產(chǎn)γ-氨基丁酸的菌株篩選及鑒定.pdf

1、γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）是一種非蛋白質(zhì)天然氨基酸，經(jīng)谷氨酸脫羧酶（glutamate decarboxylase，GAD）催化L-谷氨酸(L-glutamic acid)脫羧所得。普遍存在于自然界中，是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的主要抑制性遞質(zhì)，具有多種重要的生理功能，在醫(yī)療、食品保健、化工和農(nóng)業(yè)等方面的應(yīng)用存在巨大潛力。GABA的天然含量極低，從動(dòng)植物中提取非常困難，目前生產(chǎn)GABA的方法主要為化學(xué)合

2、成法與微生物發(fā)酵法。相比之下，微生物發(fā)酵法反應(yīng)條件溫和、安全性高、成本低，更具備開(kāi)發(fā)前景。目前已報(bào)道的微生物GAD活力普遍不高，GABA產(chǎn)量大多在3~30 mg/mL左右，且研究對(duì)象多為大腸桿菌 GAD，因其生物合成GABA過(guò)程中存在巨大的安全隱患,其產(chǎn)物在食品、醫(yī)藥方面的應(yīng)用也存在很大的局限性。近年來(lái)雖有許多關(guān)于篩選產(chǎn)GABA菌株的研究，但是可實(shí)際投入生產(chǎn)的卻極少，探索得到安全、高產(chǎn)的菌株仍是急待解決的課題。
　　本研究從泡菜汁

3、及酸奶液中進(jìn)行定向篩選，利用薄層層析法對(duì)其發(fā)酵物進(jìn)行了初步分析，隨后對(duì)其進(jìn)行了16S rDNA基因測(cè)序，最后利用HPLC法對(duì)產(chǎn)物定量分析評(píng)估其生產(chǎn)能力。結(jié)果表明得到六株產(chǎn)GAD催化L-Glu脫羧生成GABA的菌株,此六個(gè)菌株均可生產(chǎn)GABA，在GenBank中進(jìn)行同源性比對(duì)后，鑒定六菌株均屬于植物乳酸短桿菌。定量分析六株菌發(fā)酵液中γ-氨基丁酸含量發(fā)現(xiàn)其產(chǎn)量均在200~500μg/mL之間,其中最高產(chǎn)量為493.3μg/mL。結(jié)果表明，硅