簡介：徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文SIRNA沉默SATB1基因?qū)η傲邢侔〥U145細(xì)胞的生物學(xué)影響姓名馬祝新申請學(xué)位級別碩士專業(yè)泌尿外科學(xué)指導(dǎo)教師王軍起201205A值小于陰性對照組和空白對照組PO05，分別為SIRNA2O18006、空白組O37006、陰性對照組034士004；遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，遷移1車小時(shí)后，SIRNA2遷移細(xì)胞數(shù)為4908士1064，顯著低于空白組12253606邴J1性對照組11547士598，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO05；劃痕實(shí)驗(yàn)也顯示SIRNA2卻痕愈合率顯著低于空白組和陰性對照組PO05；TRANSWELL侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，＼侵襲36小時(shí)后，SIRNA2侵襲細(xì)胞數(shù)為136601031，顯著低于空白I組27056士1795311陰性對照組267191170，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO05；WESTBMBLOT結(jié)果SIRNA2組MMP2／13ACTIN的比值分別為O50士O055、與空白對照組104士0045和陰性對照組O89士010相比，比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO05。I結(jié)論應(yīng)用RNA干擾技術(shù)沉默SATBL基因可以抑制人前列腺癌DUL45細(xì)胞中SATBL基因的表達(dá)，抑制細(xì)胞的增殖和細(xì)胞對基質(zhì)粘附力，降低細(xì)胞遷移和侵襲力，下調(diào)MMP2的蛋白表達(dá)，有望成為前列腺癌基因治療的新靶點(diǎn)。關(guān)鍵詞前列腺癌；SATBL；SIRNA；轉(zhuǎn)移；MMP24

簡介：河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文HIF1Α的表達(dá)與肝細(xì)胞癌生物學(xué)特征及增殖、凋亡的關(guān)系姓名魏強(qiáng)申請學(xué)位級別碩士專業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師王順祥20070301中文摘要正常肝組織P005；HIF1Q表達(dá)水平在有膽道或門靜脈癌栓組顯著高于無膽道或門靜脈癌栓組P005；HIF1Ⅱ與鼬67表達(dá)無關(guān)腳288，P005。結(jié)論1HIF1Q在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)水平明顯高于癌旁和正常肝組織，說明HIF。1Q與肝細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。HIF1D表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤大小、有無肝內(nèi)或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及AFP水平無關(guān)。HIF1A在有膽道或門靜脈癌栓組表達(dá)水平顯著高于無膽道或門靜脈癌栓組；HIF1A在腫瘤低分化組表達(dá)水平顯著高于中高分化組，提示HIF1Q與肝細(xì)胞癌侵襲及轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特征有關(guān)。2HIF1A與BCL2表達(dá)水平正相關(guān)，HIF1Q與BAX表達(dá)水平負(fù)相關(guān)。說明HIF1Q抑制肝細(xì)胞癌的凋亡。3HIF1D表達(dá)水平與SURVIVIN的表達(dá)無關(guān)，表明HIF1Q對凋亡因子SURVIVIN無明顯調(diào)控作用。

簡介：目的探討葛根素對人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞HUMANUMBILICALCDMESENCHYMALSTEMCELLSHUCMSCS生長特性及成骨分化能力的影響為臨床葛根素的應(yīng)用開辟新途徑提供新理論。研究還原型谷胱甘肽GSH對人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞HUMANUMBILICALCDMESENCHYMALSTEMCELLSHUCMSCS生物學(xué)特性的影響并對其機(jī)制進(jìn)行了初步探討為將來能夠體外長期培養(yǎng)間質(zhì)干細(xì)胞提供新方法。方法①采用組織塊貼壁法獲得臍帶間質(zhì)干細(xì)胞。②運(yùn)用MTT法檢測葛根素和GSH對臍帶間質(zhì)干細(xì)胞增殖能力和生長曲線的影響。③采用流式分析還原型谷胱甘肽對臍帶間質(zhì)干細(xì)胞周期的影響。④取HUCMSCS進(jìn)行成骨分化誘導(dǎo)用ALP細(xì)胞化學(xué)染色以及鈣基質(zhì)染色VONKOSSA法比較細(xì)胞加藥誘導(dǎo)前后的變化并提取RNA檢測ALP基因水平的差異。⑤采用流式檢測在還原型谷胱甘肽的干預(yù)下特定濃度的醋酸鉛引起臍帶間質(zhì)干細(xì)胞凋亡的變化。⑥采用試劑盒檢測還原型谷胱甘肽對臍帶間質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清中丙二醛MDA和超氧化物歧化酶SOD的影響。⑦采用WESTERNBLOT檢測還原型谷胱甘肽對臍帶間質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞增殖蛋白ERK的影響。結(jié)果①隨著葛根素濃度的升高吸光度值OD逐漸下降。成骨誘導(dǎo)14天后葛根素組ALP陽性細(xì)胞數(shù)明顯比對照組高；VONKOSSA染色結(jié)果顯示葛根素組細(xì)胞外的鈣基質(zhì)沉積量比對照組高。成骨誘導(dǎo)第七天葛根素組ALP基因表達(dá)量比對照組高。②還原型谷胱甘肽組細(xì)胞周期與對照組相比S期升高。成骨誘導(dǎo)十四天染色還原型谷胱甘肽處理組與對照組相比ALP陽性細(xì)胞數(shù)無明顯差別。與對照組相比還原型谷胱甘肽處理后細(xì)胞培養(yǎng)上清中MDA減少SOD升高。細(xì)胞蛋白PERK／TERK的比值24H的比0H的高。流式分析結(jié)果顯示還原型谷胱甘肽組凋亡細(xì)胞數(shù)比鉛處理組少。結(jié)論①葛根素對人類臍帶間質(zhì)干細(xì)HUCMSCS活性能夠產(chǎn)生影響。在一定范圍內(nèi)低濃度的促進(jìn)其增殖高濃度的抑制其增殖。葛根素對其成骨分化有促進(jìn)作用。②還原型谷胱甘肽在015MG／ML濃度下對臍帶間質(zhì)干細(xì)胞活性影響最強(qiáng)。在此濃度下既不影響間質(zhì)干細(xì)胞成骨分化也不影響其表面標(biāo)志的表達(dá)并且還原型谷胱甘肽可以減弱鉛對臍帶間質(zhì)干細(xì)胞的損害。

簡介：復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文Β連環(huán)蛋白對肝癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響和其在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的調(diào)控姓名尹淼申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師申宗侯200251碩二B學(xué)位論文及一些食物源性的天然物質(zhì)，近年來對化學(xué)防癌劑的研究顯示這些藥物在腫瘤防治方面有著良好的前景。白藜蘆醇RESVERATR01是從葡萄、果類、和虎杖根的提取物中發(fā)現(xiàn)的一種植物抗毒素，可以在腫瘤的起始、發(fā)展、演進(jìn)的階段發(fā)揮作用，抑制腫瘤的增殖，誘導(dǎo)凋亡，是一種很有效的化學(xué)防癌劑。餓們在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可以明顯抑制SMMC7721細(xì)胞的增殖，隨后又分別用流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡，從生化和形態(tài)兩方面證實(shí)了白藜蘆醇可以誘導(dǎo)SMMC772L細(xì)胞發(fā)生凋亡。進(jìn)～步的研究發(fā)現(xiàn)，用白藜蘆醇以不同濃度及不同的時(shí)間處理SMMC一7721細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)PKB及BCATENIN的蛋白含量均有下降，且呈濃度和時(shí)間依賴性。因此白藜蘆醇很可能是通過調(diào)節(jié)那些與細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡相關(guān)的信號(hào)通路及通路中的關(guān)鍵分子，來發(fā)揮抗癌作用。關(guān)鍵詞B一連環(huán)蛋白／、反義核酸IPKB化學(xué)防癌劑白藜蘆醇J／／

簡介：點(diǎn)擊查看更多神經(jīng)干細(xì)胞生物學(xué)特性、神經(jīng)干細(xì)胞移植治療顱腦損傷后神經(jīng)功能缺失及免疫基因治療大鼠膠質(zhì)瘤的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：白細(xì)胞介素2IL2最初曾被稱為T細(xì)胞生長因子，能促使各種造血細(xì)胞增殖和分化。臨床研究表明其關(guān)鍵作用可作為T淋巴細(xì)胞激活的增殖信號(hào)，因而將IL2用于治療艾滋病。基于其能刺激具有細(xì)胞毒的，抗腫瘤細(xì)胞的能力，IL2還用于各種癌癥的治療。目前人IL2已經(jīng)完全用基因工程的方法生產(chǎn)，而且基因工程IL2與天然IL2的功能和臨床效果基本一致。目的近年來，雖然基因工程產(chǎn)品IL2應(yīng)用于肝炎及某些癌癥的治療已取得令人矚目的成果，但大計(jì)量，長時(shí)間用藥對病人存在一定的副作用，如發(fā)熱、寒戰(zhàn)、惡心、嘔吐、頭暈、乏力和毛細(xì)血管滲漏綜合癥等，所以，為了提高人重組白細(xì)胞介素2的穩(wěn)定性和活性以及減少毒副作用，有必要定向改造RHIL2的分子結(jié)構(gòu)，并在畢赤酵母中高效表達(dá)HIL2CDNA，獲得HIL2蛋白，擬對野生型HIL2進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造以獲得新的突變體，同時(shí)進(jìn)行活性測定，以便深入了解HIL2的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。方法用PCR法從白細(xì)胞介素2CDNA全序列中擴(kuò)增成熟的肽基因片段，并利用定點(diǎn)突變技術(shù)將人重組白細(xì)胞介素2第125位游離的半胱氨酸編碼序列突變?yōu)楸彼嵝蛄?；編碼18位亮氨酸的序列突變?yōu)榈鞍彼嵝蛄校痪幋a19位亮氨酸的序列突變?yōu)榻z氨酸序列，經(jīng)限制酶片段分析與DNA序列分析證明后，獲得突變體MVHIL2。IL2基因片段與酵母中間載體PPIC9K融合后，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌TOP10F’，擴(kuò)增質(zhì)粒，獲得大量PPIC9KMVHIL2DNA后，再轉(zhuǎn)化畢赤酵母，并在搖瓶和發(fā)酵罐上對IL2C125AL18ML19S進(jìn)行了表達(dá)。然后，利用離子交換層析的方法純化了MVHIL2蛋白，利用IL2依賴細(xì)胞株CTLL2細(xì)胞對純化的突變蛋白IL2C125AL18ML19S和野生型IL2同樣方法獲得的進(jìn)行測活。結(jié)論人IL2CDNA可通過PCR技術(shù)進(jìn)行定點(diǎn)突變，所獲得的突變型MVHIL2活性比天然型MVHIL2高45倍。所以IL2突變體IL2C125AL18ML18S較野生型的IL2具有更高的穩(wěn)定性和活性。

簡介：目的通過三氣培養(yǎng)箱模擬低氧微環(huán)境研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MARROWMESENCHYMALSTEMCELLSMSCS在低氧微環(huán)境下生物特征的變化及其向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的能力探討黃芪多糖ASTRAGALUSPOLYSACIDESAPS干預(yù)對低氧微環(huán)境中MSCS的保護(hù)作用為MSCS更有效的應(yīng)用于臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法1利用三氣培養(yǎng)箱建立細(xì)胞低氧模型。將組別分為A、B、C、D四組A組為MSCS放置于常氧21％O2的培養(yǎng)箱下進(jìn)行培養(yǎng)B組為MSCS在低氧培養(yǎng)箱下3O2、5O2、10O2進(jìn)行培養(yǎng)C組為常氧培養(yǎng)加入中藥APSD組為在低氧濃度下培養(yǎng)加入APS即APS3O2、APS5O2、APS10O2。2通過倒置相差顯微鏡觀察各組細(xì)胞生長形態(tài)、MTT法檢測細(xì)胞生長曲線情況流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞周期的變化。3使用熒光染料羅丹明123、HOCHEST33258通過激光共聚焦顯微鏡觀察各分組細(xì)胞線粒體膜電位表達(dá)的改變。4應(yīng)用經(jīng)典神經(jīng)誘導(dǎo)劑Β巰基乙醇誘導(dǎo)MSCS向神經(jīng)樣細(xì)胞分化通過甲苯胺藍(lán)染色檢測神經(jīng)細(xì)胞尼式小體表達(dá)量的變化。5采用WESTERNBLOT方法檢測低氧誘導(dǎo)因子HIF1Α與巢蛋白NESTIN及神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE表達(dá)變化。結(jié)果1倒置相差顯微鏡觀察顯示A組常氧21O2培養(yǎng)下MSCS細(xì)胞形態(tài)均一邊界清晰呈梭形或紡錘形漩渦樣生長B組低氧培養(yǎng)下MSCS細(xì)胞核突出細(xì)胞排列較為紊亂數(shù)量明顯減少細(xì)胞逐漸變得狹長、甚至出現(xiàn)不規(guī)則形狀胞漿減少其中3O2的形態(tài)的改變比5O2、10O2較為明顯。2MTT結(jié)果顯示常氧培養(yǎng)下MSCS生長速度在7D內(nèi)快于低氧培養(yǎng)下MSCS。隨著氧濃度的降低低氧3O2、5O2組細(xì)胞生長變慢經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)非參數(shù)檢驗(yàn)K多個(gè)獨(dú)立樣本檢驗(yàn)分析與常氧組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P3流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示低氧組3O2、5O2、10O2的G1期細(xì)胞比例分別為784、567、812S期細(xì)胞比例為101、26、16。G2期細(xì)胞比例為115、132、209。而常氧組G1期細(xì)胞比例479S期細(xì)胞比例48G2期細(xì)胞比例408。兩者相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P4激光共聚焦顯微鏡觀察線粒體膜電位表明低氧組3O2、5O2與常氧組相比線粒體膜電位表達(dá)量高具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005而APS低氧組3O2、5O2、10O2與低氧組3O2、5O2、10O2相比膜電位變化不明顯P005。5甲苯胺藍(lán)染色結(jié)果顯示低氧組3O2、5O2尼氏小體表達(dá)與常氧組相比升高P6WETERNBLOT檢測NSE、NESTIN、HIF1Α的結(jié)果顯示①低氧組3O2、5O2誘導(dǎo)的細(xì)胞NSE蛋白表達(dá)較常氧組升高差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P②低氧組3O2、5O2NESTIN蛋白表達(dá)量與常氧組相比升高差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P③常氧組HIF1Α表達(dá)量較低而在低氧組中HIF1Α表達(dá)量升高具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。APS常氧組HIF1Α表達(dá)量與常氧組相比無明顯意義P005。④PEARSON相關(guān)性分析顯示低氧組3O2中HIF1Α與NESTIN之間呈正相關(guān)與NSE之間呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論1低氧微環(huán)境誘導(dǎo)MSCS形態(tài)學(xué)改變細(xì)胞生長速度受到抑制。2低氧微環(huán)境可促進(jìn)MSCS向神經(jīng)樣細(xì)胞分化其分子機(jī)制可能與HIF1Α參與調(diào)控通路有關(guān)。3APS聯(lián)合MSCS可促進(jìn)低氧微環(huán)境下MSCS的穩(wěn)定性。

簡介：上海交通大學(xué)上海父逋大字博士學(xué)位論文轉(zhuǎn)錄因子KLF9對人肝癌細(xì)胞的體內(nèi)外生物學(xué)效應(yīng)及其機(jī)制研究』NVTTZ7。抄AND上聆WYDCNARACTERLZATLON0IT1T■J一■●●●■●●INHIBITORYEFFECTSOFTRANSCRIPTIONFACTORKLF9ONHUMANLIVERCANCERCELLS作者姓名導(dǎo)師孫佳彬季育華劉永忠學(xué)科專業(yè)臨床診斷學(xué)教授研究員研究方向腫瘤分子生物學(xué)學(xué)號(hào)0097209107培養(yǎng)單位上海交通大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院上海交通大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“4”指導(dǎo)教師簽名日期年月日材糾日孫月簽者年作文論位期學(xué)日

簡介：背景椎間盤退變INTERVERTEBRALDISCDEGENERATION，IVD是椎間盤突出、椎體滑脫、椎管狹窄等脊柱疾病的首要病因。研究證實(shí)，占椎間盤體積1％的髓核細(xì)胞在維持正常椎間盤細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)平衡以及在修復(fù)退變的椎間盤過程中發(fā)揮著核心作用。肝細(xì)胞生長因子（HEPATOCYTEGROWTHFACT，HGF）是人體中重要的細(xì)胞因子，存在于多種組織與細(xì)胞，發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞增殖、基質(zhì)表達(dá)、血管新生、抑制細(xì)胞凋亡等作用，在生命的器官發(fā)生、形態(tài)形成、個(gè)體發(fā)育以及組織修復(fù)中發(fā)揮作用。通過肝細(xì)胞生長因子對髓核細(xì)胞作用，研究髓核細(xì)胞增殖活性以及細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)變化，為修復(fù)退變的椎間盤尋求切實(shí)可靠的方法。目的1探討肝細(xì)胞生長因子HGF對體外培養(yǎng)的人退變髓核細(xì)胞的生物學(xué)作用。2研究肝細(xì)胞生長因子與胰島素樣生長因子聯(lián)合作用對人退變髓核細(xì)胞的影響。方法收集人退變髓核組織標(biāo)本，分離培養(yǎng)髓核細(xì)胞；免疫組織化學(xué)法檢測髓核細(xì)胞Ⅱ型膠原表達(dá)，HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)；免疫組化染色觀察HGF受體在髓核細(xì)胞中表達(dá)；設(shè)立HGF0NGML、5NGML、50NGML、500NGML組，采用MTT法測細(xì)胞生長曲線，篩選HGF最佳作用濃度；選取第3代髓核細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分HGF組、HGFIGF組、IGF組、對照組，RTPCR檢測Ⅱ型膠原、蛋白多糖、SOX9MRNA表達(dá)；流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞增殖的周期。結(jié)果免疫組化Ⅱ型膠原染色可見細(xì)胞外和胞漿內(nèi)棕褐色顆粒；HE染色細(xì)胞核染成紫色；免疫組化顯示髓核細(xì)胞表達(dá)HGF受體；MTT法提示不同濃度肝細(xì)胞生長因子對體外培養(yǎng)的人退變髓核細(xì)胞均有明顯的促增殖作用，與對照組相比差異均有意義50NGML是實(shí)驗(yàn)中肝細(xì)胞生長因子的最佳作用濃度；HGF、HGFIGF、IGF刺激后髓核細(xì)胞進(jìn)入增殖期比例增加，同時(shí)促進(jìn)髓核細(xì)胞Ⅱ型膠原、蛋白多糖、SOX9MRNA表達(dá)量增加，其中HGFIGF效果更為顯著。結(jié)論1人退變髓核細(xì)胞存在HGF受體；2HGF對體外培養(yǎng)的人退變的髓核細(xì)胞有促增殖作用，可以促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)；HGF與IGF聯(lián)合作用效果優(yōu)于兩者單獨(dú)作用。

簡介：點(diǎn)擊查看更多皮秒脈沖電場對人宮頸癌HeLa細(xì)胞的生物學(xué)作用及劑量與效應(yīng)關(guān)系研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：NK4慢病毒載體的構(gòu)建及對人肝癌細(xì)胞的生物學(xué)特性的影響THECONSTRUCTIONOFNK4RECOMBINANTLENTIVIRALVECTORANDTHEEFFECTONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHUMANHEDATOCARCMOMACELL●●1導(dǎo)師亓5，一級學(xué)科論文課題起止時(shí)間2QQ生三月二2Q12生圣旦中國醫(yī)科大學(xué)遼寧2012年5月目錄一、摘要中文論著摘要”1英文論著摘要”4二、英文縮略語。7三、論文畝FR言8刖舌‘實(shí)驗(yàn)材料與方法9實(shí)驗(yàn)結(jié)果20討念29結(jié)論3L四、本研究創(chuàng)新性的自我評價(jià)32五、參考文獻(xiàn)‘33六、附錄綜述“35在學(xué)期間科研成績43致謝44個(gè)人簡介45

簡介：背景和目的血管新生內(nèi)膜形成是經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療PCI后再狹窄RS的病理基礎(chǔ)。血管內(nèi)皮損傷后，中膜的血管平滑肌細(xì)胞VSMC在多種生長因子、細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)的作用下，由收縮型轉(zhuǎn)化為合成型，并向內(nèi)膜下遷移，發(fā)生過度增殖則是新生內(nèi)膜形成的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。此外，介入術(shù)后早期VSMC凋亡相對不足，增殖與凋亡之間平衡失調(diào)，也是RS發(fā)生的重要機(jī)制。因此，如何有效抑制VSMC細(xì)胞增殖和遷移、調(diào)節(jié)VSMC增殖與凋亡之間的平衡，已成為RS防治的重點(diǎn)。目前的防治方法主要有口服抗血小板藥、他汀類藥、抗增殖藥等藥物，血管內(nèi)放射治療，轉(zhuǎn)基因治療和藥物涂層支架，但均不能完全解決新生內(nèi)膜增生的問題。近年來，有關(guān)將超聲介導(dǎo)微泡技術(shù)引入超聲治療的研究進(jìn)展十分迅速。超聲空化效應(yīng)本身對周圍組織細(xì)胞可產(chǎn)生各種生物學(xué)效應(yīng)，如抑制細(xì)胞增殖、遷移、粘附，促進(jìn)細(xì)胞凋亡等，這些生物學(xué)效應(yīng)可用于臨床治療的各個(gè)方面；超聲造影劑作為一種人為的空化核，不僅降低超聲的空化閾值，增強(qiáng)空化效應(yīng)，并減少產(chǎn)生空化效應(yīng)所需的超聲能量，還可作為攜帶藥物、蛋白和基因的載體，并利用超聲擊破微泡，實(shí)現(xiàn)藥物的靶向?qū)牒歪尫拧Ｒ虼?，如果能將微泡造影劑的靶向載體功能和超聲空化效應(yīng)本身的生物學(xué)效應(yīng)有機(jī)地結(jié)合起來，將為臨床防治RS開辟一個(gè)新途徑。本研究擬制備一種包載紫杉醇的脂質(zhì)體微泡造影劑，研究超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡對體外培養(yǎng)的大鼠VSMC增殖、遷移、凋亡以及表型轉(zhuǎn)化的影響，并對其機(jī)理進(jìn)行探討。方法1采用組織塊貼壁法原代培養(yǎng)大鼠主動(dòng)脈VSMC。2通過臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)評價(jià)超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡對VSMC的安全性。3采用冷凍干燥法制備攜帶紫杉醇的脂質(zhì)體微泡造影劑，在光鏡和熒光顯微鏡下觀察其形態(tài)和大小以及紫杉醇在微泡上的定位，用ZETASIZER3000和PH計(jì)檢測載紫杉醇脂質(zhì)體微泡的粒徑和粒度、表面電位、PH值，應(yīng)用反相高效液相色譜法RPHPLC檢測紫杉醇的包封率，通過臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)評價(jià)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡的安全性。4應(yīng)用四唑鹽MTT比色試驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、MILLICELL小室和ANNEXINVFITCPI雙標(biāo)染色分別檢測超聲介導(dǎo)空白脂質(zhì)體微泡和超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡對VSMC增殖、遷移和凋亡的影響。5應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光化學(xué)、熒光細(xì)胞化學(xué)、熒光探針和激光共聚焦技術(shù)觀察超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡和超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡對VSMC的增殖細(xì)胞核抗原PCNA、P27、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2CDK2、BCL2、BAX、肌動(dòng)蛋白絲FACTIN、紐帶蛋白VINCULIN、Β微管蛋白ΒTUBULIN、波形蛋白VIMENTIN的表達(dá)以及細(xì)胞內(nèi)CA2濃度的影響；6通過RTPCR、WESTERNBLOT和免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測分析超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡和超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡對VSMC表型標(biāo)志基因SMΑACTIN和SMEMB的蛋白及MRNA表達(dá)的影響。結(jié)果1采用組織塊貼壁法原代培養(yǎng)大鼠主動(dòng)脈VSMC，經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)和免疫熒光化學(xué)鑒定證實(shí)為VSMC。21MHZ的連續(xù)波超聲，單純超聲輻照在聲強(qiáng)小于08WCM2，超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡1ΜLML在聲強(qiáng)小于04WCM2時(shí)，對VSMC無明顯的毒性作用；3采用冷凍干燥法成功制備載紫杉醇脂質(zhì)體微泡，其平均粒徑為279ΜM2～10ΜM，表面電位59，PH值554，包封率為361±474％，對VSMC無毒性作用。4以聲強(qiáng)為05WCM2的超聲輻照60S，聲強(qiáng)為03WCM2的超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡輻照30S時(shí)，VSMC吸光度顯著降低P＜005，超聲介導(dǎo)微泡組輻照60S時(shí)吸光度降低最大P＜001；超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組和單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組VSMC吸光度均較血小板衍生生長因子BBPDGFBB組顯著降低P＜001；超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組VSMC吸光度明顯低于超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組和單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組P＜005。5超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組、超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組和單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組S期細(xì)胞比例均較PDGF組顯著降低P＜001，超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組G0G1期細(xì)胞顯著增多P＜001，單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組G2M比例顯著增高P＜001，超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組G0G1期和G2M期細(xì)胞比例均顯著增高P＜001；超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組S期細(xì)胞比例較超聲介導(dǎo)空白脂質(zhì)體微泡組和單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組均顯著降低P＜001。603WCM2的超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡輻照60S時(shí)，VSMC遷移數(shù)顯著減少P＜005，輻照120S時(shí)，VSMC遷移數(shù)減少達(dá)最大；超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組和單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組VSMC遷移數(shù)均顯著降低P＜001；超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組VSMC遷移數(shù)明顯低于超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組和單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組P＜001。7單純超聲輻照組和超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組呈時(shí)間依賴性誘導(dǎo)VSMC凋亡，輻照時(shí)間為120S時(shí)，細(xì)胞凋亡比例達(dá)峰值，分別為1081％和2032％；超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組與超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組之間VSMC凋亡比例無顯著差異P＞005；單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組對VSMC凋亡比例無明顯影響P＞005。8超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組、超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組以及單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組VSMCPCNA蛋白表達(dá)陽性率顯著降低P＜001，其中以超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組更為明顯；超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組和超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組CDK2表達(dá)減少、P27表達(dá)增高P＜001；單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組CDK2、P27表達(dá)無明顯變化P＞005。單純超聲輻照組、超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組和超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組VSMCBAX表達(dá)顯著增高，而BCL2表達(dá)明顯降低P＜005，P＜001；單純載紫杉醇微泡組BAX和BCL2表達(dá)無明顯變化。9超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組，F(xiàn)ACTIN、VINCULIN表達(dá)減少，ΒTUBULIN和VIMENTIN解聚；超聲介導(dǎo)載紫杉醇微泡組和單純紫杉醇微泡組FACTIN、VINCULIN、ΒTUBULIN有邊集現(xiàn)象，VIMENTIN表達(dá)和分布無明顯改變。10超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組、超聲介導(dǎo)載紫杉醇微泡組和單純載紫杉醇微泡組均可減輕VSMC細(xì)胞內(nèi)CA2超載P＜001，其中以超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡組更為明顯。11超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡組可顯著抑制VSMC合成型標(biāo)志基因SMEMB蛋白及MRNA表達(dá)P＜001，并逆轉(zhuǎn)血清誘導(dǎo)的收縮型標(biāo)志基因SMΑACTIN蛋白及MRNA的表達(dá)下調(diào)P＜001；單純載紫杉醇微泡組SMEMB和SMΑACTIN蛋白及MRNA的表達(dá)無明顯變化P＞005。結(jié)論1用冷凍干燥法成功制備了表面帶負(fù)電荷的載紫杉醇脂質(zhì)體微泡超聲造影劑，粒徑大小符合靜脈注射要求，體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)證實(shí)了該超聲造影劑的安全性。2超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡、超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡和單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡均可明顯抑制PDGFBB所致的VSMC增殖、遷移，其中以超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡的作用最為顯著。3超聲介導(dǎo)脂質(zhì)體微泡、超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡可誘導(dǎo)VSMC凋亡，單純載紫杉醇脂質(zhì)體微泡對VSMC凋亡無影響。4超聲空化脂質(zhì)體微泡可顯著抑制血清刺激誘導(dǎo)的VSMC表型標(biāo)志基因的改變，對VSMC表型轉(zhuǎn)化有明顯的逆轉(zhuǎn)作用。超聲介導(dǎo)載紫杉醇脂質(zhì)體微泡逆轉(zhuǎn)VSMC表型轉(zhuǎn)化是超聲空化微泡的結(jié)果，紫杉醇本身對VSMC表型的轉(zhuǎn)化無顯著影響。

簡介：安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文分娩發(fā)動(dòng)前后孕婦蛻膜及外周血中NK、NKT細(xì)胞生物學(xué)特性的研究姓名陳紅波申請學(xué)位級別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師凌斌20100501安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文4情況的變化，并進(jìn)一步檢測外周血單個(gè)核細(xì)胞中TH1/TH2平衡的變化及NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞分泌TH1、TH2型細(xì)胞因子的情況，探討其與分娩發(fā)動(dòng)的關(guān)系，揭示NK細(xì)胞及NKT細(xì)胞在分娩發(fā)動(dòng)中的作用。并進(jìn)一步研究母胎界面趨化因子CXCR4的表達(dá)情況，試圖探討其與分娩發(fā)動(dòng)前后NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞重新分布之間的關(guān)系。研究外周血及蛻膜組織中NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞的功能狀態(tài)與分娩發(fā)動(dòng)的關(guān)系，無疑從一個(gè)全新的角度詮釋分娩這一生理現(xiàn)象，也為揭示妊娠時(shí)限異常疾病的發(fā)生機(jī)制及最終有效防治提供新思路，并為生殖免疫的發(fā)展提供新的理論依據(jù)。目的目的檢測分娩發(fā)動(dòng)前后蛻膜及外周血中NK細(xì)胞及NKT細(xì)胞的含量、表型、TH1/TH2型細(xì)胞因子表達(dá)方面的變化，探討NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞獨(dú)特的表型、功能與分娩發(fā)動(dòng)之間的重要聯(lián)系。檢測母胎界面趨化因子CXCR4表達(dá)的變化，以發(fā)現(xiàn)其與NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞在產(chǎn)程發(fā)動(dòng)后在母胎界面重新分布及功能變化的聯(lián)系。探討母胎免疫平衡在分娩發(fā)動(dòng)中的作用。方法方法1）收取正常晚孕分娩組實(shí)驗(yàn)組，32例和正常晚孕剖宮產(chǎn)組對照組，34例壁蛻膜組織及同一人外周血，機(jī)械研磨法聯(lián)合密度梯度離心法分離出蛻膜單個(gè)核細(xì)胞，單純密度梯度離心法分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測蛻膜及外周血中NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞的含量及表型。2）流式細(xì)胞術(shù)檢測正常晚孕分娩組和剖宮產(chǎn)組外周血中TH細(xì)胞平衡的變化及NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞內(nèi)TH1／TH2型細(xì)胞因子IFNΓ和IL4的表達(dá)。3）收取正常晚孕自然分娩及剖宮產(chǎn)孕婦壁蛻膜及胎盤組織各6例,RTPCR方法檢測胎盤及壁蛻膜中CXCR4的表達(dá)情況。結(jié)果結(jié)果

簡介：毛囊是皮膚重要而復(fù)雜的附屬結(jié)構(gòu)，從內(nèi)向外依次由毛干、內(nèi)根鞘和外根鞘組成。隆突區(qū)是毛囊外根鞘向外隆起的部分，位于皮脂腺導(dǎo)管開口的下方，是立毛肌的附著處。早期研究利用3HTDR標(biāo)記的方法觀察皮膚中標(biāo)記物的分布，發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)標(biāo)記保留細(xì)胞集中在毛囊外根鞘的隆突區(qū)，并且當(dāng)毛囊受X線處理或毛囊下段被去除后仍能再形成完整的毛囊，因此，人們認(rèn)為皮膚中多能干細(xì)胞存在于毛囊上段隆突區(qū)，稱為毛囊干細(xì)胞HFSC。許多研究發(fā)現(xiàn)毛囊隆突區(qū)干細(xì)胞參與毛囊周期的維持以及組織的形成，隆突區(qū)細(xì)胞具有多向分化潛能，不僅能向下遷移形成毛球部，而且能向上遷移參與表皮更新和毛囊、皮脂腺的再生。目前，毛囊干細(xì)胞定位于毛囊隆突區(qū)已經(jīng)得到廣泛地認(rèn)同，并認(rèn)為在上皮各類干細(xì)胞中，隆突區(qū)的毛囊干細(xì)胞群是最具潛力的干細(xì)胞庫。但是直到現(xiàn)在對毛囊隆突區(qū)培養(yǎng)細(xì)胞的生物學(xué)性質(zhì)仍了解甚少，妨礙了人們對毛囊干細(xì)胞在毛囊生長、損傷修復(fù)以及腫瘤發(fā)生等方面研究的深入。本實(shí)驗(yàn)中采用改良消化法得到完整的毛囊，根據(jù)隆突區(qū)形態(tài)特征，在體外顯微切割分離毛囊隆突區(qū)，成功地進(jìn)行細(xì)胞原代和傳代培養(yǎng)，并在培養(yǎng)狀態(tài)下觀察細(xì)胞的生長特性及表達(dá)特征，同時(shí)通過檢測組織中表面標(biāo)記物的表達(dá)進(jìn)一步證實(shí)毛囊隆突區(qū)是毛囊干細(xì)胞的棲息地。Β連環(huán)蛋白ΒCATENIN是一種胞內(nèi)糖蛋白，具有雙重功能。一是作為附著連接的組成部分，與鈣粘蛋白結(jié)合形成復(fù)合體參與細(xì)胞間連接；二是作為信號(hào)分子，是WNT信號(hào)途徑的重要環(huán)節(jié)，在胚胎發(fā)育和腫瘤發(fā)生中起主要作用。WNT蛋白與相應(yīng)受體結(jié)合將啟動(dòng)該信號(hào)途徑的活性，引起ΒCATENIN在細(xì)胞內(nèi)的堆積，ΒCATENIN可以通過核孔進(jìn)入到細(xì)胞核中，作為轉(zhuǎn)錄激活因子激活下游靶基因。在絕大多數(shù)正常組織中，ΒCATENIN僅見于細(xì)胞連接中，有研究顯示ΒCATENIN在一些惡性腫瘤如結(jié)腸癌、卵巢癌、食管癌、肝癌等腫瘤中表達(dá)增強(qiáng)。最近研究發(fā)現(xiàn)ΒCATENIN對于毛囊的發(fā)生發(fā)育是不可缺少的因素。在胚胎期，毛囊發(fā)育過程中如果ΒCATENIN基因發(fā)生突變，毛囊的正常形成途徑受阻。同時(shí)ΒCATENIN參與皮膚中干細(xì)胞分化途徑的選擇，為了更加清楚地了解ΒCATENIN與毛囊之間的關(guān)系，本實(shí)驗(yàn)從四個(gè)方面應(yīng)用IHC和RTPCR的方法分別檢測ΒCATENIN在毛囊周期、發(fā)育、損傷修復(fù)以及細(xì)胞分化中表達(dá)的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示ΒCATENIN對毛囊的生長具有重要的促進(jìn)作用，可能是毛囊生長和周期維持重要的調(diào)節(jié)因子。主要結(jié)果如下1毛囊隆突區(qū)細(xì)胞生物學(xué)性質(zhì)體外成功地分離、培養(yǎng)出毛囊隆突區(qū)細(xì)胞，為下一步實(shí)驗(yàn)打下基礎(chǔ)。DMEMF12補(bǔ)充培養(yǎng)基較為適宜細(xì)胞生長，在此培養(yǎng)條件下，細(xì)胞可傳至六代，并保持較強(qiáng)的增殖能力；培養(yǎng)在56天時(shí)細(xì)胞數(shù)量達(dá)峰值，且能維持較長的生長期。培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)均一，呈鋪路石狀，可見有絲分裂相，核漿比大，表現(xiàn)出原始細(xì)胞形態(tài)特征。細(xì)胞周期結(jié)果顯示體外培養(yǎng)的毛囊隆突區(qū)細(xì)胞迅速進(jìn)入增殖狀態(tài)，而全毛囊細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)細(xì)胞從毛囊隆突區(qū)長出，提示在整個(gè)毛囊中最具增殖潛能的細(xì)胞聚集于隆突區(qū)。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示體外培養(yǎng)的隆突區(qū)細(xì)胞強(qiáng)表達(dá)Β1INTEGRIN和K19，而在體實(shí)驗(yàn)亦表明毛囊隆突區(qū)同樣表達(dá)Β1INTEGRIN和K19，而K10呈陰性，這說明原代培養(yǎng)毛囊隆突區(qū)細(xì)胞中含有毛囊干細(xì)胞。2ΒCATENIN在毛囊中的表達(dá)及作用在測定毛囊周期的基礎(chǔ)上，分別檢測毛囊周期不同階段中ΒCATENIN表達(dá)的變化。結(jié)果顯示大鼠毛囊周期大約為28D，其中118D為生長期，1922D為退化期，2328D為靜止期。ΒCATENIN在生長期毛囊中呈強(qiáng)表達(dá)，而在退化期和靜止期表達(dá)微弱。通過研究ΒCATENIN在毛囊發(fā)育過程中的作用發(fā)現(xiàn)，ΒCATENIN蛋白的表達(dá)與毛囊發(fā)育的不同階段具有相關(guān)性，特別是陽性細(xì)胞集中于成熟毛囊外根鞘內(nèi)側(cè)，提示ΒCATENIN可能參與毛囊細(xì)胞的分化與成熟。建立大鼠毛囊損傷的動(dòng)物模型，應(yīng)用免疫組化和RTPCR檢測毛囊損傷前后ΒCATENIN表達(dá)的變化規(guī)律。結(jié)果顯示損傷后毛囊外根鞘中強(qiáng)表達(dá)ΒCATENIN，在損傷24H后達(dá)到峰值，隨后逐漸下降，到72H時(shí)恢復(fù)正常水平。以上結(jié)果提示ΒCATENIN參與毛囊周期維持、毛囊發(fā)育以及毛囊損傷修復(fù)的過程，可能是毛囊生理活動(dòng)重要的調(diào)節(jié)途徑之一。3ΒCATENIN在毛囊隆突區(qū)細(xì)胞生長、分化中的作用成功誘導(dǎo)原代培養(yǎng)的毛囊隆突區(qū)細(xì)胞向皮脂腺分化，進(jìn)一步證實(shí)培養(yǎng)的細(xì)胞為具有多向分化潛能的干細(xì)胞。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測毛囊隆突區(qū)細(xì)胞ΒCATENIN和COX2表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二者均與毛囊隆突區(qū)細(xì)胞增殖有關(guān)，COX2可能是ΒCATENIN作用途徑的核內(nèi)靶基因。本實(shí)驗(yàn)初步探討了ΒCATENIN促增殖的作用機(jī)理，認(rèn)為胞內(nèi)堆積的ΒCATENIN進(jìn)入核內(nèi)后，通過激活COX2活性發(fā)揮作用。此外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示ΒCATENIN在誘導(dǎo)后細(xì)胞中表達(dá)明顯降低，說明其可能參與毛囊干細(xì)胞分化途徑的選擇。本實(shí)驗(yàn)首先建立了毛囊隆突區(qū)細(xì)胞分離、培養(yǎng)的方法，結(jié)合隆突區(qū)細(xì)胞增殖能力、形態(tài)學(xué)特征、標(biāo)記物表達(dá)以及分化潛能，認(rèn)為原代培養(yǎng)毛囊隆突區(qū)細(xì)胞含有毛囊干細(xì)胞，同時(shí)探討了ΒCATENIN在毛囊生長、發(fā)育和周期維持中的重要作用，旨在為毛發(fā)生長調(diào)節(jié)、皮膚組織工程、細(xì)胞治療提供一定的理論基礎(chǔ)。

簡介：分類號(hào)R735密級公開單位代碼10422學(xué)號(hào)201120503博士學(xué)位論文論文題目整合素AVP6與癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的關(guān)系及惡性腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為研究THERELATIONSHIPOFINTGRINQV136ANDCANCERASSOCIATEDFIBROBLASTSWITHBIOLOGICALBEHAVIORINMALIGNANTTUMOR學(xué)院名稱醫(yī)堂院專業(yè)名稱處科堂普垣處型】指導(dǎo)教師盆克塞教授合作導(dǎo)師巳上QLPALLLLCHIAQ2015年5月10日山東大學(xué)博士學(xué)位論文目錄中文摘要1英文摘要5符號(hào)說明9綜J鲞11第一部分前言18材料與方法19結(jié)果24討念26結(jié)論28附圖表29參考文獻(xiàn)40第二部分前。言43材料與方法44結(jié)果47討侖49結(jié)論5L附圖表52參考文獻(xiàn)59致謝63攻讀學(xué)位期問發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄64學(xué)位論文評閱及答辯情況表65英文論文166英文論文277英文論文390英文論文4110