌量均極微，為毫微克(十億分之一克)水平，但其調(diào)節(jié)作用極其明顯。研究激素不僅可了解某種激素對動物和人體的生長、發(fā)育、生殖的影響及致病的機理，還可利用測定激素來診斷疾病。肽(peptide)是氨基酸通過肽鍵彼此連結而成的小分子化合物，一般都由L型僅α-氨基酸組成，是生物體內(nèi)一類重要的活性物質(zhì)。肽類物質(zhì)

3、具有極強的活性和多樣性，是世界生物學界、醫(yī)學界、藥學界研究開發(fā)的熱點，生物活性肽將在世界范圍內(nèi)引起關注。 激素、肽類物質(zhì)是生命有機體的重要組成部分，使用毛細管電泳分離手段對它們進行研究，對醫(yī)藥、食品、衛(wèi)生等領域的發(fā)展創(chuàng)新都具有重要意義。由于大多數(shù)肽類物質(zhì)沒有或只有很弱的紫外吸收，直接紫外檢測滿足不了低含量組分測定的要求。衍生試劑的研究和應用不僅可以克服儀器分析方法在某些方面的局限性，而且在化學方法的分離、富集和檢測中都起著重要的

4、作用。目前廣為應用的衍生試劑主要有9-芴甲氧羰基氯(FMOC)、鄰苯二甲醛(OPA)和5-二甲氨基萘-1-磺酰氯(DNS-Cl)等。但是這些衍生試劑本身的一些特性決定了其應用的局限性。為此，本文采用新型衍生化試劑，改變被測化合物的特性，進行了肽類物質(zhì)的毛細管電泳的分離，結果令人滿意。 論文分三章： 第一章： 簡單介紹了毛細管電泳的發(fā)展及其在藥物分析、生物分子分離、基因工程研究、臨床醫(yī)學等各方面的應用，并對毛細管電

5、泳分離被分析物的策略及其相關的基礎知識進行了闡述。 第二章： 四種激素類物質(zhì)的毛細管電泳分離研究，采用毛細管膠束電動色譜模式對睪酮、皮質(zhì)酮、皮質(zhì)醇、孕酮等四種激素類物質(zhì)進行了分離，研究了影響分離的幾個關鍵條件，在22分鐘內(nèi)實現(xiàn)了四種激素類物質(zhì)的基線分離。 第三章： 非水毛細管電泳對肽類衍生物的分離研究，包括兩部分： 3.1非水毛細管電泳對BCEC-CI二肽衍生物的分離研究，以2-(11H-苯[a]