保肝解毒膠囊對肝損傷大鼠模型細(xì)胞凋亡Bcl-2、Fas基因表達(dá)影響.pdf

1、目的：本文通過認(rèn)真挖掘博大精深的中醫(yī)學(xué)理論寶貴精神財富，并對歷代醫(yī)家有關(guān)肝損傷的認(rèn)識進(jìn)行了歷程探源，意在充分揭示肝損傷的中醫(yī)學(xué)發(fā)病關(guān)鍵是脾胃虧虛，毒邪乘虛入侵所致，臨床辨治肝損傷當(dāng)以補(bǔ)脾胃為主，尚需參以解毒，并佐以清肝為治療大法。保肝解毒膠囊作為典型這一治法的代表方，臨床運用有效，進(jìn)一步觀察本方對大鼠肝損傷模型的保護(hù)作用，探討其可能的作用機(jī)制，以期進(jìn)一步弄清本方防治肝損傷作用機(jī)理，意在為臨床應(yīng)用提供一定的實驗學(xué)依據(jù)。 方法：實驗

2、用健康Wister大鼠(平均體重150～280g)作為研究探討對象，卡介苗加脂多糖(BCG+LPS)、卡馬西平(CBZ)、牛血清白蛋白(BSA)致肝損傷動物模型，再用保肝解毒膠囊(分大、中、小劑量組，分別標(biāo)以治療組1-3)與甘利欣分別灌胃，并設(shè)空白組與模型組，然后生化法檢測血清肝功能ALT、AST，原位末端標(biāo)記檢測凋亡細(xì)胞陽性百分率，免疫組織化學(xué)染色檢測細(xì)胞凋亡Bcl-2、Fas基因表達(dá)水平，最后進(jìn)行對比觀察指標(biāo)。 結(jié)果：1、通

3、過對肝損傷治療前后肝功能(ALT、AST)檢測指標(biāo)進(jìn)行觀察，模型組與空白組相比較，模型組無論肝功ALT或是AST均明顯高于空白組肝功能ALT、AST值，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理具有顯著性差異(p＜0.01)。模型組與治療組相比較，無論治療組的大、中、小劑量均可使大鼠肝功能的ALT、AST值明顯降低，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理各組間比較有明顯差異(p＜0.01)。治療組與對照組相比較，治療組中劑量在改善肝功能ALT或者AST方面，與對照組相比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理具有顯

4、著性差異(p＜0.01)。2、通過對肝損傷治療前后原位末端標(biāo)記檢測凋亡肝細(xì)胞陽性百分率指標(biāo)進(jìn)行觀察，模型組與空白組相比較，模型組細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于空白組肝細(xì)胞凋亡指數(shù)，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理具有顯著性意義(p＜0.01)。模型組與治療組相比較，無論治療組的大、中、小劑量均可使大鼠肝細(xì)胞凋亡指數(shù)值明顯降低，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理各組間比較有明顯差異(p＜0.01)。治療組與對照組相比較，治療組2與對照組肝細(xì)胞凋亡指數(shù)相比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理具有顯著性差異(p＜

5、0.01)。3、通過對肝損傷治療前后細(xì)胞凋亡Bcl-2或者Fas基因陽性表達(dá)百分率檢測指標(biāo)進(jìn)行觀察，模型組與空白組的細(xì)胞凋亡Bcl-2或者Fas基因陽性表達(dá)百分率相比較差異明顯，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理具有顯著性意義(p＜0.01)。模型組與治療組相比較，無論治療組的大、中、小劑量組大鼠肝細(xì)胞凋亡Bcl-2或者Fas基因陽性表達(dá)百分率，與模型組的細(xì)胞凋亡Bcl-2或者Fas基因陽性表達(dá)百分率相比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理各組間比較有明顯差異(p＜0.01)。

6、治療組與對照組相比較，治療組中劑量組的細(xì)胞凋亡Bcl-2或Fas基因陽性表達(dá)百分率，與對照組相比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理具有顯著性意義(p＜0.01)。 結(jié)論：1、本文全面系統(tǒng)地總結(jié)出了導(dǎo)師羅欣拉教授辨治肝損傷經(jīng)驗之精華，即補(bǔ)脾胃、解毒、清肝三大法，補(bǔ)脾胃意在提高機(jī)體免疫力，增加人體正氣，也即“五臟元真通暢，人即安和”。解毒是從解除致病邪氣對肝細(xì)胞的損害，也即“邪去則正安”。清肝是從肝陽常有余入手，清肝也謂保肝，以達(dá)“謹(jǐn)調(diào)陰陽，以平為期

7、”之目的。2、保肝解毒膠囊是以補(bǔ)脾胃、解毒、清肝三法為基礎(chǔ)而成方，通過對肝功能(ALT、AST)檢測指標(biāo)進(jìn)行觀察，這說明保肝解毒膠囊無論大中小劑量均對肝損傷大鼠有明顯降酶作用，采用保肝解毒膠囊中劑量在防護(hù)肝細(xì)胞損傷方面，要優(yōu)于甘利欣膠囊的保肝護(hù)肝作用。3、通過對原位末端標(biāo)記凋亡肝細(xì)胞陽性百分率檢測指標(biāo)進(jìn)行觀察，這說明肝損傷模型的確存在細(xì)胞過度凋亡現(xiàn)象，保肝解毒膠囊采用中劑量在防護(hù)肝細(xì)胞損傷方面，要優(yōu)于甘利欣膠囊的抑制肝細(xì)胞凋亡作用。4、

8、通過對肝細(xì)胞凋亡Bcl-2或者Fas基因陽性表達(dá)百分率檢測指標(biāo)進(jìn)行觀察，這說明造模后大鼠肝細(xì)胞凋亡基因明顯產(chǎn)生了失控現(xiàn)象，采用保肝解毒膠囊治療肝損傷具有明顯調(diào)控細(xì)胞凋亡基因失調(diào)作用，保肝解毒膠囊采用中劑量在調(diào)控肝細(xì)胞凋亡Bcl-2或者Fas基因失控方面，明顯優(yōu)于甘利欣膠囊的調(diào)控肝細(xì)胞凋亡Bcl-2或者Fas基因失控作用。綜上所述，保肝解毒膠囊治療肝損傷的療效要優(yōu)于國內(nèi)目前應(yīng)用的甘利欣膠囊的療效，極具有臨床應(yīng)用前景，本課題的完成將為保肝護(hù)