西維因?qū)α_非魚內(nèi)分泌干擾效應(yīng)非受體介導作用的影響及其遺傳毒性研究.pdf

1、作為普遍使用的氨基甲酸酯類殺蟲劑-西維因，由于地表徑流和不規(guī)范使用，致使其廣泛的殘留與分布，威脅到生物體的生長發(fā)育與生態(tài)環(huán)境的平衡，造成的不良影響已不可忽視。西維因具有一定遺傳毒性和雌激素效應(yīng)。內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的作用機制分為受體介導和非受體介導。受體介導作用是指外源性雌激素通過模仿或拮抗內(nèi)源性激素，與內(nèi)源性激素受體結(jié)合，引發(fā)生物學反應(yīng)干擾機體正常內(nèi)分泌系統(tǒng)。
　　非受體介導作用是指西維因通過影響內(nèi)分泌激素的合成、運輸、轉(zhuǎn)化和代謝等過

2、程干擾機體的內(nèi)分泌系統(tǒng)。本試驗以雄性尼羅羅非魚為研究對象，探討不同濃度下西維因的暴露對羅非魚血清中內(nèi)分泌相關(guān)激素水平、組織的DNA損傷以及內(nèi)分泌激素合成途徑中相關(guān)基因表達水平的影響，為分析和評價西維因的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的非受體介導作用機制和遺傳毒性提供科學依據(jù)。
　　羅非魚暴露于不同劑量下的西維因(0.16mg/L、0.8mg/L、2mg/L)為期29天，酶聯(lián)免疫法測定血清中黃體生成素(LH)，卵泡刺激素(FSH)，三碘甲狀腺原氨酸

3、(T3)，甲狀腺素(T4)，雌二醇(E2)、睪酮(T)、卵黃蛋白原(VTG)、皮質(zhì)醇(COR)水平，結(jié)果顯示:0.8mg/L劑量組各激素水平隨暴露時間的增加呈現(xiàn)先上升后下降再上升的變化趨勢，短期暴露第10天，0.8mg/L劑量組下的各激素水平明顯高于對照組及另外兩組，到暴露中期下降趨勢明顯，下降幅度最大，之后隨著暴露時間的增加而上升，體現(xiàn)了非單調(diào)劑量-效應(yīng)關(guān)系;2mg/L劑量組隨著暴露時間的增加一直穩(wěn)步上升，并在暴露后期第29天達到最大

4、值，體現(xiàn)了時間-效應(yīng)關(guān)系。西維因的暴露，促使了內(nèi)分泌激素水平的波動性上升，干擾了下丘腦-腦垂體-性腺軸與下丘腦-腦垂體-甲狀腺軸的內(nèi)分泌系統(tǒng)。
　　為研究西維因暴露對雄性羅非魚內(nèi)分泌激素合成途徑中相關(guān)基因表達水平的影響，本實驗通過實時熒光定量PCR測定出精巢組織中部分基因3β-HSD1、11β-HSD2、CYP19a、CYP19b以及肝臟組織中3β-HSD1在整個暴露時期幾乎一直處于基因上調(diào)，驗證了西維因?qū)π坌粤_非魚具有雌激素效應(yīng)

5、。CYP19a、CYP19b基因上調(diào)也促進了血清中雌二醇(E2)等性激素水平的升高。
　　西維因暴露第10天、19天、29天，采取羅非魚精巢組織，利用單細胞凝膠電泳技術(shù)立即測定西維因?qū)驳腄NA損傷。精巢DNA損傷程度隨著暴露時間的增加逐漸加劇，在暴露第29天，DNA損傷最為嚴重。10天的短期暴露和29天的長期暴露下，各劑量組的DNA損傷指標——尾部DNA量(TDNA％)、尾長(TL)、尾矩(TM)、Olive尾矩(OTM)。與

6、對照組相比差異顯著(P＜0.05)，西維因暴露10-19天，DNA損傷變化幅度較小。一定濃度范圍內(nèi)的西維因?qū)NA損傷存在劑量-效應(yīng)關(guān)系和時間-效應(yīng)關(guān)系，0.16mg/L低劑量西維因?qū)睤NA損傷程度與0.8mg/L和2mg/L劑量組相比差異顯著(P＜0.05)，中高劑量的西維因組差異不顯著。
　　研究表明西維因?qū)π坌粤_非魚內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的非受體介導作用存在一定的影響，西維因暴露下的部分內(nèi)分泌相關(guān)基因不同程度的表達，在一定范圍內(nèi)