高效液相色譜法和光譜法測定松花粉和龍葵中巰基化合物.pdf

1、植物體中的谷胱甘肽（GSH）等含巰基的化合物不僅在植物自身生理中扮演重要作用，而且對其他生命提供類似的生物活性，如抗氧化，抗癌、提高免疫力等。但許多植物缺少這些含巰基化合物的含量報道，這可能與植物樣品的前處理過程不當有關。目前植物樣品中活性成分的測定，大多經過細胞破壁、提純、衍生化等前處理步驟。而巰基化合物的巰基具有還原性，故在細胞破壁提取過程中很容易被胞外的環(huán)境所氧化變性，導致無法得到樣品中準確的巰基化合物含量的信息。本研究利用細胞破

2、壁、衍生化為一體的同步衍生化的前處理方法，采用高效液相色譜法和光譜法測定了松花粉和龍葵中巰基化合物。
　　第一章緒論綜述了生物體中巰基化合物的生物學功能與測定方法，并提出了本文的選題思想和主要研究內容。
　　第二章高效液相色譜法測定松花粉中GSH和Cys高效液相色譜法可以測定生物樣品中各種巰基化合物。本文利用DTNB為衍生化試劑，采用細胞破壁、衍生化為一體的同步衍生化的前處理方法，測定了松花粉中GSH和Cys的含量。松花粉中

3、GSH和Cys的含量分別為0.5344μmol/g和0.4134μmol/g,回收率達101.14％和96.83%，其檢測限分別為5.43μmol/L和4.96μmol/L。
　　第三章光譜法測定松花粉中總巰基和GSH的含量衍生化試劑DTNB對GSH、Cys以及含半胱氨酸殘基的蛋白質中的巰基無選擇性，可以測定樣品中總巰基的含量，而衍生化試劑OPA與巰基化合物中的GSH選擇性作用生成熒光衍生化產物。本文采用細胞破壁、衍生化為一體的同

4、步衍生化的前處理方法，利用DTNB衍生化UV-vis分光光度法和OPA衍生化熒光分光光度法測定了松花粉中總巰基和GSH的含量。松花粉中總巰基和GSH的含量分別為4.1500-4.4160μmol/g和0.5045-0.5181μmol/g，回收率達97.22%和96.44%，其檢測限分別為2.2414μmol/L和0.1162μmol/L。
　　第四章光譜法測定龍葵葉子中總巰基和GSH的含量衍生化試劑4-DPS類似于DTNB，可以