簡介：點(diǎn)擊查看更多前軟骨干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞及修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文下頜骨外板修復(fù)面斜裂的基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用探討姓名劉偉申請學(xué)位級別碩士專業(yè)整形外科學(xué)指導(dǎo)教師歸來20050301亟煎塞生造童工鯉盈處亟壁復(fù)畫魁銎鰒基趟受塞墨蝤鏖廛旦堡過THEEXPERIMENTALANDCLINICALSTUDYOFREPAIRINGOFOBLIQUEFACIALCLEFTWITHMANDIBULAROUTERCORTEXABSTRACTOBLIQUEFACIALCLEFTISASERIOUSDISEASEANDHARDTOBETREATEDTHECAUSEOFTHEPATHOLOGICCONDITIONSREMAINSOBSCUREAUTOGENOUSBONEGRAFTISANIMPORTANTMETHODOFTHERECONSTRUCTIONHOWEVER，ITISLIMITEDINTHECLINICALAPPLICATIONFORSOMEDISADVANTAGES，JUSTASTHEDONORSITEMORBIDITY，BONERESORPTIONERETHISRESEARCHWASAIMINGTOEXPLOREANEWHARVESTREGIONOFBONEGRAFTS，MANDIBULAROUTERCORTEX，BEINGUSEDTEPAIROBLIQUEFACIALCLEFTINTHEANIMALEXPERIMENTALPART，ANIMALMODELSWEREESTABLISHEDBYREMOVINGTHEOUTERCORTEXOFMANDIBULARBODYINMINITYPEPIGSOF3MONTHESOLDWEOBSERVEDTHEEFFECTOFSURGERYTOTHEGROWTHOFMANDIBULARBONEAFTER24WEEKSINTHECLINICALAPPLICATIONPART，6PATIENTSOFOBLIQUEFACIALCLEFTWERERECONSTRUCTEDUSINGMANDIBULAROUTERCORTEXTHERESULTSHADDEMONSTRATEDTHATTHEGRAFTEDBONEHENEDWELL，WITHNOOBVIOUSBONERESORPTIONANDDONORSITEMORBIDITYHOWEVER，INTHEANIMALEXPERIMENT，WEFOUNDCORTEXSPLITTINGTENDEDTORESULTINLATERALDEVIATIONOCCLUSIONPROBABILITYOF50％，WHICHNEEDTOBERESEARCHEDCONSEQUENTLYCONCLUSIONAUTOGENOUSMANDIBULAROUTERCORTEXISANIDEALDONORSITEOFBONEGRAFTSBECAUSEITISDENSECORTEXBONEWITHLITTLEBONERESORPTIONFORTHEMORE，ITISHARVESTEDCOMPLETELYTHROUGHINTRAORALAPPROACHWITHLESSMORBIDITYATDONORSITE2

簡介：上海第二醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文骨髓基質(zhì)細(xì)胞復(fù)合B磷酸三鈣修復(fù)下頜骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究姓名何悅申請學(xué)位級別博士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（口腔頜面外科）指導(dǎo)教師張志愿20050401L海帶，I延科人學(xué)博H升究生學(xué)位論文骨髓基質(zhì)細(xì)胞復(fù)合磷酸三鈣修復(fù)下頜骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要目的下頜骨的缺損和缺失可以采用骨移植和人工材料植入的方法加以修復(fù)和重建。人工材料和異體骨移植容易引起免疫排異反應(yīng)和存在可能傳播傳染性疾病的的缺點(diǎn)。目前臨床上最受肯定的自體骨移植又是一種以創(chuàng)傷修復(fù)創(chuàng)傷的模式。如何改進(jìn)甚至超越這種模式值得深入思考和研究。近年來，隨著組織工程學(xué)的迅速發(fā)展和多學(xué)科合作使得利用組織工程技術(shù)構(gòu)建口腔頜面部骨組織，既而對下頜骨缺損進(jìn)行修復(fù)提供了實(shí)踐的基礎(chǔ)和指導(dǎo)。本研究旨在應(yīng)用組織工程的方法和技術(shù)，通過體外復(fù)合犬骨髓基質(zhì)細(xì)胞和三維磷酸三鈣支架的方法構(gòu)建組織工程化的個體化缺損區(qū)下頜骨，并對下頜骨節(jié)段性缺損進(jìn)行修復(fù)，探討此方法的可能性。材料和方法1犬骨’髓基質(zhì)細(xì)胞BMSCS的體外誘導(dǎo)、分化、增值和相關(guān)檢測犬麻醉成功后，將16號骨穿針刺于股骨粗隆處，抽取骨髓3ML，加入含有地塞米松101M，SIGMA、B一磷酸甘油鈉10RRN，SIGMA和抗壞血酸50PM，SIGMA的DMEM成骨條件培養(yǎng)液，37。C，5％C0，100％飽和濕度條件下的孵育箱培養(yǎng)。細(xì)胞生長匯合時，025％胰蛋白酶O02％EDTA消化，進(jìn)行傳代，繼續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增傳至二、三代細(xì)胞。將培養(yǎng)的第二或第三代細(xì)胞進(jìn)行①透射電鏡掃描，③流式細(xì)胞儀檢測，④MTT法生氏曲線檢測，④堿性磷酸酶染色，⑤YONKOSSA染色，⑥免疫組化OCN、ON、BSP檢測。2細(xì)胞材料復(fù)合體的體外構(gòu)建和超微結(jié)構(gòu)觀察收集第三代培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞，制備細(xì)胞懸液，以125107／ML的濃度均勻按種于3MM2顆粒狀B一磷酸三鈣支架BTCP，37。C5％C0，95％0，100％飽和濕度條件，DMEM骨條件培養(yǎng)液中培養(yǎng)L周。于培養(yǎng)第4小時、第2天、第5天取細(xì)胞材料復(fù)合體進(jìn)行掃描電鏡檢查。3細(xì)胞材料復(fù)合體裸鼠體內(nèi)成骨實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)分三組每組3個裸鼠，每個裸鼠皮

簡介：點(diǎn)擊查看更多骨痹湯治療膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎臨床研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：本研究以37例年齡在1822歲之間的高低角骨面型成人為研究對象，其中高角骨面型17例，低角骨面型20例，拍攝后前位X線片，使用WINCEPH70頭影測量分析與圖象數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)，選取了38個測量項(xiàng)目進(jìn)行頭影測量分析。采用單因素方差分析和PEARSON相關(guān)分析等方法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果顯示，成人高低角骨面型面部特征區(qū)別明顯，高角骨面型面型窄長，低角骨面型面型短寬；面部的比例關(guān)系與線距的絕對值相比，能夠更好地反映高低角骨面型的面部特征；高低角骨面型顱面基骨之間、基骨與牙弓之間以及上下牙弓之間的寬度都存在一定的相關(guān)性，受多種因素的影響，相關(guān)程度各不相同。

簡介：目的探索一種高效提取骨膠原的方法，并制備骨膠原凝膠用于種子細(xì)胞雙相接種法構(gòu)建組織工程骨，觀察構(gòu)建的效果；試制循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置用于組織工程骨培養(yǎng)，以提高其傳質(zhì)效率；應(yīng)用循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置培養(yǎng)雙相接種法構(gòu)建的組織工程骨，觀察雙相接種技術(shù)與灌注培養(yǎng)在組織工程骨構(gòu)建中相結(jié)合的效果。方法1、設(shè)計增強(qiáng)酶解法從豬皮質(zhì)骨中提取骨膠原，通過大體觀察、計算提取率、氨基酸成分分析、分子量測定等指標(biāo)對骨膠原進(jìn)行鑒定，應(yīng)用倒置顯微鏡和組織學(xué)方法觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在骨膠原凝膠中的生長、分布情況；2、試制出循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置，然后對其流量、恒溫效果、無菌性能和氣體交換效果進(jìn)行檢測，鑒定其作為組織培養(yǎng)平臺的能力；3、應(yīng)用自制骨膠原凝膠液和已建立的種子細(xì)胞雙相接種法構(gòu)建組織工程骨，分成二組實(shí)驗(yàn)組應(yīng)用循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置進(jìn)行灌注培養(yǎng)，對照組置于CO2孵箱中進(jìn)行平皿培養(yǎng)，計算種子細(xì)胞上架率，大體、倒置顯微鏡及掃描電鏡分別觀察兩組細(xì)胞形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)的不同；HE染色比較觀察兩組在組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞在基質(zhì)中分布情況方面的區(qū)別；測定堿性磷酸酶ALP活性、DNA含量和鈣含量及骨鈣素免疫組織化學(xué)染色，比較兩種培養(yǎng)方法對MSCS增殖、分化的影響。結(jié)果1、增強(qiáng)酶降解法提取骨膠原可達(dá)到9404％的提取率。骨膠原氨基酸組成中甘氨酸占356％，脯氨酸及羥脯氨酸占275％，最大光吸收波長為232NM。蛋白電泳結(jié)果顯示，膠原凝膠液以單體Α1和Α2成分為主，含有一定量的二聚體和低聚體，其成分最低分子量為79000。電泳后產(chǎn)生清晰的5個條帶，分別代表二種單體、二種二聚體和低聚體；2、骨膠原凝膠液粘度高，可在PH近中性環(huán)境中約10MIN固化，MSCS在骨膠原凝膠中呈三維均相分布，約2小時開始伸展，膠原凝膠發(fā)生收縮；3、試制了一種循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置，在設(shè)定溫度下，箱體內(nèi)晝夜溫差可控制在1℃以內(nèi)。連續(xù)觀察、檢測在循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置中循環(huán)三周的培養(yǎng)液無細(xì)菌生長。培養(yǎng)液循環(huán)流量可控制在0875MLMIN根據(jù)理論推算，以DMEMF12為培養(yǎng)介質(zhì)，以脫鈣骨基質(zhì)為支架材料，可產(chǎn)生0472DYNECM2的流體剪切應(yīng)力。組織工程骨在循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置中連續(xù)培養(yǎng)72小時，其PH值變化范圍為7166952，幅度明顯小于平皿培養(yǎng)法。O2分壓及CO2分壓變化均在正常范圍內(nèi)；4、雙相接種法構(gòu)建組織工程骨可獲得9975％的細(xì)胞上架率，MSCS在接種后2小時開始伸展，膠原凝膠收縮出現(xiàn)裂隙，8小時細(xì)胞伸展良好；5、兩組ALP活性在3天后開始增加，7天后實(shí)驗(yàn)組顯著高于對照組P＜005，DNA含量在培養(yǎng)5天后兩組出現(xiàn)顯著性差異P＜005，10天后兩組DNA含量增加均趨緩；兩組鈣含量在培養(yǎng)10天后呈增加趨勢，14天后實(shí)驗(yàn)組顯著高于對照組；6、HE染色顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞密度高，在組織中分布均勻，而對照組細(xì)胞主要集中在基質(zhì)裂隙周壁，基質(zhì)中細(xì)胞較少；骨鈣素免疫組織化學(xué)染色提示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞骨鈣素表達(dá)陽性率高。掃描電鏡見對照組組織塊表面孔隙大小不一致，形態(tài)不規(guī)則，而實(shí)驗(yàn)組組織塊表面基質(zhì)孔隙呈圓形，大小較一致。結(jié)論1、增強(qiáng)酶解法是一種高效提取骨膠原的方法，所提取的骨膠原純度高，固化特性好。2、骨膠原凝膠用于體外構(gòu)建組織工程骨可顯著提高種子細(xì)胞的上架率，并有利于種子細(xì)胞早期定植和早期恢復(fù)其生理功能；3、固化的骨膠原凝膠具有一定的機(jī)械強(qiáng)度，但不足以對抗細(xì)胞收縮，因此難以單獨(dú)用于構(gòu)建組織工程骨；4、循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置具有優(yōu)良的恒溫和無菌性能，在組織工程骨培養(yǎng)過程中能維持PH值、O2分壓和CO2分壓的相對恒定，是組織工程骨體外培養(yǎng)的良好平臺。5、循環(huán)灌注式三維組織培養(yǎng)裝置可為組織工程骨的培養(yǎng)提供高效的傳質(zhì)作用和適宜的剪切應(yīng)力，有利于種子細(xì)胞的增殖、分化和組織工程骨的體外成熟；6、雙相接種法體外構(gòu)建組織工程骨結(jié)合灌注式三維組織培養(yǎng)裝置培養(yǎng)是體外構(gòu)建和培養(yǎng)組織工程骨的較為理想的技術(shù)路線。

簡介：健骨膏是用于治療慢性關(guān)節(jié)炎的軟膏療效顯著但健骨膏原制備方法與現(xiàn)代中藥的要求有很大差距因此有必要進(jìn)行新制備方法研究希望在保留原有療效的基礎(chǔ)上對制備工藝的每一個環(huán)節(jié)進(jìn)行定量控制確定最佳制備方法；加入透皮滲透促進(jìn)劑提高有效成分透皮效率進(jìn)行質(zhì)量考察擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；以達(dá)到現(xiàn)代中藥的要求以阿魏酸、血竭素、梔子苷為健骨膏新制備方法研究時的定量化指標(biāo)應(yīng)用HPLC測定含量；設(shè)計正交試驗(yàn)以提取溶劑濃度、提取次數(shù)、溶劑用量、提取時間為考察因素對提取工藝方案進(jìn)行優(yōu)選；利用體外透皮滲透實(shí)驗(yàn)考察一些常用透皮促滲劑對有效成分透過大鼠腹皮的促進(jìn)作用從而選擇適當(dāng)?shù)耐钙B透促進(jìn)劑；選擇合適的藥物基質(zhì)利用熔和法制備健骨膏新的健骨膏制備方法為處方藥材用3倍藥材量的75﹪乙醇回流2次每次2H提取脂溶性成分；再對藥渣加10倍量水在80℃加熱煎煮2次每次1H提取水溶性成分濃縮干燥得總提取物不同促滲劑的促滲效果依次為氮酮丙二醇松節(jié)油油酸薄荷醇氮酮不同濃度的促滲效果依次為2﹪1﹪05﹪3﹪故選擇2﹪氮酮為健骨膏的透皮滲透促進(jìn)劑軟膏制備稱取處理過的基質(zhì)水浴加熱至90℃降溫依次加入總提取物、月桂氮唑酮和其他藥材粉料；調(diào)節(jié)PH值充分?jǐn)噭蛑晾淠纬傻稚?xì)膩軟膏分裝即得質(zhì)量考察物理性狀、刺激性、溶出度等均符合規(guī)定阿魏酸含量1100ΜGG、血竭素含量150ΜGG、梔子苷含量25MGG室溫有效期T148年按新制備方法生產(chǎn)的健骨膏有效成分含量明顯高于原制法透皮吸收效果明顯優(yōu)于原制法處方合理制備方法可行有明確規(guī)范的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)符合現(xiàn)代中藥的要求有利于慢性關(guān)節(jié)炎的治療

簡介：四川大學(xué)博士學(xué)位論文下頜骨單側(cè)前上牽引力對大鼠顳下頜關(guān)節(jié)影響的初步研究姓名許躍申請學(xué)位級別博士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師陳揚(yáng)熙20060501查蘭蘭里些墾堂墮堡主蘭堡壘苧縮略詞MSPOPGRANKLRNKTMJTMDTRAPOBOCICPICOOACB紐LAPESMCISHEDTA縮略詞表英文全稱MUSCULOSKELETALLYSTABLEPOSITIONOSTEOPROTEHGERINRECEPTORACTIVATOROFNFⅣBLIGANDRECEPTORACTIVATOROFNF￡BTEMPOROMANDIBULARJOINTTEMPOROMANDIBULARJOINTDISORDERSTARTRATERESISTANTACIDPHOSPHATUSEOSTEOBLASTOSTEOCLASTINTERCUSPALPOSITIONINTERCUSPIDEDOCCLUSIONOSTEOARTHRITISCOREBINDINGFACTORAJ3AMINOPROPYERIETHOXYSILAMEIMMUNOHISTOEHEMISTRYINSITUHYBRIDIZATIONETHYLENEDIAMMINETETRAACETICACID中文名稱肌骨穩(wěn)定位骨保護(hù)素NFB受體激活劑配體NFB受體激活劑顳下頜關(guān)節(jié)顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病抗酒石酸酸性磷酸酶成骨細(xì)胞破骨細(xì)胞牙尖交錯位牙尖交錯；猙骨關(guān)節(jié)病核心結(jié)合因子AL氨丙基三乙氧基硅烷免疫組織化學(xué)原位雜交乙二胺四乙酸

簡介：目的觀察A型肉毒毒素BOTULINUMTOXINA，BTXA對大鼠幽門、胃竇高體平滑肌條自發(fā)性收縮和電場刺激ELECTRICALFIELDSTIMULATION，EFS、P物質(zhì)SUBSTANCEP，SP引發(fā)的幽門、胃竇離體平滑肌收縮的影響，并探討其機(jī)制。方法選取健康的SPRAGUEDAWLEY大鼠，體重200～250G，雌雄不拘。實(shí)驗(yàn)前禁食24H，飲水不限。實(shí)驗(yàn)時擊頭部致昏后取幽門、胃竇平滑肌各一條，置于37℃KREBS液的恒溫平滑肌槽中，肌槽內(nèi)持續(xù)供給95﹪O和5﹪CO的混合氣體，肌條的一端固定在肌槽底部的玻璃彎鉤上，另一端固定在張力傳感器上，肌條被懸于兩個銀電極之間，肌條長軸與電極長軸平行，電極與電刺激器相連。肌條在1G的前負(fù)荷下溫育，隨機(jī)分為對照組CONTROL，N12、電場刺激組ELECTRICALFIELDSTIMULATION，EFS，N12、EFSBTXA組N12、BTXA組N12、SP組N12、SPBTXA組N12、SPNK受體拮抗劑DARG，DPHE，DTRP，LEUSUBSTANCEP組N12。在自發(fā)性收縮的條件下，分別加入BTXA10UM1、SP1ΜML、NK受體拮抗劑1ΜML及EFS頻率16HZ，電壓35V，波寬05MS持續(xù)時間60S，BIOLAP420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄胃肌條收縮情況。結(jié)果1EFS引發(fā)幽門平滑肌張力增強(qiáng)P005，SP引發(fā)胃竇平滑肌張力增強(qiáng)P005，BTXA抑制SP引發(fā)的胃竇平滑肌張力和振幅P受體拮抗劑抑制SP引發(fā)的幽門平滑肌張力P005，NK受體拮抗劑抑制SP引發(fā)的胃竇平滑肌張力P受體拮抗劑抑制SP引發(fā)的幽門、胃竇平滑肌收縮，提示SP可能通過和平滑肌上受體結(jié)合發(fā)揮作用，使肌肉收縮增強(qiáng)，而NKL受體拮抗劑則可能通過拮抗SP與受體結(jié)合使肌肉收縮減弱。BTXA可能通過抑制突觸囊泡與突觸前膜融合、胞吐，從而抑制遞質(zhì)釋放發(fā)揮作用，也可能對SP與突觸后膜上相應(yīng)受體結(jié)合具有一定的影響作用，導(dǎo)致對SP引發(fā)的幽門、胃竇離體平滑肌收縮的抑制。

簡介：佳木斯大學(xué)碩士學(xué)位論文ALN與RLX對骨質(zhì)疏松大鼠牙槽骨吸收的影響姓名宋嘉鑫申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師劉繼光20070514壁杰斃壑岜垂笪絲越一、中文摘要目的建立實(shí)驗(yàn)性骨質(zhì)疏松大鼠牙周炎模型，觀察用藥后大鼠血生化指標(biāo)、骨密度的變化和組織病理學(xué)改變。評價阿侖膦酸鈉與雷洛昔芬對牙槽骨吸收的防治作用。方法以48只3月齡SD雌性大鼠為樣本，隨機(jī)分為6組。采用去勢的方法建立大鼠骨質(zhì)疏松模型，使用02MM正畸結(jié)扎鋼絲環(huán)繞第一磨牙牙頸部結(jié)扎，建立大鼠牙周炎的動物模型，建模手術(shù)后第5日開始灌胃給藥，每天一次，治療3個月眼動脈采血，血凝后立即分離出血清，以便檢測血清鈣、磷和堿性磷酸酶。乙醚過量麻醉處死大鼠，取大鼠左側(cè)股骨和左上頜牙體牙周組織標(biāo)本，，置于10％甲醛液中固定，進(jìn)行骨密度測定和組織形態(tài)學(xué)觀察。應(yīng)用SPSSL15統(tǒng)計學(xué)軟件作均值方差分析，并作組間的獨(dú)立T檢驗(yàn)。結(jié)果1、體重各組大鼠在實(shí)驗(yàn)前后體重均增加，單純?nèi)莘怯盟幗M體重增加量大于雷洛昔芬組和空白對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。表明阿侖瞵酸鈉治療組較雷洛昔芬組有更強(qiáng)的降低去勢組血鈣的作用。3、各組間血清P3含量的差異無統(tǒng)計學(xué)意義PO05。4、血清堿性磷酸酶含量去勢非用藥組和單純結(jié)扎非用藥組血清堿性磷酸酶含量均顯著高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義PO01；去勢結(jié)扎非用藥組血清堿性磷酸酶含量高于用藥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義IN侖瞵酸鈉組，P001；雷洛昔芬組，P005。表明阿侖瞵酸鈉治療組較雷洛昔芬組有更強(qiáng)的降低去勢組堿性磷酸酶的作用。5、大鼠股骨和上頜骨密度去勢非用藥組低于空白對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義PO05；阿侖瞵酸鈉組顯著高于去勢結(jié)扎非用藥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P001。表明阿侖瞵酸鈉治療組較雷洛昔芬組有更強(qiáng)的提高去勢組骨密度的作用6、組織形態(tài)學(xué)用藥組牙齦輕度炎癥，牙槽嵴頂未見明顯吸收；對照組牙齦乳突炎癥明顯，上皮釘突增生，炎細(xì)胞浸潤，牙槽嵴頂明顯吸收。結(jié)論L、去勢大鼠骨質(zhì)疏松癥出現(xiàn)同時伴有頜骨疏松。2、骨質(zhì)疏松癥大鼠牙周病，其牙周炎癥狀及牙槽骨吸收程度明顯重于非骨質(zhì)疏松癥大鼠牙周病。3、ALN和ⅪⅨ對去勢大鼠骨質(zhì)疏松均有療效，目AIN有更好的防治骨質(zhì)疏松癥和牙槽骨吸收的作用。關(guān)鍵詞阿侖膦酸鈉；雷洛昔芬；骨密度；骨質(zhì)疏松；牙槽骨質(zhì)丟失

簡介：背景與目的心臟瓣膜病是我國的常見病之一，嚴(yán)重危害著國人健康，瓣膜置換術(shù)是外科治療嚴(yán)重心臟瓣膜疾病的主要方法。目前臨床上應(yīng)用的人工心臟瓣膜主要有機(jī)械瓣和生物瓣兩種。機(jī)械瓣置換后須終生服用抗凝藥，因抗凝不當(dāng)而造成的出血、血栓形成及栓塞是影響患者長期存活及生活質(zhì)量的重要因素生物瓣置換后，盡管無需長期抗凝治療，但由于瓣膜缺乏生命活力，術(shù)后易發(fā)生生物瓣退行性變、鈣化而導(dǎo)致瓣膜衰敗，部分患者需二次手術(shù)置換。此外，這些人工心臟瓣膜均不具有生長能力，尤其不適用于兒童或年輕心臟瓣膜病患者。隨著組織工程學(xué)科的發(fā)展，組織工程心臟瓣膜TISSUEENGINEERINGHEARTVALVETEHV被認(rèn)為是根本解決心臟瓣膜置換術(shù)后并發(fā)癥的革命性產(chǎn)品，自提出以來一直被人們寄予厚望。TEHV是按照組織工程學(xué)方法，將體外培養(yǎng)、擴(kuò)增的自體活細(xì)胞種植在可降解材料構(gòu)建的瓣膜支架上，使自體活細(xì)胞在支架上生長并產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)，逐漸形成具有活性的瓣膜組織，培養(yǎng)出一種無免疫源性、無需抗凝、耐久性強(qiáng)的新一代生物心臟瓣膜。同時，由于它具有生物活性，可在體內(nèi)生長、發(fā)育，并可抵御感染入侵，尤其適用于兒童或感染性心內(nèi)膜炎患者。自1995年SHINOKA首先在體外培養(yǎng)TEHV并于羊體內(nèi)進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)以來，國內(nèi)外已進(jìn)行了大量的研究，并已在種子細(xì)胞的選擇、瓣膜支架材料的獲取等方面取得一定的進(jìn)展。但是在細(xì)胞種植的方法、條件、培養(yǎng)環(huán)境等方面尚未找到理想的辦法，如何將種子細(xì)胞簡便、牢固地種植于瓣膜支架材料上已成為目前噬待解決的關(guān)鍵問題之一。本實(shí)驗(yàn)就是在總結(jié)了前人細(xì)胞種植時單獨(dú)種植一種細(xì)胞細(xì)胞容易脫落的失敗經(jīng)驗(yàn)上，并依據(jù)正常人體心臟瓣膜結(jié)構(gòu)是由兩層不同細(xì)胞構(gòu)成的客觀事實(shí)，提出了聯(lián)合種植肌成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)建TEHV的設(shè)想。嘗試在瓣膜支架材料上分層依次聯(lián)合種植肌成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，通過光鏡、電鏡及免疫組織化學(xué)染色等方法觀察其生長特點(diǎn)，探索構(gòu)建結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、功能完善的TEHV的最佳細(xì)胞種植方法。材料與方法1、無菌條件下抽取人骨髓5ML，利用密度梯度離心法分離出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMSCS，將細(xì)胞分成兩組一組在DMEMLG培養(yǎng)液中培養(yǎng)、擴(kuò)增；另一組在含有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子VEGF的M199培養(yǎng)液中誘導(dǎo)培養(yǎng)、擴(kuò)增，使其定向分化為內(nèi)皮細(xì)胞ECS。并進(jìn)行BMSCS和ECS的相關(guān)鑒定。2、瓣膜支架材料采用豬主動脈瓣膜，經(jīng)低濃度胰蛋白酶EDTADCA核酸酶的組合方法脫細(xì)胞后縫制在人工瓣環(huán)上建成完整瓣膜支架。并應(yīng)用掃描電鏡觀察脫細(xì)胞效果。3、細(xì)胞種植分3組同時培養(yǎng)做對比研究聯(lián)合種植肌成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組，共培養(yǎng)4周，單獨(dú)種植其中一種細(xì)胞作為對照組，各培養(yǎng)2周。取樣分別行HE染色、免疫組化染色、掃描電鏡觀察等對實(shí)驗(yàn)組和對照組瓣膜進(jìn)行結(jié)構(gòu)及功能鑒定。結(jié)果1、研究證實(shí)，BMSCS的自然分化方向?yàn)榧〕衫w維細(xì)胞，而在加入VEGF等誘導(dǎo)因子的培養(yǎng)液中培養(yǎng)可以定向分化為內(nèi)皮細(xì)胞。2、豬主動脈瓣膜結(jié)構(gòu)與人體瓣膜相似，經(jīng)胰蛋白酶、脫氧膽酸和核酸酶處理后，可發(fā)現(xiàn)瓣膜表面細(xì)胞去除完全，纖維支架結(jié)構(gòu)保存完整。3、實(shí)驗(yàn)組與對照組相比較，瓣膜支架表面有復(fù)層細(xì)胞生長，最外面有單層內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋，細(xì)胞間連接緊密，在流體環(huán)境中培養(yǎng)，細(xì)胞表現(xiàn)出一定的方向性。結(jié)論聯(lián)合種植肌成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)建的TEHV，細(xì)胞數(shù)量多，排列緊密，黏附牢固，無論在結(jié)構(gòu)還是功能上都更接近于人體的瓣膜，更符合臨床的應(yīng)用要求。與單獨(dú)種植一種細(xì)胞相比較，分層依次聯(lián)合種植兩種細(xì)胞是一種先進(jìn)的、有效的細(xì)胞種植方法。

簡介：目的比較闊筋膜張肌肌骨瓣及縫匠肌肌骨瓣治療股骨頭缺血性壞死的臨床療效。方法1996年1月～2004年12月對79例79髖股骨頭缺血性壞死分別采用闊筋膜張肌肌骨瓣41例41髖及縫匠肌肌骨瓣38例38髖治療，并按照HARRIS髖關(guān)節(jié)評分系統(tǒng)進(jìn)行評價。結(jié)果經(jīng)過25～11年隨訪，闊筋膜張肌肌骨瓣組HARRIS評分由4739±735提高至7536±910，P005；縫匠肌肌骨瓣組HARRIS評分由4737±763提高至6737±901，P005。兩治療組間術(shù)后HARRIS評分比較，P005。結(jié)論采用闊筋膜張肌肌骨瓣及縫匠肌肌骨瓣治療青中年人股骨頭缺性壞死FICATⅡA、ⅡB及Ⅲ期均可取得良好效果，采用闊筋膜張肌肌骨瓣治療療效更佳。

簡介：河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文杜興型肌營養(yǎng)不良癥雙側(cè)感覺運(yùn)動區(qū)的靜息態(tài)功能磁共振變化姓名呂士英申請學(xué)位級別碩士專業(yè)影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師崔建嶺20080301中文摘要杜興型肌營養(yǎng)不良癥的雙側(cè)感覺運(yùn)動區(qū)的靜息態(tài)功能磁共振變化摘要目的杜興型肌營養(yǎng)不良癥DUCHENNEMUSCULARDYSTROPHY，DMD是一組X染色體連鎖隱性遺傳病，患病率為活產(chǎn)男嬰的1／3500，是人類第二常見隱性遺傳病。此疾病主要表現(xiàn)為兒童期起病的進(jìn)行性肌無力、肌萎縮，常伴有認(rèn)知障礙等中樞神經(jīng)系統(tǒng)合并癥。DMD是抗肌萎縮基因DYSTROPHINGENE突變的結(jié)果，導(dǎo)致其表達(dá)的抗肌萎縮蛋白異常，抗肌萎縮蛋白在許多組織中有表達(dá)，主要位于骨骼肌肌纖維膜內(nèi)表面，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)大腦皮層的錐狀神經(jīng)元、海馬及小腦的PURKINJE細(xì)胞有表達(dá)。而關(guān)于MDX模型缺乏DYSTROPHIN或DYSTROPHIN處于非功能狀態(tài)的小鼠模型的皮質(zhì)脊髓系統(tǒng)的組織結(jié)構(gòu)研究顯示感覺運(yùn)動皮層神經(jīng)元數(shù)量和密度少于對照組。迄今為止，很少關(guān)于DMD患者的大腦的影像學(xué)研究，先前的DMD患者及MDX模型的頭顱MRI研究肉眼未見明顯大腦結(jié)構(gòu)異常。關(guān)于10例DMD患兒及17例成人對照組的PET研究顯示右側(cè)感覺運(yùn)動皮層葡萄糖代謝減低。經(jīng)顱磁刺激研究顯示，DMD患者左側(cè)運(yùn)動皮層的興奮性減低。與PET相比，功能磁共振FMED對身體無放射性更適用于兒童研究。靜息態(tài)FMRI的低頻振蕩信號能夠反映大腦的自發(fā)活動。靜息態(tài)FMRI不需要任何認(rèn)知任務(wù)在兒童研究中很容易實(shí)現(xiàn)。很多研究發(fā)現(xiàn)低頻振蕩信號在雙側(cè)感覺運(yùn)動區(qū)間存在很高的功能連接，且感覺運(yùn)動區(qū)內(nèi)部的信

簡介：目的肺間質(zhì)纖維化是一種病因未明，發(fā)病機(jī)制不清，缺乏治療手段的致命性肺間質(zhì)疾病，肺間質(zhì)纖維化的病理特征是肺泡上皮細(xì)胞損傷，成纖維細(xì)胞灶的形成以及細(xì)胞外基質(zhì)ECM的過度沉積，最終導(dǎo)致肺組織結(jié)構(gòu)的異常重構(gòu)。近年來的研究發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞灶主要由表達(dá)Α平滑肌肌動蛋白ΑSMA的肌成纖維細(xì)胞構(gòu)成，是造成ECM異常沉積的主要細(xì)胞。同時研究證實(shí)轉(zhuǎn)化生長因子Β1TGFΒ1是關(guān)鍵的致纖維化細(xì)胞因子，可以誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞分化。近年來的研究證實(shí)，他汀類藥物在體外可抑制成纖維細(xì)胞的增殖和膠原的合成，在肺間質(zhì)纖維化的治療中顯示出了令人鼓舞的傾向，但是機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)研究以TGFΒ1誘導(dǎo)肌成纖維細(xì)胞的分化作為切入點(diǎn)，觀察經(jīng)阿托伐他汀干預(yù)后，肌成纖維細(xì)胞的標(biāo)志性產(chǎn)物ΑSMA的改變及TGFΒ1誘導(dǎo)基質(zhì)Ⅰ型膠原表達(dá)等指標(biāo)的變化，進(jìn)一步探索他汀類藥物抑制肺纖維化的機(jī)制。材料與方法氣管內(nèi)注入博萊霉素BLM復(fù)制大鼠肺纖維化模型，作為實(shí)驗(yàn)組，應(yīng)用氣管內(nèi)注入生理鹽水作為對照組，并分離培養(yǎng)肺成纖維細(xì)胞，待細(xì)胞自然純化至第四代時，用阿托伐他汀對其進(jìn)行干預(yù)，實(shí)驗(yàn)組和對照組分別分為空白對照亞組、TGFΒ1誘導(dǎo)亞組和不同劑量阿托伐他汀亞組，用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，MTT計數(shù)法觀察各組細(xì)胞的增殖情況，免疫組織化學(xué)法定性觀察ΑSMA的表達(dá)情況，ELISA法測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中Ⅰ型膠原含量。結(jié)果生理鹽水對照組細(xì)胞形態(tài)規(guī)則，細(xì)胞小且胞漿清晰，細(xì)胞生長比較慢，傳代后生長速度增快。博萊霉素實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞與對照組相比，細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞比較大，且生長速度明顯快于對照組。阿托伐他汀對TGFΒ1誘導(dǎo)的大鼠肺肌成纖維細(xì)胞標(biāo)志性產(chǎn)物ΑSMA具有抑制作用。阿托伐他汀能夠抑制TGFΒ1誘導(dǎo)的大鼠肺肌成纖維細(xì)胞的增殖。阿托伐他汀5ΜMOLL亞組和阿托伐他汀10ΜMOLL亞組的細(xì)胞生長明顯被抑制，細(xì)胞數(shù)降至70％以上，阿托伐他汀01ΜMOLL亞組與阿托伐他汀1ΜMOLL亞組的細(xì)胞生長抑制不明顯，無統(tǒng)計學(xué)意義。阿托伐他汀能抑制TGFΒ1誘導(dǎo)的大鼠肺肌成纖維細(xì)胞分泌的I型膠原。阿托伐他汀5GMOLL亞組和阿托伐他汀10ΜMOLL亞組的細(xì)胞Ⅱ型膠原表達(dá)明顯減少，可達(dá)50％以下，阿托伐他汀01ΜMOLL亞組與阿托伐他汀1ΜMOLL亞組的細(xì)胞表達(dá)Ⅰ型膠原略有下降，但無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論阿托伐他汀能夠抑制TGFΒ1誘導(dǎo)的肌成纖維細(xì)胞的分化，主要表現(xiàn)在細(xì)胞增殖情況以及肌成纖維細(xì)胞的標(biāo)志性產(chǎn)物ΑSMA表達(dá)的改變上，同時阿托伐他汀能夠使TGFΒ1誘導(dǎo)基質(zhì)Ⅰ型膠原的沉積減少。

簡介：背景意義動脈粥樣硬化ATHEROSCLEROSIS，AS的發(fā)生發(fā)展是一種多因素綜合作用導(dǎo)致的慢性血管性疾病，單獨(dú)的一種學(xué)說不能完全解釋AS的病因及發(fā)病過程。炎癥反應(yīng)和凝血系統(tǒng)的激活在動脈粥樣硬化發(fā)病過程中起著重要作用，炎癥可導(dǎo)致凝血系統(tǒng)的激活，而凝血活動又可影響炎癥的反應(yīng)。組織因子TISSUEFACT，TF作為一種天然的凝血系統(tǒng)啟動子，在動脈粥樣硬化的炎癥反應(yīng)和凝血級聯(lián)反應(yīng)中均扮演著重要角色。將TF作為靶點(diǎn)，有可能成為治療AS引起的各種急性心血管性疾病的一個可靠靶點(diǎn)。本研究試圖利用RNA干擾原理，以腺病毒為載體，將針對TF基因的外源性發(fā)夾環(huán)小干擾RNA片斷導(dǎo)入腺病毒載體，通過體外重組技術(shù)構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)TFSHRNA的重組體腺病毒，并觀察這種重組腺病毒感染白介素18INTERLEUKIN18，IL18刺激下，血管平滑肌細(xì)胞中TF產(chǎn)生的變化，以探討RNA技術(shù)在治療血栓性疾病的的應(yīng)用前景，并為研究TF的多種生物學(xué)效應(yīng)建立實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，為將TF作為基因治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為治療動脈粥樣硬化引發(fā)的各種疾病開辟新途徑。本實(shí)驗(yàn)主要分成以下3部分。方法和內(nèi)容第一部分人組織因子干擾載體的構(gòu)建和真核表達(dá)目的1、篩選較高轉(zhuǎn)染效率的轉(zhuǎn)染試劑，并進(jìn)一步優(yōu)化該轉(zhuǎn)染試劑在轉(zhuǎn)染人TF小干擾RNASMALLINTERFERENCERNA，SIRNA時的轉(zhuǎn)染條件。2、構(gòu)建攜帶TF基因的發(fā)夾環(huán)小干擾RNASHTHAIRPINRNA，SHRNA的質(zhì)粒表達(dá)載體，觀察重組質(zhì)粒對TF基因的沉默效果。方法1、分別利用含GFP綠色熒光蛋白的報告質(zhì)粒PEGFPN1和LIPOFECTAMINETM2000與LIPOFECTAMINETMPLUS進(jìn)行轉(zhuǎn)染，熒光顯微鏡下觀察各組細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率；參照文獻(xiàn)和RNA干擾靶序列設(shè)計原則，化學(xué)合成含有熒光的SIRNA，并利用篩選具有較高轉(zhuǎn)染效率的轉(zhuǎn)染試劑，優(yōu)化其轉(zhuǎn)染人TF的SIRNA時的轉(zhuǎn)染條件。2、設(shè)計合成針對TF基因的小發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的RNASHRNA，克隆至含CMV啟動子的穿梭質(zhì)粒表達(dá)載體PSHUTTLECMV10，構(gòu)建重組質(zhì)粒，采用脂質(zhì)體LIPOFECTAMINETM2000轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞株，反轉(zhuǎn)錄半定量聚合酶鏈反應(yīng)法REVERSETRANASEPOLYMERASECHAINREACTION，RTPCR檢測攜帶TFSHRNA質(zhì)粒表達(dá)載體抑制TFMRNA表達(dá)的效果。3、所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差MEANS±SD表示，多個樣本均數(shù)比較采用析因設(shè)計的方差分析，多重比較采用BONFERRONI法。結(jié)果1、LIPOFECTAMINTM2000具有較高的轉(zhuǎn)染效率，經(jīng)過優(yōu)化其轉(zhuǎn)染SIRNA的效率大于90％。2、成功構(gòu)建了攜帶TFSHRNA的質(zhì)粒表達(dá)載體PSHUTTLECMVTFSHRNA，酶切鑒定及測序證實(shí)插入的外源基因序列正確。3、RTPCR方法檢測重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后，HEK293細(xì)胞中TFMRNA的表達(dá)變化。轉(zhuǎn)染對照組TFMRNA值為366±001，在轉(zhuǎn)染含有TFSHRNA重組質(zhì)粒組后24H、48H和72H，TFMRNA表達(dá)水平為211±001、121±005和056±001，與對照組相比，TFMRNA水平顯著降低，結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義F59076697，P0000，提示了TFSHRNA重組質(zhì)粒組能明顯降低TF基因表達(dá)水平。結(jié)論1、經(jīng)過優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，陽離子脂質(zhì)體LIPOFECTAMIM2000可以將化學(xué)合成的SIRNA高效地轉(zhuǎn)染293細(xì)胞。2、成功構(gòu)建攜帶TFSHRNA的質(zhì)粒表達(dá)載體，構(gòu)建的重組質(zhì)?？擅黠@下調(diào)TF基因MRNA的表達(dá)水平，RNA干擾效果明顯。第二部分?jǐn)y帶人組織因子的重組腺病毒載體的制備和構(gòu)建目的構(gòu)建攜帶TFSHRNA的重組腺病毒表達(dá)載體。方法連接線性化腺病毒骨架質(zhì)粒LACZ和帶有CMV啟動子的穿梭載體質(zhì)粒PSHUTTLETFSHRNA，采用磷酸鈣共沉淀法將兩種質(zhì)粒表達(dá)載體共轉(zhuǎn)化HEK293包裝細(xì)胞，兩種質(zhì)粒在HEK293細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行同源重組以獲得重組體腺病毒，氯化銫密度梯度離心法純化并檢測病毒滴度，用構(gòu)建的重組腺病毒感染HELA細(xì)胞，檢測重組腺病毒的生物安全性。3、所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差MEANS±SD表示，多個樣本均數(shù)比較采用析因設(shè)計的方差分析，多重比較采用BONFERRONI法。結(jié)果采用同源重組法構(gòu)建復(fù)制缺陷型重組腺病毒載體，酶切鑒定后進(jìn)行大量擴(kuò)增，氯化銫密度梯度離心法純化，檢測病毒滴度為31010PFUML。MOI值100的病毒液感染HELA細(xì)胞后，各組細(xì)胞生長狀態(tài)無顯著性差異P0329。結(jié)論成功構(gòu)建了攜帶TFSHRNA的腺病毒表達(dá)載體ADTFSHRNA，載體穩(wěn)定，易于純化和擴(kuò)增，病毒滴度高，并具有較高的生物安全性。第三部分人重組組織因子腺病毒的體外功能初步研究目的在成功構(gòu)建腺病毒表達(dá)載體ADTFSHRNA的基礎(chǔ)上，進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)研究，探討在白介素18INTERLEUKINIL18，IL18作用下，腺病毒載體對人臍動脈血管平滑肌TF抗原、凝血活性、MRNA和蛋白表達(dá)的變化。方法1、采用組織塊培養(yǎng)法分離人臍動脈血管平滑肌細(xì)胞，ΑACTIN免疫組織化學(xué)檢查陽性鑒定為平滑肌細(xì)胞。采用第34代細(xì)胞用于本實(shí)驗(yàn)研究。2、采用直接感染法，用重組腺病毒感染血管平滑肌細(xì)胞SMCS，確定最佳MOI，采用MTT法檢測重組腺病毒對血管平滑肌細(xì)胞生長狀態(tài)的影響；一期凝血法、ELISA法檢測在IL18作用下，分別于感染后8、24、48和72H檢測細(xì)胞TF抗原、凝血活性的變化，并應(yīng)用RTPCR及WESTERNB1OT方法檢測感染后血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)TF基因MRNA及蛋白表達(dá)水平的改變。3、所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差MEANS±SD表示，多個樣本均數(shù)比較采用析因設(shè)計的方差分析，多重比較采用BONFERRONI法。結(jié)果1、相差顯微鏡檢查傳代后的血管平滑肌細(xì)胞呈“峰”、“谷”狀生長；ΑACTIN免疫組織化學(xué)檢查符合平滑肌細(xì)胞特征，第34代用于本實(shí)驗(yàn)研究。2、當(dāng)MOI為50時，平滑肌細(xì)胞的感染效率為80％以上，當(dāng)MOI為100時，平滑肌細(xì)胞的感染效率幾乎為90％，說明重組腺病毒體外轉(zhuǎn)染效率高，且細(xì)胞生長狀態(tài)良好。3、臺盼蘭法分別在感染后1、3、4和8D細(xì)胞計數(shù)，結(jié)果顯示，與對照組相比，在ADTFSHRNA和ADGAPDHSHRNA感染細(xì)胞天數(shù)相同時，細(xì)胞計數(shù)無顯著性差異；各組感染后細(xì)胞生長狀態(tài)良好，隨著感染天數(shù)的增多，細(xì)胞數(shù)增多，有顯著性差異P＜005，采用時間點(diǎn)細(xì)胞數(shù)與對照組相比，無顯著性變化P＞005。4、在100NGML的IL18作用下，與對照組相比，平滑肌細(xì)胞8H、24H、48H和72H后上清液中TF抗原含量和凝血活性都有顯著性升高P0000，含有TF特異片段的重組腺病毒ADTFSHRNA感染SMCS8H后，與IL18作用處理組相比，TF抗原含量和凝血活性均明顯降低P0000。RTPCR結(jié)果顯示，在感染后24、48和72內(nèi)，與對照組相比相比，ADTFSHNA能顯著降低細(xì)胞內(nèi)TF表達(dá)水平P0000；WESTERNBLOT結(jié)果亦證實(shí)，我們構(gòu)建的靶向TF的ADTFSHRNA感染平滑肌細(xì)胞后，細(xì)胞內(nèi)TF蛋白明顯下降，與RTPCR結(jié)果一致。以上結(jié)果提示IL18可誘導(dǎo)血管平滑肌產(chǎn)生大量的TF，并具有較高的凝血活性，構(gòu)建的攜帶TFSHRNA的重組腺病毒ADTF可降低血管平滑肌細(xì)胞中TF含量和凝血活性，并且這種抑制作用是在MRNA和蛋白水平的抑制。結(jié)論1、重組腺病毒ADTF對體外培養(yǎng)的人臍動脈血管平滑肌生長狀態(tài)無影響。2、IL18可誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生并表達(dá)TF，這種誘導(dǎo)作用可以由腺病毒載體介導(dǎo)的RNA干擾TF基因表達(dá)后，明顯抑制TF含量和凝血活性，且這種作用是在MRNA及蛋白水平的抑制。創(chuàng)新點(diǎn)1、本研究首次運(yùn)用發(fā)夾環(huán)小干擾RNA對動脈粥樣硬化發(fā)病過程中凝血途徑和炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵基因TF基因進(jìn)行干擾，將RNA干擾技術(shù)引入動脈粥樣硬化的基因治療；2本研究首次將RNA干擾技術(shù)與基因重組以及基因載體技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于動脈粥樣硬化基因治療。構(gòu)建攜帶TFSHRNA的重組體腺病毒，利用復(fù)制缺陷型腺病毒載體具有的高效、穩(wěn)定、低遺傳毒性等特性，將TFSHRNA高效地轉(zhuǎn)運(yùn)至血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)，降低炎癥因子IL18作用下，血管平滑肌細(xì)胞中TF表達(dá)。