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文檔簡介
1、背景與目的:三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白G2(Adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member2,ABCG2)在多種腫瘤細胞中表達,可通過外排抗癌藥物參與腫瘤耐藥。本研究的目的旨在探討人膠質(zhì)瘤細胞對焦脫鎂葉綠酸甲酯(pyropheophorbide-a methyl ester,MPPa)介導的光動力療法(photodynamic therapy, PDT)治療的敏感性
2、及其與ABCG2的關(guān)系。
方法:將處于對數(shù)生長期的U87,A172,SHG-44,U251膠質(zhì)瘤細胞系,經(jīng)Mppa-PDT處理后,采用CCK-8法檢測細胞活性;流式細胞技術(shù)和Western Blot分別檢測四種細胞內(nèi)Mppa的含量及ABCG2的表達;PCR檢測四種細胞中耐藥相關(guān)蛋白(ABCG2,MDR,MRP1)的基因表達情況,篩選出對Mppa-PDT相對不敏感且ABCG2高表達的細胞系。將其隨機分為A組:單純光照組;B組:M
3、PPa-PDT組;C組:光照+煙曲霉毒素 C(Fumitremorgin C,F(xiàn)TC)組及 D組:Mppa-PDT+FTC組。經(jīng)上述分組處理后,采用CCK-8法檢測各組細胞活性;流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率、細胞內(nèi)ROS的水平及未光照前各組細胞內(nèi)Mppa的含量。
結(jié)果:四種細胞對Mppa-PDT存在光能量依賴性,相同光能量照射處理后,A172細胞的細胞活性高于其他三種膠質(zhì)瘤細胞;MPPa與四種膠質(zhì)瘤細胞共同孵育12h后A172,S
4、HG-44細胞內(nèi)Mppa含量明顯低于U87,U251(P=0.0000);A172細胞中ABCG2基因及蛋白表達水平明顯高于其他細胞系(P=0.0000);FTC抑制A172細胞中的ABCG2后,F(xiàn)TC+Mppa組細胞內(nèi)Mppa含量明顯高于Mppa組(P<0.0001);D組ROS高于C組(P<0.0001);D組細胞的細胞活性比C組低(P<0.001),凋亡率明顯高于C組(P<0.001)。
結(jié)論:人膠質(zhì)瘤細胞A172對Mp
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