簡介：點擊查看更多大鼠膀胱kit陽性間質(zhì)細胞在逼尿肌自發(fā)性收縮發(fā)生機制中作用的相關研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的探討紅霉素防治人工關節(jié)松動的可能性。方法采集30例人體外周血，分離單核細胞，分組培養(yǎng)。每例標本分成6組。A組僅單核細胞；B組單核細胞超高分子聚乙烯微粒，為微粒組；C組單核細胞超高分子聚乙烯微粒帕米磷酸鈉阿可達10ΜGML；D組單核細胞超高分子聚乙烯微粒紅霉素5ΜGML；E組單核細胞超高分子聚乙烯微粒紅霉素10ΜGML；F組；單核細胞超高分子聚乙烯微粒紅霉素25ΜGML。培養(yǎng)48H后，放免法測定細胞上清中腫瘤壞死因子TNF含量。結果B組明顯高于A組P＜001；C組明顯低于B組P＜001；D、E、F組分別明顯低于B組P＜001；D、E、F組分別與C組之間的差異無統(tǒng)計學意義P＞005；F組明顯低于D組P＜005。結論紅霉素能有效地抑制由于聚乙烯微粒刺激單核細胞而分泌的TNF的量。紅霉素的效果與帕米磷酸鈉相似，能防治人工關節(jié)置換術后由微粒誘導的炎癥性因子引發(fā)的骨溶解，它有希望成為將來防治人工關節(jié)無菌性松動的一種很有潛力的藥物。

簡介：目的腰椎終板骨軟骨炎是近幾年來基于MRI檢查所見而認識的一種新的椎間盤退行性病變。目前，國外已有文獻報告，而國內(nèi)涉及此方面的文獻還很少，尤其缺乏大系列的研究報告。本研究的目的是通過大系列腰椎終板骨軟骨炎MRI表現(xiàn)、臨床和病理的對照分析，初步確定在國人腰椎椎間盤退變中終板骨軟骨炎的發(fā)生率，并通過與病理的對照研究，分析MRI表現(xiàn)的病理基礎，探討MRI表現(xiàn)、分類及其臨床意義。材料和方法分析我院連續(xù)的1926例行腰椎MRI檢查的病例，從中篩選出具有腰椎間盤退變表現(xiàn)的病例1681例，選擇初診時MRI表現(xiàn)有終板骨軟骨炎的432例進行分析，其中經(jīng)手術病理證實者8例，其余病例MRI表現(xiàn)符合終板骨軟骨炎的診斷標準，并經(jīng)隨訪觀察進一步證實。所有病例均使用腰椎表面線圈，常規(guī)使用矢狀面SET1WI、FSET2WI序列和橫斷面T2WI序列進行掃描。少數(shù)病例行脂肪抑制和T1WI增強掃描。統(tǒng)計具有終板骨軟骨炎改變的病例數(shù)及累及的椎間盤個數(shù)，分析終板骨軟骨炎的類型、分期及相關的MRI表現(xiàn)和病理基礎，對終板骨軟骨炎的MRI表現(xiàn)及其與下腰痛的發(fā)生率的關系進行統(tǒng)計學分析。結果在432例有終板骨軟骨炎的初診病例中，341例共430個椎間盤有終板骨軟骨炎伴椎間盤后和或前突出和或椎小關節(jié)炎、韌帶肥厚等表現(xiàn)；91例共109個椎間盤只有終板骨軟骨炎表現(xiàn)包括各型病變。終板骨軟骨炎按MRI表現(xiàn)分為骨髓型、椎間盤型、中心性髓核突出型即許莫氏結節(jié)和混合型。骨髓型進一步分為活動期即MODICL型，MRI表現(xiàn)為T1WI上低信號，T2WI上高信號；穩(wěn)定期即MODIC2型，MRI表現(xiàn)為T1WI、T2WI上均呈高信號；痊愈期即MODIC3型，MRI表現(xiàn)為T1WI、T2WI上均呈低信號。椎間盤型表現(xiàn)為T1WI增強掃描沿椎間盤邊緣出現(xiàn)的橫行線狀或帶狀高信號，或T2WI上在嚴重退變的椎間盤內(nèi)的線樣或帶狀高信號區(qū)。中心性髓核突出型表現(xiàn)為髓核組織通過破裂或缺損的終板軟骨疝入骨內(nèi)形成的結節(jié)狀信號影，急性期結節(jié)周圍可見與骨髓型中MODICL型相同的異常信號，即T1WI上為低信號，T2WI上呈高信號。在91例初診時單純終板骨軟骨炎的病例中，60例只有骨髓型病變；13例只有中心性髓核突出；3例只有椎間盤型病變；15例為混合型病變。單純終板骨軟骨炎組均未行手術治療，而采取保守治療的方法，其中43例MODICL型病例中有37例共40個椎間盤按要求經(jīng)13年間隔后隨訪復查，25個椎間盤完全轉變?yōu)镸ODIC2型，10個椎間盤有部分轉變?yōu)镸ODIC2型，5個椎間盤仍為MODICL型表現(xiàn)，有25例在轉變過程中出現(xiàn)不同程度的椎間盤突出。在17例MODIC2型病例中11例復查顯示均保持相對穩(wěn)定，其中9例出現(xiàn)椎間盤突出。在伴有椎間盤突出的341例病例中，有8例經(jīng)手術證實，其中MODICL型5例，MODIC2型3例。在初診時432例終板骨軟骨炎病例中，325例存在下腰痛癥狀，占752％，其中椎間盤型及絕大多數(shù)MODICL型病例均有下腰痛癥狀。結論腰椎終板骨軟骨炎是椎間盤退變的一種表現(xiàn)，是造成局部下腰痛的原因之一。MRI是最佳檢查手段，可以比較明確地反映不同類型和不同時期的病變，有助于對病情的詳盡了解。在臨床工作中注意腰椎終板骨軟骨炎的MRI表現(xiàn)及其臨床意義，將為下腰痛疾病的及時診治提供有益的幫助。

簡介：該實驗首次在計算機上建立一個下頜骨牽張成骨的三維有限元模型分析不同加載條件下下頜骨體部牽張成骨的應力分布特點與位移趨勢為深入研究牽張成骨奠定基礎并為臨床提供一定的參考依據(jù)該研究內(nèi)容包括1、用CT掃描技術與計算機軟件AUTOCAD、PATRAN、NASTRAN相結合建立模擬骨皮質(zhì)切開的下頜骨三維有限元總體模型2、在建立的下頜骨三維有限元模型上模擬下頜骨牽張成骨術分別進行下頜骨體部單、雙側頦部、頦部與雙側下頜骨體部同時加載研究兩種加載方向與下頜骨體下緣平行和與上頜牙合平面平行對下頜骨應力分布與位移趨勢的影響結論1有限元法是研究下頜骨牽張成骨生物力學的有效手段2VONMISES應力集中在加載部位雙側加載、與上頜牙合平面平行的加載應力更大同時延長與加寬下頜骨頦部應力明顯增大3下頜骨體部DO時單側加載頦部、下頜角部向?qū)绕倍嚯p側加載時矢狀向位移趨勢大牽張方向與下頜骨體下緣平行可能造成開牙合、頦部偏斜等并發(fā)癥4頦部與下頜骨體部同時DO兩種方向的加載均可能造成開牙合

簡介：第一軍醫(yī)大學碩士學位論文假肥大型肌營養(yǎng)不良癥基因缺失連接片段的克隆和應用姓名鐘敏申請學位級別碩士專業(yè)神經(jīng)病學指導教師陸兵勛潘速躍20060515摘要為了更多了解DYSTROPHIN基因缺失連接片段序列特點，我們的研究從克隆2例DMD／BMD病例的缺失連接片段出發(fā)，在實驗技術上在國內(nèi)首次采用PCR步移法對內(nèi)含子上的斷裂點進行定位，然后直接以PCR法擴增缺失連接片段。通過采用分次PCR步移法，初步探討在DYSTROPHIN基因大內(nèi)含子上準確定位斷裂點的策略；通過對2例缺失連接片段的克隆和測序，探討2例缺失連接片段斷裂點局部的分子結構特點；隨后我們對這2例缺失連接片段和以往國內(nèi)外文獻公開報道的55例有效缺失連接片段的序列資料進行綜合分析，探討重復序列、基質(zhì)附著區(qū)MATRIXATTACHMENTREGIONS，MARS、TITAAA序列以及基因缺失后修復方式等因素在DYSTROPHIN基因缺失中的作用，以深入闡述DYSTROPHIN基因缺失的機制。同時基于目前DMD，BMD的攜帶者檢測和產(chǎn)前診斷技術尚不成熟，國內(nèi)外均未常規(guī)開展這方面的工作的現(xiàn)狀，我們在進一步完成1個BMD家系中6例患者／或攜帶者的基因缺失連接片段的克隆和測序分析后，對本項研究在攜帶者檢測和產(chǎn)前診斷上的應用價值進行了初步探討。材料和方法1定位DYSTROPHIN基因缺失斷裂點的策略選擇2例臨床證實的男性DMD／BMD患者例1為DMD散發(fā)病例，例2為一BMD家系先證者，常規(guī)蛋白酶K和苯酚法抽提制備其外周血基因組DNA。通過188對外顯予引物PCR反應檢測證實例1患者為DYSTROPHIN基因第45～54外顯子缺失，例2患者為第3～5外顯子缺失。2例5’端斷裂點分別位于DYSTROPHIN基因龐大的第44和第2內(nèi)含子，在以上2個大內(nèi)含子上先各設計5對引物將內(nèi)含子序列人為地分成長度大致均等的6個待查區(qū)域，經(jīng)第一次PCR反應檢測確認斷裂點所在區(qū)域后繼續(xù)在該區(qū)域每3KB序列設計1對引物。2例3’端斷裂點分別位于第54和第5內(nèi)含子，引物設計為直接每3KB序列設計1對引物。PCR步移法檢測中若相鄰2對內(nèi)含子引物1對擴增為正常陽性結果而另1對擴增為陰性結果，即可判斷內(nèi)含子上斷裂點的近似位置。2DYSTROPHIN基因缺失連接片段的克隆和測序在對2例DYSTROPHIN基因缺失斷裂點準確定位的基礎上，分別在靠近例1患者第44和第54內(nèi)含子斷裂點處和例2患者第2和第5內(nèi)含子斷裂點處各設計1對配對引物，以直接對2例缺失連接片段進行長片段PCR擴增，擴增成功的PCRⅡ

簡介：骨質(zhì)疏松癥已經(jīng)成為世界上一個重要的健康問題。低骨密度BONEMINERALDENSITY，BMD是骨質(zhì)疏松性骨折的主要危險因子，與骨質(zhì)疏松癥發(fā)病風險的相關性大，所以它成為了骨質(zhì)疏松癥研究和診斷的重要替代表型。然而，骨密度不是骨質(zhì)疏松性骨折的唯一決定因素，骨結構特征如大小，形狀，以及三維結構也對骨的機械強度有重要影響。近年來發(fā)展了一些方法，可以利用雙能X射線吸收儀DXA測量的骨密度和骨大小值推算得出一些骨的幾何學和機械學性質(zhì)例如，骨直徑W、截面系數(shù)Z、截面面積CSA、皮質(zhì)厚度CT、骨內(nèi)徑ED和曲率BR，然而對骨幾何學參數(shù)的遺傳研究還較少。本研究的目的有兩個一方面，利用單因素方差遺傳分析在很大的白種人家系中估計股骨頸幾何學參數(shù)的遺傳率，并通過雙變量方差分析法估計它與身體組成體重、瘦體重之間的遺傳ΡG、環(huán)境ΡE和表型相關ΡP。另一方面，利用數(shù)量性狀傳遞不平衡檢測QTDT法在402個中國核心家系中檢測雌激素受體ΑERΑ基因的XBAⅠ多態(tài)以及骨鈣素BGP基因的HINDⅢ多態(tài)與股骨頸幾何學參數(shù)的關聯(lián)和連鎖。分析表明骨幾何學參數(shù)有顯著的遺傳決定P＜0001，遺傳率在050到060之間。顯著的家庭效應表明一個家庭中的成員的W、CSA、CT、Z和BR受到了一些共同的家庭環(huán)境因子的作用，不過其效應大小和遺傳率相比還是很小。除了W和體重之間的ΡE外，骨幾何學參數(shù)與體重、瘦體重之間的ΡE、ΡG和ΡP都顯著相關。值得注意的是，與體重相比，瘦體重與骨幾何學參數(shù)之間均表現(xiàn)出較大的遺傳相關和環(huán)境相關。另外，從相關系數(shù)的大小上看，身體組成和骨幾何學參數(shù)之間的ΡG一般都要比ΡE強除了BR和身體組成之間。這些數(shù)據(jù)說明股骨頸的幾何學參數(shù)受到很強的遺傳決定。再者，還表明骨幾何學參數(shù)和體重、瘦體重之間有一些共享的遺傳和環(huán)境因子。我們還采用骨幾何學參數(shù)作為研究表型對中國核心家庭中的ERΑ基因的XBAⅠ多態(tài)以及BGP基因的HINDⅢ多態(tài)進行關聯(lián)和連鎖研究。其中ERΑ基因多態(tài)在以往的研究中與肌肉力量也有影響肌肉力量可由瘦體重粗略表示、。我們發(fā)現(xiàn)該位點多態(tài)性與ED之間檢測到了微弱顯著的家庭內(nèi)關聯(lián)。同時在XBAⅠ多態(tài)與CSA、ED、CT、BR之間，以及HINDⅢ多態(tài)與BR之間檢測到了顯著的連鎖結果。

簡介：點擊查看更多新鮮同種異體骨軟骨移植并生長因子修復軟骨缺損的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的建立252家漢族男性峰值骨量核心家系庫，探討維生素D受體（VDR）基因和雌激素受體1（ESR1）基因多態(tài)性與上海市男性峰值骨量的關系。方法收集上海市漢族252個包括父母親和至少1個健康兒子（年齡2040歲）的核心家庭，獲得所有人員一般資料，使用雙能X線吸收儀（DXA）測定腰椎和左股骨近端各部位的骨密度（BONEMINERALDENSITY，BMD）、骨大?。˙ONEAREASIZE，BAS），以及髖部軸長（HIPAXISLENGTH，HAL）等。提取所有人員基因組DNA。通過PCRRFLP技術，檢測VDR基因APAI、FOKI多態(tài)性和ESR1基因的PVUII和XBAI多態(tài)性。結果共收集到核心家系252家，父親、母親、兒子各252人，共756例，其中兒子均取長子。每例均詳細記錄相關臨床資料，測定BMD、BAS及HAL，抽取外周血并提取DNA，編好號的DNA置80℃冰箱保存。父母親及兒子VDR、ESR1等位基因頻率分布均符合HARDYWEINBERG定律。252個兒子APAI基因型分布頻率依次為AA、AA、AA，分別占544％、385％和71％。FOKI基因型分布頻率依次為FF、FF、FF，分別占524％、254％和222％。PVUII基因型分布頻率依次為PP、PP、PP，分別占460％、413％和127％。XBAI基因型分布頻率依次為XX、XX、XX，分別占710％、254％和36％。所有兒子年齡為2040歲，平均為（299±59）歲。APAI各基因型間年齡、身高、體重均無差別（P005），經(jīng)協(xié)方差方法比較經(jīng)年齡、身高、體重調(diào)整后的BMD、BAS及HAL值，各基因型間各部位的BMD值均無統(tǒng)計學差異。AA基因型組大轉子、全髖的BAS及HAL值高于AA和AA基因型（P005）；FOKI基因型的各組間年齡、身高、體重均無差別，經(jīng)協(xié)方差方法比較，各基因型間各部位的BMD值、股骨頸、大轉子部位的BAS值均無統(tǒng)計學差異。FF基因型組的腰椎和全髖BAS值及HAL高于FF及FF基因型（P005）。PVUII基因型的各組間年齡、身高、體重均無差別，經(jīng)協(xié)方差方法比較各基因型間股骨各部位BMD、BAS，以及HAL值均無統(tǒng)計學差異。PP基因型腰椎BMD值高于PP和PP基因型（P005）；XBAI基因型與各部位BMD、BAS及HAL值均無相關性。結論VDR基因APAI、FOKI和ESR1基因PVUII多態(tài)性與上海市男性峰值骨量變異相關；XBAI多態(tài)性可能不是男性峰值骨量變異的數(shù)量性狀位點（QUANTITATIVETRAITLOCUS，QTL）。

簡介：四川大學碩士學位論文關于正畸領域骨重建方程的初步研究及應用姓名宋幫勇申請學位級別碩士專業(yè)固體力學指導教師樊瑜波20050510應用于對三維牙及牙周組織研究中，通過自編瑕序，建立了主應力與牙移動位移豹關系模鋈，菸與穩(wěn)藤實黢魄較，該縫栗與貉藤鷹察其彎瀚檬夔趨勢，登磐移動的最終位移及周平均值與YINJIN和MALTHA的統(tǒng)計結果相比較有較好的一致性。關鍵蠲；夤重建鴦瑟囂歪嗡蓬程摹元叟甄II

簡介：臨床上各種原因引起的骨缺損很常見，且治療困難。目前采用的自體骨和異體骨移植均有各自的不足之處自體骨移植的骨量受到限制，另外也增加了病人的痛苦；而異體骨移植可能出現(xiàn)免疫排斥反應和其它的并發(fā)癥。1987年美國科學基金會提出組織工程概念，國內(nèi)外組織工程研究取得令人注目的階段性研究成果，應用組織工程骨修復骨缺損將成為可能，將組織工程骨用于骨缺損的修復是臨床治療的趨勢所在。傳統(tǒng)外用中藥生肌膏對于感染性開放骨折療效顯著，將其有效成分優(yōu)化制備成生肌液。本實驗旨在研究體內(nèi)環(huán)境中生肌液對骨髓基質(zhì)細胞MARROWSTROMALCELLS，MSCS增殖和分化功能的影響，為骨組織工程研究活性骨誘導因子提供新思路。目的1建立和完善MSCS分離和培養(yǎng)技術，最大限度的獲得MSCS。2將中西醫(yī)結合治療感染性開放骨折的特色中藥應用于骨缺損的修復研究，觀察生肌液在體內(nèi)對MSCS增殖和分化的影響，從而進一步加深我們對中藥作用的認識，探索中藥在骨組織工程領域的新應用。方法1抽取大耳白兔脛骨骨髓，經(jīng)密度梯度離心貼壁篩選，獲取MSCS并培養(yǎng)、擴增。2以纖維蛋白膠和脫基質(zhì)骨DEMATRIXBONE，DMB為MSCS載體，構建組織工程骨，分別為空白組DMBMSCS復合物；實驗組包括骨形態(tài)發(fā)生蛋白BONEMPHGEICPROTEIN，BMP組含BMPDMBMSCS復合物、生肌液組生肌液DMBMSCS復合物、BMP生肌液組生肌液含BMPDMBMSCS復合物。3制作標準的兔橈骨10MM完全缺損模型，植入已構建的組織工程骨，制作修復模型。4術后觀察動物的一般情況，分別于4、8、12、16周攝X線片動態(tài)觀察新生骨痂生長；4、8、12、16周取材進行組織學染色觀察骨缺損修復過程中的細胞學變化；4周進行BRDU免疫組化染色觀察標記的MSCS在骨修復中的作用；8周進行Ⅰ型膠原免疫組化染色觀察骨缺損修復中Ⅰ型膠原的分泌活性、VONKOSSA染色以及四環(huán)素熒光標記觀察新骨形成狀態(tài)；16周取材進行標本大體觀察和骨密度檢測以綜合評價骨缺損修復情況。結果1采用密度梯度離心貼壁篩選的方法，可獲得大量骨髓中的MSCS。MSCS于原代培養(yǎng)1314天，80％融合，進行傳代培養(yǎng)。傳代后MSCS為成纖維細胞樣形態(tài)結構，呈指紋狀生長，具有強大的增殖能力。2動態(tài)放射學和組織學檢查結果提示生肌液BMP組編織骨生成量最多，成熟也最早；BMP組骨痂生成量和成熟度都強于生肌液組；空白組最差，骨痂生長緩慢，量少且幼稚。3組織學觀察發(fā)現(xiàn)骨缺損修復兼有膜內(nèi)成骨和軟骨內(nèi)成骨的方式，且新生編織骨貼支架材料生長；含生肌液組新生血管較其它組更豐富。4術后4周標本BRDU標記可見支架材料中細胞胞核呈深棕色，顯示植入的MSCS參與了骨缺損修復。5術后8周標本四環(huán)素熒光標記觀察四環(huán)素熒光帶的亮度及帶間寬度BMP生肌液組BMP組生肌液組空白組。6術后8周標本Ⅰ型膠原免疫組化觀察顯示大量骨基質(zhì)生成，且各實驗組明顯多于空白組。7術后8周標本VONKOSSA染色顯示骨折斷端和支架材料旁新生編織骨。結論1采用密度梯度離心貼壁篩選法，分離大耳白兔骨髓中的單個核細胞層，可獲得具有強大增殖能力、高純度的MSCS；2在體內(nèi)環(huán)境，中藥生肌液具有促進MSCS增殖和分化為成骨細胞的能力。生肌液與BMP復合能極大增強BMP的功能，更加有效的促進成骨；3DMB具有天然的多孔網(wǎng)狀結構，生物相容性和生物降解性好，可以作為骨組織工程的支架材料；與生肌液復合，復合物有良好的骨傳導和誘導成骨能力；4使用纖維蛋白膠將MSCS加載于DMB支架上可保證支架內(nèi)細胞存活；5目前，還不能明確生肌液中哪種些有效成分在對MSCS增殖活性和成骨分化起作用，需要我們進一步研究生肌液中單味藥和組方藥的各自有效成分及誘導MSCS增殖和分化成骨的機理。

簡介：目的研究新型甲殼素纖維增強骨組織工程支架材料對血管內(nèi)皮細胞生物活性的影響，以初步評價該材料的生物相容性，為臨床篩選更好的骨移植替代材料及血管化組織工程骨的構建提供實驗依據(jù)。方法一、血管內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與鑒定無菌條件下取健康產(chǎn)婦分娩的新鮮臍帶，24H內(nèi)采用血管內(nèi)灌注消化液法原代培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞，Ⅷ因子免疫組化染色鑒定血管內(nèi)皮細胞。二、觀察復合支架材料上內(nèi)皮細胞的粘附生長情況體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞并與復合支架材料聯(lián)合培養(yǎng)。六塊支架材料分別置于24孔培養(yǎng)板的六個孔中，傳至第3代的人臍靜脈內(nèi)皮細胞按510CELLSCM分別接種于支架上，37±05℃、5﹪CO，飽和濕度培養(yǎng)箱中放置4H后加培養(yǎng)基浸沒材料，于培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育。相差顯微鏡下逐日觀察細胞與支架材料的附著情況，并分別于第3D、5D各取出三塊復合細胞的支架材料，掃描電子顯微鏡觀察細胞在支架材料上的生長情況。三、MTT比色試驗測定復合支架材料對內(nèi)皮細胞增殖的影響支架材料環(huán)氧乙烷消毒，浸提介質(zhì)為DMEM培養(yǎng)基含20﹪FBS，PH72～74，按照IS0109931標準要求，試樣表面積浸提介質(zhì)3CMML，將材料浸入培養(yǎng)基中，置于37±05℃，5％CO，飽和濕度培養(yǎng)箱中7D，吸出浸提液，無菌封存于4℃冰箱中備用。試驗分三組，分別為浸提液組、陰性對照組和陽性對照組。將內(nèi)皮細胞以1～510CELLSML、分三組接種于96孔培養(yǎng)板中，每組設復孔6個，每孔體積200ΜL，置于37±05℃，5％CO，飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24H后棄去原培養(yǎng)液，三組分別加入浸提液、DMEM培養(yǎng)基含20％FBS、PH72～74、07％質(zhì)量分數(shù)聚丙烯酰胺PVC，分別于1、2、3、4、5D進行MTT比色試驗，選擇540NM波長，測定各孔光吸收值，以時間為橫軸，光吸收值為縱軸繪制細胞生長曲線。采用SPSS100統(tǒng)計軟件處理，各時間點浸提液組及陽性對照組分別與陰性對照組采用配對T檢驗比較，P值005為有統(tǒng)計學意義。結論血管內(nèi)皮細胞在支架材料上粘附、增殖良好；支架材料不影響其生物活性，具有良好的生物相容性，是一種很有前景的骨組織工程支架材料；所建立的體外血管內(nèi)皮細胞甲殼素纖維增強骨組織工程支架三維模型為血管化組織工程骨的構建提供了實驗基礎，可以用于添加生長因子或其它重要添加物的骨組織工程的構建。

簡介：目的觀測子宮腺肌病異位子宮內(nèi)膜組織COX2、VEGF和微血管密度MVD表達及其臨床意義。方法34例經(jīng)病理證實為子宮腺肌病標本增殖期18例，分泌期16例為觀測組，以30例非子宮腺肌病子宮標本為正常對照組。采用免疫組化法檢測子宮腺肌病原位和異位子宮內(nèi)膜、子宮平滑肌層中COX2、VEGF蛋白和微血管密度MVD。采用原位雜交法檢測COX2和VEGFMRNA表達。采用RTPCR檢測COX2MRNA和VEGFMRNA的表達。應用SPSS100軟件進行方差分析和均數(shù)T檢驗。結果子宮腺肌病增殖期和分泌期原位和異位內(nèi)膜COX2蛋白表達高于對照組；異位內(nèi)膜高于原位內(nèi)膜P＜001；增殖期和分泌期表達率無明顯差異P＞005；異位內(nèi)膜病灶周圍肌層表達率為7647％，而正常子宮肌層不存在表達。子宮腺肌病增殖期和分泌期原位和異位內(nèi)膜VEGF蛋白表達率高于對照組；異位內(nèi)膜高于原位內(nèi)膜P＜005；增殖期和分泌期異位內(nèi)膜表達率無顯著差異P＞005。原位內(nèi)膜分泌期表達高于增殖期P＜005。異位內(nèi)膜病灶周圍肌層表達高于對照組P＜005。COX2和VEGF蛋白表達存在相關性R0787和R0562P＜001。子宮腺肌病異位和原位內(nèi)膜MVD高于對照組，異位內(nèi)膜高于原位內(nèi)膜P＜001。COX2、VEGF和MVD表達呈正相關。原位雜交和RTPC檢測表明，COX2MRNA表達定位于腺體細胞、病灶肌層和血管內(nèi)皮細胞內(nèi)。異位內(nèi)膜和病灶肌層高于原位內(nèi)膜P＜001；異位內(nèi)膜和異位內(nèi)膜病灶肌層表達間無顯著差異P＞005。正常子宮肌層和內(nèi)膜不存在COX2MRNA表達，而子宮腺肌病異位內(nèi)膜VEGFMRNA，VEGF165和VEGF121呈現(xiàn)高表達。結論子宮腺肌病異位內(nèi)膜病灶存在COX2、COX2MRNA、VEGF、VEGFMRNA和MVD的高表達。子宮腺肌病異位內(nèi)膜病灶COX2、VEGF和MVD表達呈正相關性。

簡介：點擊查看更多磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信號轉導通路在急性壞死性胰腺炎中性粒細胞活化中的作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：組織工程技術是20世紀80年代后發(fā)展起來的新技術，它為牙周組織再生提供了全新的治療方法。其基本原理是將體外培養(yǎng)的活細胞種植于細胞外基質(zhì)上，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)再將這種細胞基質(zhì)復合體置入機體病損部位，形成新的具有原來形態(tài)、功能的相應組織和器官從而達到修復創(chuàng)傷和重建的目的，所以構建、優(yōu)化細胞基質(zhì)復合體是運用組織工程技術獲得牙周再生的先決條件。目的觀察富血小板膠PLATELETRICHPLASMAGEL，PRPGEL對人牙周膜成纖維細胞增殖的影響；體外合成牙周膜成纖維細胞富血小板膠PDUFSPRPGEL并檢測這種基質(zhì)能否表達成骨活性，從而探討PDLFSPRPGEL作為促牙周組織再生的基質(zhì)材料可行性，并對基質(zhì)在不同時間表達的成骨活性進行定量指標對比，優(yōu)化選擇，從而為PDLFSPRPGEL基質(zhì)在促牙周組織再生的臨床應用中確定基質(zhì)最佳植入時間提供實驗依據(jù)。方法采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人牙周膜成纖維細胞PDLS并鑒定，取第5～6代細胞用于實驗。通過二次離心法制備富血小板血漿PLATELETRICHPLASMA，PRP以四唑鹽比色法345DIMETHYLTHIAZ012Y125DIPHENYLTETRAZOLIUMBROE，MTT法檢測富血小板膠對人牙周膜成纖維細胞增殖的影響。制備PDLFSPRPGEL實驗組和PRPGEL陰性對照組，在不同時間4、6、8、10、11、14、15、16、18、23、28D用堿性磷酸酶ALP試劑盒檢測基質(zhì)內(nèi)ALP含量；用免疫組化法ENVISION二步法檢測基質(zhì)中骨涎蛋白BONESIALOPROTEIN，BSP、骨橋蛋白OSTEOPONTIN，OPN含量。鈣化結節(jié)的觀察將第5～6代PDLFS用PRPGEL緩釋液不傳代培養(yǎng)，倒置相差顯微鏡下見細胞結節(jié)狀聚集時行VONKOSSA染色并記錄結節(jié)出現(xiàn)時間。結果1PRPGEL對人牙周膜成纖維細胞增殖的影響PRPGEL實驗組較對照組對人牙周膜成纖維細胞增殖作用更明顯，從第三天起有統(tǒng)計學差異。2基質(zhì)內(nèi)ALP含量的檢測實驗組6D時ALP含量明顯增高，8～10D達到峰值平臺期，11D后迅速下降，6～10D這三組與其他實驗組比較ALP含量的有統(tǒng)計學差異。3基質(zhì)內(nèi)骨涎蛋白和骨橋蛋白含量的檢測實驗組骨橋蛋白在15～16D時表達明顯，與其他時間的實驗組比較有統(tǒng)計學差異；骨涎蛋白在4～6D和15～18D時表達明顯，與其他時間的實驗組比較有統(tǒng)計學差異。4PRPGEL緩釋液培養(yǎng)的PDLFS約在15D出現(xiàn)鈣化結節(jié)。結論通過本實驗結果我們認為體外合成的PDLFSPRPGEL作為工程化基質(zhì)應用于牙周組織再生中具有理論上的可行性；并提示在臨床牙周組織再生術中宜選用在體外培養(yǎng)8～15D的PDLFSPRPGEL進行植入為佳。

簡介：一、復合抗腫瘤活性珊瑚羥基磷灰石人工骨的制備及緩釋實驗為研究抗腫瘤藥物順鉑CISDIAMMINEDICHLOPLATINUM，CDDP載入后其在CHA的分布，復合順鉑后CHA作為緩釋載體對CDDP的體內(nèi)外緩釋作用。方法L、將CHA浸入06MGML的順鉑磷酸鹽溶液中快速振蕩30S后負壓靜置24H，取出CHA利用低溫冷凍干燥凍干。分別將05G、02G、01G順鉑用1ML二甲基亞砜DIMETHYLSULPHOXIDE，DMSO配成溶液后，再加入上述人工骨后再低溫凍干。掃描電鏡分析復合人工骨斷面的孔隙及順鉑的分布情況，用能譜分析了解人工骨內(nèi)部所復合順鉑的含量。2、以復合20％順鉑的CCHA為實驗對象，將CCHA樣本避光浸入10MMOL的磷酸鹽緩沖液PHOSPHATEBUFFER，PB中37℃、30轉分浸泡振蕩，每2天更換10ML磷酸鹽緩沖液。3、利用3％戊巴比妥鈉30MGKG將SD大鼠麻醉后，經(jīng)手術將100MGCCHA顆粒經(jīng)手術植入SD大鼠背部肌袋中，術后定期取材時行大體觀察、X線攝片檢查，觀察動物重要臟器的一般情況，材料及周圍組織有無感染等不良反應，取動物靜脈血和復合人工骨植入處周圍LCM及1CM2CM范圍的肌肉組織勻漿后檢測順鉑含量。4、利用高效液相色譜法檢測體外緩釋試驗浸提液、體內(nèi)緩釋試驗肌肉組織及血液中順鉑的濃度。結果顯示L、順鉑在CHA孔隙內(nèi)分布均勻，CHA的孔隙結構未改變；2、利用高效液相色譜法HIGHPERFMANCELIQUIDCHROMATOGRAPHY，HPLC檢測體外浸提液、動物靜脈血及組織勻漿液中的順鉑濃度結果示順鉑和內(nèi)標液的保留時間分別為46MIN和75MIN，兩者分離效果良好。3、體外緩釋液中前2周順鉑出現(xiàn)快速釋放，體外浸提液中順鉑的濃度極高2周時濃度為75301±6489；至12周其順鉑濃度仍達到13454±988ΜGML。4、動物植入CCHA后局部較長時間內(nèi)可維持較高順鉑濃度，隨著時間的延長及與人工骨的距離增加局部的順鉑濃度呈下降趨勢，距離人工骨1CM2CM內(nèi)的的順鉑濃度低于人工骨周圍1CMM組織內(nèi)順鉑濃度，除7D時兩組間比較無顯著性差異外P006，其余時間兩者間比較存在顯著性差異。5、CCHA植入后動物血液中順鉑的濃度穩(wěn)定在較低水平，平均不超過17ΜGML，遠低于體內(nèi)緩釋試驗中局部組織中的順鉑濃度。6、動物各重要臟器大體及組織切片示CCHA植入后對動物機體無不良影響。小結CCHA具有良好的緩釋效能，可在局部維持一定時間高藥物濃度。小結CCHA具有良好的緩釋效能，可在局部維持一定時間高藥物濃度。二、復合人工骨體外抗腫瘤實驗研究CCHA作為抗腫瘤人工骨的體外抑制腫瘤細胞作用，為進一步行體內(nèi)抗腫瘤實驗研究及臨床應用提供理論依據(jù)。為了使CCHA更加適合臨床相關骨腫瘤的應用，我們首先從臨床取得明確診斷為骨巨細胞瘤及乳腺腺癌骨轉移標本進行原代細胞培養(yǎng)，成功獲取骨巨細胞瘤及骨轉移乳腺腺癌原代培養(yǎng)瘤細胞，通過對原代培養(yǎng)瘤細胞進行光鏡、電鏡下形態(tài)學觀察并與國內(nèi)外文獻報道結果相比較，原代培養(yǎng)細胞離心后行常規(guī)病理切片HE染色、免疫組織細胞化學檢測及接種于裸鼠建立腫瘤模型后取得的瘤結節(jié)組織切片HE染色與臨床組織標本的病理切片進行對比，對瘤細胞進行鑒定，確定實驗所培養(yǎng)的細胞為所需的瘤細胞。再明確成功獲取上述兩種腫瘤原代培養(yǎng)瘤細胞基礎上選用四肢常見骨惡性腫瘤一骨肉瘤細胞株U2OS，脊柱轉移瘤中其他最常見的腫瘤人高轉移性肺腺癌細胞株SPCA1、前列腺癌骨轉移細胞株PC3、人高轉移性結腸腺癌細胞株LOVO細胞株為實驗對象。將第一部分實驗所得的CCHA及CHA體外緩釋液凍干粉再用與其凍干前相同體積的培養(yǎng)基溶解后作用于培養(yǎng)的瘤細胞，其中CHA的體外緩釋液為對照組，光鏡下觀察浸提液對瘤細胞的作用情況，并利用四唑鹽MTT比色法檢測其對上述細胞的抑制率。結果發(fā)現(xiàn)，對照CHA組浸提液對瘤細胞生長沒有明顯的抑制作用，再次說明自制的CHA具有良好的生物相容性；實驗CCHA組8周內(nèi)不同時間的浸提液對上述6種瘤細胞均有不同程度的抑制作用，加入浸提液后各系瘤細胞生長均受到不同程度的抑制，細胞皺縮，部分細胞崩解死亡；MTT結果顯示乳腺腺癌原代培養(yǎng)細胞、肺腺癌SPCA1、骨肉瘤細胞株U2OS及結腸腺癌LOVO細胞株對CCHA浸提液較敏感，8周內(nèi)浸提液的抑制率均超過50％。小結CCHA在體外對多系骨相關腫瘤細胞具有良好的抑制作用。三、復合人工骨體內(nèi)抗腫瘤實驗進一步研究在體內(nèi)狀態(tài)下CCHA人工骨的抗腫瘤活性。利用骨巨細胞瘤原代培養(yǎng)細胞、骨肉瘤細胞株U2OS、肺癌細胞株SPCA1、前列腺癌細胞株PC3、結腸腺癌LOVO細胞株及乳腺癌原代培養(yǎng)瘤細胞接種于裸鼠建立腫瘤模型，結果示骨巨細胞瘤成瘤率較低且瘤結節(jié)生長較慢，本實驗中共20個接種點僅成瘤4個瘤結節(jié)。乳腺癌腫瘤模型未建立成功，其余腫瘤成瘤率較高，其中肺癌及結腸腺癌瘤結節(jié)生長較快。在瘤結節(jié)成瘤后10天，經(jīng)手術將實驗組CCHA及對照組CHA人工骨顆粒嵌入裸鼠腫瘤模型的瘤結節(jié)內(nèi)，予相同條件下培養(yǎng)，觀察動物在人工骨植入前后的一般活動、局部傷口、瘤結節(jié)大小等情況，術后10天處死取材，再觀察裸鼠心臟、肝臟、腎臟及肺等重要臟器的顏色、大小及行組織切片常規(guī)HE染色了解人工骨植入是否對裸鼠機體存在損傷作用，是否存在遠處轉移等情況。比較對照組及實驗組人工骨植入前后瘤結節(jié)體積大小的變化，切取、制作并比較兩組已植入人工骨瘤結節(jié)的脫鈣HE染色組織切片以了解CCHA體內(nèi)對腫瘤的抑制情況。結果示骨巨細胞瘤模型中兩處瘤結節(jié)植入CCHA后，瘤結節(jié)出現(xiàn)明顯縮小并逐漸出現(xiàn)包括局部小塊皮膚在內(nèi)的干性壞死，對照組植入CHA后瘤結節(jié)無明顯變化。肺癌腫瘤模型在裸鼠接種瘤細胞后47天于頸背部或前臂腋窩處及后背部出現(xiàn)腫塊，并迅速膨大。成瘤后10天行人工骨植入前腫瘤結節(jié)平均體積為73567±11611MM。人工骨植入后可見對照CHA組裸鼠腫瘤呈現(xiàn)惡性持續(xù)增長。實驗組CCTA植入后腫瘤出現(xiàn)明顯生長抑制，腫瘤體積減小，部分瘤結節(jié)及局部皮肢出現(xiàn)干性壞死，瘤結節(jié)取材時平均體積為13213±5110MM，與對照CHA植入組取材時平均體積為456433±32003MM相比有顯著性差異P0001。小結CCHA在體內(nèi)對多系骨相關腫瘤細胞具有良好的抑制作用。四、復合人工骨體內(nèi)成骨實驗由于所有化療藥物對機體的作用存有兩面性，CCHA所復合的藥物量較大，植入體內(nèi)后局部藥物濃度較高，對可能殘留的腫瘤細胞有殺傷作用的同時對正常的周圍組織也存在一定的殺傷作用，其植入骨缺損后可能影響骨誘導、骨傳導及骨生長的作用，從而無法與周圍骨缺損形成骨愈合。為了進一步研究自制CHA在體內(nèi)的降解和新骨替代行為以及CCHA植入體內(nèi)后能否起到骨支架、骨傳導及骨生長的作用，與骨缺損之間形成骨愈合，為將來CCHA的進一步改進及用于修復骨缺損的研究及臨床應用提供理論依據(jù)。實驗組及對照組，經(jīng)手術分別將CCHA及CHA人工骨植入兔股骨兩干骺端的骨缺損模型中，術后定期行大體觀察、兩股骨X線片及取材行組織切片，觀察材料降解和被新骨替代的速度、骨與材料界面的結合情況，材料內(nèi)部新骨生長情況。結果示術后動物一般情況良好，傷口愈合良好，無不良并發(fā)癥；CHA植入后比CCHA較快與周圍骨形成組織及骨橋連接，植入4周后X線片影像示CHA邊緣開始逐漸不清，組織切片顯示周圍早期有疏松結締組織長入材料孔隙內(nèi)，緊貼材料孔壁富含成骨細胞且逐漸有類骨質(zhì)及骨細胞形成，材料周邊及中央?yún)^(qū)多處出現(xiàn)新骨質(zhì)生長并逐漸連接融合替代材料形成骨小梁，且與動物骨形成骨愈合。CCHA植入后早期約8周內(nèi)局部以抑制組織細胞生長為主，6周至12周逐漸有組織結構向材料孔隙內(nèi)生長且逐漸出現(xiàn)成骨細胞、骨基質(zhì)及骨細胞，新生骨逐漸生長替代融合，于26周左右與周圍骨形成骨愈合，28周左右材料周邊及中央?yún)^(qū)的成骨情況基本跟對照組CHA植入一致，說明CCHA植入早期雖對骨愈合有一定的抑制作用，但最終仍可自行與周圍骨缺損達到骨愈合。小結CCHA在體內(nèi)與CHA一樣具有成骨作用，能使骨缺損愈合。