簡(jiǎn)介：骨關(guān)節(jié)炎OSTEOARTHRITISOA是一種以關(guān)節(jié)軟骨退行性改變?yōu)楹诵睦奂肮琴|(zhì)并包括滑膜、關(guān)節(jié)囊及關(guān)節(jié)其它結(jié)構(gòu)的慢性炎癥是一種無菌性、慢性、進(jìn)行性侵犯關(guān)節(jié)特別是負(fù)重關(guān)節(jié)的疾病。表現(xiàn)為關(guān)節(jié)軟骨破壞關(guān)節(jié)表面形成骨贅滑膜細(xì)胞增生滑膜炎和關(guān)節(jié)間隙變窄。骨關(guān)節(jié)炎是世界上最常見的關(guān)節(jié)病隨年齡增大患病率迅速上升是老年人關(guān)節(jié)疼痛和致殘的主要原因。據(jù)世界衛(wèi)生組織WHO統(tǒng)計(jì)骨關(guān)節(jié)炎在女性患病率中占第四位在男性患病率中占第八位國(guó)內(nèi)的統(tǒng)計(jì)資料表明我國(guó)患有骨關(guān)節(jié)的人數(shù)占總?cè)丝诘?％其中大部分為膝骨關(guān)節(jié)炎55歲以上人群X線有膝骨關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)者約60％65歲以上老年人骨關(guān)節(jié)的發(fā)病率可達(dá)85％75歲以上的老年人中每人都有至少一個(gè)關(guān)節(jié)有骨關(guān)節(jié)炎變化。在美國(guó)總?cè)丝谥?5％患關(guān)節(jié)炎其中43％為骨關(guān)節(jié)炎達(dá)1600萬每年因骨關(guān)節(jié)炎而退休的人數(shù)占退休總?cè)藬?shù)的5％以上與因心臟病退休的人數(shù)相仿。據(jù)統(tǒng)計(jì)全世界大約有19億骨關(guān)節(jié)炎患者而且人數(shù)還在不斷增加。骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生與關(guān)節(jié)局部因素、全身因素及個(gè)體遺傳因素均有密切的關(guān)系。關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨受到直接或間接的壓力和磨擦損傷可能是骨關(guān)節(jié)炎起病的主要誘發(fā)因素。此外隨年齡增大關(guān)節(jié)周圍韌帶松馳、神經(jīng)反射減緩及外傷等均可致關(guān)節(jié)不穩(wěn)造成軟骨的壓力不平衡及損傷進(jìn)而出現(xiàn)軟骨細(xì)胞激活、蛋白酶類及炎性細(xì)胞因子分泌增加等骨關(guān)節(jié)炎的病理變化。除關(guān)節(jié)軟骨損傷的作用外骨關(guān)節(jié)炎的另一個(gè)誘發(fā)因素是不同原因所致的軟骨下骨組織細(xì)微結(jié)構(gòu)的異常。臨床研究發(fā)現(xiàn)不少骨關(guān)節(jié)炎患者在關(guān)節(jié)軟骨的形態(tài)學(xué)變化之前即出現(xiàn)軟骨下骨硬化X線改變等。反復(fù)的關(guān)節(jié)微創(chuàng)傷可引起軟骨下骨組織的微骨折并引起關(guān)節(jié)軟骨的生物力學(xué)和代謝的變化、骨硬化及骨贅形成。但目前對(duì)于骨關(guān)節(jié)疾病中鈣化層病理結(jié)構(gòu)改變尚缺乏深入了解。為了深入了解關(guān)節(jié)骨軟骨鈣化層的病理改變本研究選用骨關(guān)節(jié)炎最具代表性的膝關(guān)節(jié)為研究對(duì)象通過大體觀察病理切片聯(lián)合應(yīng)用HE染色、番紅O固綠染色、馮庫(kù)薩染色、甲苯胺藍(lán)染色、天狼猩紅染色多種方法進(jìn)行組織學(xué)觀察及掃描電鏡超微結(jié)構(gòu)分析等方法從不同結(jié)構(gòu)層次對(duì)骨關(guān)節(jié)炎骨軟骨鈣化層的病理結(jié)構(gòu)進(jìn)行了深入研究。一、實(shí)驗(yàn)方法1標(biāo)本來源所選標(biāo)本均來源于臨床診斷為膝關(guān)節(jié)退行性骨關(guān)節(jié)炎患者取材部位為股骨髁負(fù)重區(qū)其中男性1例女性20例年齡6557±743歲身高15538±532CM體重5995±899KG左膝9例、右膝12例。2影像學(xué)觀察患者站立位兩腿分開60°患膝以膝關(guān)節(jié)為中點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)X光片投射機(jī)中心線照正位片患肢向前邁一步屈膝30°膝關(guān)節(jié)為中點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)X光片投射機(jī)中心線照側(cè)位片。3大體觀察取骨軟骨組織塊8例置于體視顯微鏡觀察臺(tái)上10倍鏡下觀察骨軟骨縱切面各層組織的大體形態(tài)結(jié)構(gòu)然后用數(shù)碼相機(jī)進(jìn)行拍照。4組織學(xué)觀察常規(guī)制備石蠟切片進(jìn)行HE染色、番紅O固綠染色、馮庫(kù)薩染色、甲苯胺藍(lán)染色、天狼猩紅染色。5超微結(jié)構(gòu)觀察取股骨髁新鮮標(biāo)本8例制備骨軟骨組織塊常規(guī)固定、脫水、噴金處理后采用掃描電鏡觀察關(guān)節(jié)軟骨表面及骨軟骨縱斷面的超微結(jié)構(gòu)。6統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用SPSS110統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析計(jì)量資料采用X±S表示。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1病歷資料統(tǒng)計(jì)共選用21例骨關(guān)節(jié)炎患者膝關(guān)節(jié)置換取下的標(biāo)本其中男性1例女性20例左膝9例、右膝12例。平均年齡6557±743歲平均身高15538±532CM平均體重5995±899KG平均病程1304±966年。2影像學(xué)觀察關(guān)節(jié)組織腫脹關(guān)節(jié)腔積液關(guān)節(jié)間隙變窄嚴(yán)重者關(guān)節(jié)間隙基本消失關(guān)節(jié)面密度增高周緣可見唇樣改變軟骨下骨皮質(zhì)硬化小梁有斷裂出現(xiàn)皮質(zhì)骨下囊狀改變骨贅形成及關(guān)節(jié)內(nèi)游離體等。3大體觀察軟骨表面缺損、不平軟骨層變薄骨軟骨縱斷面三層結(jié)構(gòu)顯示不清潮線斷裂、間隙增寬、鈣化軟骨層增厚。4組織學(xué)觀察主要病理改變1潮線復(fù)制、漂移2鈣化層增厚伴血管長(zhǎng)入3非鈣化軟骨及鈣化層Ⅰ型膠原蛋白纖維樣改變4潮線間隙增寬5深層軟骨及鈣化層缺損。5超微結(jié)構(gòu)觀察骨關(guān)節(jié)炎軟骨表面不平整有明顯的鱗屑或麩皮樣改變?cè)谥嗅占捌渲車嬖诿黠@的裂隙和大大小小的淺表潰瘍潰瘍內(nèi)有粗細(xì)不等的小孔及粗糙的突起可見軟骨細(xì)胞和暴露的膠原纖維。6統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明所有標(biāo)本均出現(xiàn)潮線復(fù)制、漂移由正常的1條增至416條鈣化層的最大厚度由原來的300UM增至900UM。病理改變血管長(zhǎng)入12例占總病歷數(shù)57％發(fā)生鈣化層缺損8例占總病歷數(shù)381％潮線間隙增寬5例占總病歷數(shù)238％鈣化層發(fā)生纖維化3例占總病理數(shù)143％。三、結(jié)論本研究選用原發(fā)性O(shè)A最具代表性的膝關(guān)節(jié)為研究對(duì)象通過大體觀察病理切片聯(lián)合應(yīng)用HE染色、番紅O固綠染色、馮庫(kù)薩染色、甲苯胺藍(lán)染色、天狼猩紅染色等多種方法進(jìn)行組織學(xué)觀察掃描電鏡超微結(jié)構(gòu)分析等方法對(duì)骨關(guān)節(jié)炎骨軟骨鈣化層的病理形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果表明1原發(fā)性O(shè)A的骨軟骨縱斷面三層結(jié)構(gòu)顯示不清潮線斷裂間隙增寬鈣化軟骨層增厚。2主要病理組織學(xué)改變包括1三層結(jié)構(gòu)潮線復(fù)制、漂移2鈣化層增厚伴血管長(zhǎng)入3非鈣化軟骨及鈣化層纖維樣改變4潮線間隙增寬5深層軟骨及鈣化層缺損。3骨關(guān)節(jié)炎超微結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)明顯的鱗屑或麩皮樣改變?cè)谥嗅占捌渲車嬖诿黠@的裂隙和大大小小的淺表潰瘍潰瘍內(nèi)有粗細(xì)不等的小孔及粗糙的突起可見軟骨細(xì)胞和暴露的膠原纖維。4原發(fā)性O(shè)A均可見鈣化層厚度增加平均為895±24ΜM與正常256±12ΜM比較差異顯著P＜001潮線復(fù)制其復(fù)制的數(shù)量約為正常1條的10±6倍。血管長(zhǎng)入12例占總病歷數(shù)57％發(fā)生鈣化層缺損8例占總病歷數(shù)381％潮線間隙增寬5例占總病歷數(shù)238％鈣化層發(fā)生纖維化3例占總病理數(shù)143％。5原發(fā)性O(shè)A骨軟骨鈣化層的早期病理改變尚需進(jìn)行深入研究。

簡(jiǎn)介：肌聯(lián)蛋白TITIN和伴肌動(dòng)蛋白NEBULIN是兩種分子量分別為3000KDA和1600900KDA的大分子量肌原纖維結(jié)構(gòu)蛋白。由于這兩種大分子量蛋白獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特征以及在肌原纖維中的位置，最新研究認(rèn)為它們可能在肌肉彈性的形成中起重要作用。本研究以海水魚黃鰭鯛SPARUSLATUS為研究對(duì)象，旨在分離純化TITIN和NEBULIN，制備特異性多克隆抗體，并研究這兩種蛋白在不同貯藏條件下的自身降解及其酶解作用，為進(jìn)一步研究水產(chǎn)動(dòng)物大分子量肌肉結(jié)構(gòu)蛋白的生物化學(xué)和食品學(xué)性質(zhì)奠定基礎(chǔ)。用SEPHACRYLS400凝膠過濾柱層析和電洗脫等方法對(duì)海水黃鰭鯛骨骼肌中的TITIN和NEBULIN進(jìn)行分離純化，并結(jié)合免疫印跡法進(jìn)一步確認(rèn)TITIN。結(jié)果顯示從黃鰭鯛肌肉中分離純化了高純度的TITIN，并與小鼠抗雞TITIN單克隆抗體發(fā)生明顯的免疫交叉反應(yīng)；通過電洗脫法純化得到了電泳純度的NEBULIN。以提純的TITIN和NEBULIN為抗原分別免疫大鼠和新西蘭家兔，制備大鼠抗黃鰭鯛TITIN多克隆抗體和兔抗黃鰭鯛NEBULIN多克隆抗體。結(jié)果顯示對(duì)大鼠抗黃鰭鯛TITIN多克隆抗體，ELISA法檢測(cè)效價(jià)約為110，免疫斑點(diǎn)印跡法檢測(cè)效價(jià)至少為510；WESTERNBLOT檢測(cè)大鼠抗黃鰭鯛TITIN多克隆抗體與肌原纖維蛋白中的TITIN發(fā)生特異反應(yīng)，而與其他蛋白無免疫交叉反應(yīng)。對(duì)兔抗黃鰭鯛NEBULIN多克隆抗體，免疫斑點(diǎn)印跡法檢測(cè)效價(jià)至少為510；WESTERNBLOT檢測(cè)兔抗黃鰭鯛NEBTLLIN多克隆抗體與肌原纖維蛋白中的NEBULIN能發(fā)生特異性反應(yīng)，而與其他蛋白僅有微弱免疫交叉反應(yīng)。通過對(duì)在4℃和18℃下放置不同天數(shù)的黃鰭鯛肌肉、表皮色澤、眼睛清澈度、氣味等感官鮮度指標(biāo)觀察并結(jié)合SDSPAGE分析，探明TITIN和NEBULIN在貯藏過程中的分解變化。結(jié)果顯示4℃貯藏條件下黃鰭鯛肌肉的軟化、腐臭等感官鮮度指標(biāo)下降較慢；而18℃貯藏條件下則明顯較快；SDSPAGE顯示4℃下即使冷藏11天TITIN變化不顯著，11天后逐漸發(fā)生降解。第7天NEBULIN開始發(fā)生降解。但在18℃貯藏1天TITIN和NEBULIN即開始降解，第5天幾乎檢測(cè)不到NEBULIN，第7天檢測(cè)不到TITIN，可見肌肉結(jié)構(gòu)蛋白NEBUHN比TITIN更易降解，但魚體死后肌肉彈性的下降與這兩種大分子量蛋白降解之間關(guān)聯(lián)性不是很密切。以肌原纖維和純化蛋白為對(duì)象，研究在55℃、20℃和4℃下肌原纖維結(jié)合型絲氨酸蛋白酶MYOFIBRILLBOUNDSERINEPROTEINASE，MBSP對(duì)TITIN和NEBULIN的分解作用。結(jié)果表明55℃下MBSP對(duì)TITIN和NEBULIN有明顯的分解作用且對(duì)NEBULIN的分解強(qiáng)于TITIN。而在20℃和4℃這樣較低溫度下，MBSP對(duì)TITIN和NEBULIN也有輕微的分解作用。本研究首次從魚體肌肉中純化得到了TITIN和NEBULIN這兩種大分子量蛋白，并制備得到了這兩種蛋白高滴度、高特異性的多克隆抗體；并研究了MBSP對(duì)這兩種蛋白的分解作用，彌補(bǔ)了國(guó)內(nèi)外在該研究領(lǐng)域的空白，為魚類肌原纖維大分子量結(jié)構(gòu)蛋白新陳代謝的深入研究奠定了理論基礎(chǔ)。

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簡(jiǎn)介：目的1研究電刺激治療前后糖尿病鼠、產(chǎn)后壓力性尿失禁鼠血漿神經(jīng)肽含量的變化，通過對(duì)壓力性尿失禁大鼠及糖尿病大鼠盆底肌張力和神經(jīng)肽水平的觀察，研究NPY是否能作為盆底功能障礙性疾病康復(fù)電刺激治療效果評(píng)價(jià)指標(biāo)。2比較產(chǎn)后壓力性尿失禁大鼠及糖尿病大鼠肌肉經(jīng)電刺激后神經(jīng)肌肉形態(tài)學(xué)及病理學(xué)特征，為盆底功能障礙性疾病的臨床康復(fù)治療提供依據(jù)。研究方法1建立高脂高糖飼料聯(lián)合小劑量STZ制造2型糖尿病大鼠模型，應(yīng)用陰道中放置水囊模擬難產(chǎn)過程，建立壓力性尿失禁大鼠模型，并探討其特征。2對(duì)電刺激治療前后各組大鼠血漿NPY含量及恥骨尾骨肌肌力、肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化及肌肉中NPY的表達(dá)進(jìn)行比較。結(jié)果1電刺激治療前尿失禁組、糖尿病組血漿NPY水平明顯低于對(duì)照組（P2尿失禁組、糖尿病電刺激治療前后血漿NPY水平比較明顯增加（P3電刺激治療前尿失禁組、糖尿病組收縮活力與對(duì)照組相比降低（P4尿失禁組、糖尿病電刺激治療前后收縮活力比較明顯增加（P5電刺激治療前后血漿NPY水平與尿失禁組、糖尿病組治療前后收縮活力增加相關(guān)P6電刺激治療后尿失禁大鼠及糖尿病大鼠肌肉中NPY的表達(dá)增加與治療后恥骨尾骨肌肌力的增加相關(guān)P結(jié)論1在對(duì)陰道置入球囊模產(chǎn)傷形成的尿失禁大鼠動(dòng)物模型及STZ誘導(dǎo)形成的2型糖尿病大鼠的研究中，血漿NPY含量減少，可認(rèn)為NPY可作為一個(gè)反應(yīng)神經(jīng)損傷的一個(gè)的指標(biāo)。2經(jīng)盆底肌肉神經(jīng)電刺激治療后，尿失禁大鼠及糖尿病大鼠血漿NPY的濃度升高，并且與恥骨尾骨肌肌力的恢復(fù)相關(guān)，可能與NPY的促進(jìn)了盆底肌肉血管的生成有關(guān)，因此NPY可能作為盆底功能障礙性疾病康復(fù)電刺激治療效果評(píng)價(jià)指標(biāo)。3經(jīng)盆底肌肉神經(jīng)電刺激治療后尿失禁大鼠及糖尿病大鼠肌肉中NPY的表達(dá)增加與治療后恥骨尾骨肌肌力的恢復(fù)相關(guān)，可認(rèn)為神經(jīng)肌肉電刺激增加了作為神經(jīng)遞質(zhì)NPY的釋放，繼而反映了受損的神經(jīng)部份恢復(fù)，引起肌力的增加。4壓力性尿失禁動(dòng)物模型及2型糖尿病動(dòng)物模型造模后恥骨尾骨肌形態(tài)學(xué)上都出現(xiàn)了肌源性改變和神經(jīng)源肌病的表現(xiàn)，較好的模擬了SUI及POP的去神經(jīng)損傷這個(gè)盆底功能障礙性疾病發(fā)病的病因。

簡(jiǎn)介：天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文安氏Ⅰ類不同垂直骨面型下頜第三磨牙傾斜角度及磨牙后間隙的研究姓名郭晨申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)口腔醫(yī)學(xué)；口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師王建國(guó)201205天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文4男性第三磨牙后間隙比值RI在1416歲組增大明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其余各年齡組問差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。女性第三磨牙后間隙比值RI在1214歲組增大明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其余各年齡組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5男性第三磨牙傾斜角M3M2在1520歲組間低角組明顯小于高角組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各年齡組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。女性第三磨牙傾斜角M3一M2在1214歲組間低角組明顯小于高角組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各年齡組問差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6男性磨牙后間隙比值RI在15。20歲組間高角組明顯小于低角組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各年齡組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。女性磨牙后間隙比值RI在1217歲組間高角組明顯小于低角組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各年齡組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1男性第三磨牙在1516歲及2021歲及以上組傾向于更為直立。女性第三磨牙則在1415歲及1819歲傾向于直立。2男性磨牙后間隙在1416歲，女性在1214歲進(jìn)入快速增長(zhǎng)期。從12歲到21歲及以上組無論男性還是女性磨牙后間隙均存在一定增長(zhǎng)。3各垂直骨面型間第三磨牙測(cè)量值的差異主要集中在1220歲問，其中男性主要集中在1520歲，女性主要集中在1217歲。21歲以上組差異不明顯。4男性低角患者在1520歲間第三磨牙較高角患者更為直立，磨牙后間隙較高角患者更為充足；女性低角患者在1214歲間第三磨牙較高角患者更為直立，在1217歲間磨牙后間隙較高角患者更為充足。關(guān)鍵詞安氏I類垂直骨面型第三磨牙傾斜角度磨牙后間隙

簡(jiǎn)介：目的本課題以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療，為觀察中藥制劑復(fù)陽活骨丸配合髓芯減壓術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物激素性股骨頭壞死血液流變學(xué)及血脂的影響，探討其防治股骨頭壞死的作用機(jī)制。方法實(shí)驗(yàn)采用健康家兔45只為研究對(duì)象，除空白對(duì)照組外，其余家兔均每周兩次臀肌注射醋酸氫化潑尼松75MGKG，6周后誘導(dǎo)出激素性股骨頭缺血性壞死的早期模型，將造模家兔隨機(jī)分組。整個(gè)實(shí)驗(yàn)分組空白對(duì)照組正常組、模型對(duì)照組模型組、髓芯減壓組減壓組、復(fù)陽活骨丸組中藥組、復(fù)陽活骨丸配合髓芯減壓組中藥并減壓組。造模6周后，正常組隨機(jī)處死1只取材，造模組處死4只取材。治療6周后全部處死取材，并測(cè)定家兔治療后的血液流變學(xué)和血脂指標(biāo)，進(jìn)行分析比較。結(jié)果1各造模家兔體重在治療前均明顯低于正常組，髓芯減壓組體重治療后下降趨勢(shì)減緩，中藥治療組體重治療后較治療前有所增加，以中藥配合減壓組增加明顯；2組織病理學(xué)觀察正常組正常，模型組骨小梁細(xì)疏，髓腔脂肪細(xì)胞增大、增多，減壓組、中藥組、中藥并減壓組病變較模型組為輕，以中藥并減壓組較接近正常組；3血液流變學(xué)檢測(cè)中藥組、中藥并減壓組的全血粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞壓積明顯低于模型組P005，其中中藥配合減壓組最接近正常水平；4血脂檢測(cè)中藥組、中藥并減壓組的甘油三脂、總膽固醇明顯低于模型組P005，其中中藥并減壓組最接近正常水平。結(jié)論短期內(nèi)大劑量使用激素，可以引起股骨頭缺血性壞死，中藥復(fù)陽活骨丸配合髓芯減壓可有效糾正血液高粘滯狀態(tài)，改善股骨頭微循環(huán)；糾正脂肪代謝紊亂狀態(tài)，降低高血脂，減少脂肪栓子的形成；增強(qiáng)骨細(xì)胞活力，抑制脂肪的異常堆積，防止和減輕骨細(xì)胞壞死；降低骨內(nèi)壓，促進(jìn)骨小梁再生和修復(fù)。達(dá)到預(yù)防激素性股骨頭壞死的發(fā)生和發(fā)展。

簡(jiǎn)介：目的探討類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎R(shí)A與骨性關(guān)節(jié)炎OA行人工全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)TKA時(shí)失血量的相關(guān)問題。方法選擇2002年1月2006年12月在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院實(shí)施TKA的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎與骨性關(guān)節(jié)炎病例為研究對(duì)象，篩選時(shí)制定了嚴(yán)格的剔除方案，共有61例患者納入研究。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎組18例，其中雙膝12例，單膝6例，共30個(gè)關(guān)節(jié)。骨性關(guān)節(jié)組43例，其中雙膝19例單膝24例，共62個(gè)關(guān)節(jié)。結(jié)果類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎組TKA的平均失血量為33433±22187ML。骨性關(guān)節(jié)炎組TKA的平均失血量為49597±24283ML。兩組失血量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎組平均術(shù)中糾正的曲伸度數(shù)為7333±3922°。骨性關(guān)節(jié)炎組平均術(shù)中糾正的曲伸度數(shù)為5226±263°。兩組術(shù)中糾正的屈伸度數(shù)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。結(jié)論本研究是首次對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎與骨性關(guān)節(jié)炎在實(shí)施TKA手術(shù)時(shí)失血量的估計(jì)，為臨床骨科大夫制定類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨性關(guān)節(jié)炎TKA時(shí)的輸血方案提供參考依據(jù)，而且指出不同膝關(guān)節(jié)疾病行TKA時(shí)失血量有差異，因而在制定輸血方案時(shí)應(yīng)因病制宜。另外研究結(jié)果還顯示不同膝關(guān)節(jié)疾病間，不能單獨(dú)據(jù)病變膝關(guān)節(jié)術(shù)中糾正的屈伸度數(shù)判斷TKA失血量的多少。

簡(jiǎn)介：中圖分類號(hào)中圖分類號(hào)R89；R36；R39碩士學(xué)位論文富血小板纖維蛋白對(duì)兔下頜骨缺損富血小板纖維蛋白對(duì)兔下頜骨缺損的修復(fù)修復(fù)作用作用院（系）、所院（系）、所口腔醫(yī)學(xué)院研究生姓名研究生姓名李強(qiáng)學(xué)科、專學(xué)科、專業(yè)頜面外科導(dǎo)師姓導(dǎo)師姓名夏德林教授教授二Ο一二年四月年四月富血小板纖維蛋白對(duì)兔下頜骨缺損富血小板纖維蛋白對(duì)兔下頜骨缺損的修復(fù)作用的修復(fù)作用摘要口腔頜面部位于人體特殊部位，是兼具語言、呼吸、咀嚼、吞咽等多重功能的重要器官的聚集地。通過協(xié)調(diào)相關(guān)肌群來表達(dá)喜怒哀樂，聯(lián)合唇、舌、上下頜骨來完成復(fù)雜的生理過程。發(fā)育缺陷、外傷缺失、腫瘤切除等多種原因都會(huì)導(dǎo)致頜面組織缺損，引起功能障礙，影響身心健康。頜骨缺損的修復(fù)重建歷來都是頜面外科工作者研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)之一。修復(fù)手段多樣，生物性活性材料充填是較常用的一種方法操作相對(duì)簡(jiǎn)便快捷、生物安全性高、生物相容性好、一般不會(huì)造成代償性的供體創(chuàng)傷。各國(guó)學(xué)者圍繞自體血液來源的濃縮制劑進(jìn)行了大量的基礎(chǔ)及臨床研究，證實(shí)其具有明顯的促進(jìn)組織修復(fù)再生功效。而對(duì)于近年提出的新技術(shù)富血小板纖維蛋白（PRF）的作用尚在研究驗(yàn)證中。目的目的本實(shí)驗(yàn)課題將通過離心家兔自體血液獲得的富血小板纖維蛋白植入拔牙創(chuàng)內(nèi)，通過影像學(xué)和組織學(xué)方法對(duì)不同時(shí)期標(biāo)本進(jìn)行連續(xù)觀察，分析它對(duì)頜骨缺損組織的修復(fù)作用，探討其中可能的促再生機(jī)制。方法方法（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型將55只試驗(yàn)用家兔按獲取標(biāo)本的時(shí)間不同隨機(jī)分為5組，分別拔除雙側(cè)下頜第一前磨牙。抽取家兔自體外周血液，離心后修整制成富血小板纖維蛋白。一側(cè)拔牙創(chuàng)內(nèi)填入富血小板纖維蛋白為對(duì)照組，另一側(cè)血液自然凝結(jié)做空白對(duì)照組。（2）實(shí)驗(yàn)觀察方法在術(shù)后2、4、6、8、12周連續(xù)對(duì)照觀測(cè)拔牙創(chuàng)成骨愈合的情況。利用圖像處理軟件，通過測(cè)量拍攝的放射學(xué)曲面斷層X片的灰度值，間接推測(cè)拔牙創(chuàng)新生骨密度。將上述數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。再將標(biāo)本脫鈣脫水石蠟包埋行組織學(xué)切片，顯微鏡下觀察血管生成、骨質(zhì)生成成熟情況。結(jié)果結(jié)果（1）放射學(xué)觀察術(shù)后2、4、6、8、12周，通過評(píng)價(jià)曲

簡(jiǎn)介：目的骨缺損的治療一直是骨科臨床的難題。骨缺損的治療目前主要是自體骨及異體骨的移植。但它們具有明顯的缺點(diǎn)，如自體骨來源有限，需要兩次手術(shù)；而異體骨具有免疫排斥和疾病傳播的缺陷等。骨組織的修復(fù)一般認(rèn)為是特定的靶細(xì)胞在特定環(huán)境中經(jīng)一定的生長(zhǎng)因子刺激發(fā)生增殖、分化的結(jié)果，即骨形成需要三個(gè)條件1、靶細(xì)胞，即具有潛在骨生成能力的未分化間充質(zhì)細(xì)胞2、具有骨誘導(dǎo)活性的因子3、骨形成的適宜環(huán)境。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，特別是基因工程技術(shù)的成熟，骨生長(zhǎng)因子制備技術(shù)日臻完善及它的基礎(chǔ)與臨床研究日益深入，為骨缺損的治療提供了新的途徑。作為骨誘導(dǎo)因子之一的成骨蛋白1OSTEOGENICPROTEIN1，OP1，又名骨形態(tài)發(fā)生蛋白7BONEMPHOGEICPROTEIN7，BMP7，具有強(qiáng)大的骨誘導(dǎo)活性，能誘導(dǎo)未分化的間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞和成軟骨細(xì)胞分化。OP1還能彌補(bǔ)自體骨和異體骨移植的缺陷，在骨缺損、骨不連、脊柱融合術(shù)、矯形缺陷等治療中發(fā)揮重要作用此外，OP1在口腔牙周再造、牙槽骨的發(fā)育和重建中也發(fā)揮重要作用。由于單純RHOP1在體內(nèi)容易擴(kuò)散、降解，在有效的時(shí)間內(nèi)無法作用于更多的靶細(xì)胞，因此，RHOP1的穩(wěn)定緩慢釋放是其成骨作用的前提，RHOP1緩釋載體是其發(fā)揮生理功能的基礎(chǔ)。理想的載體除能承載RHOP1并保持其活性外，尚具有良好的生物相容性、同時(shí)能保持適當(dāng)?shù)目障堵识诔晒羌?xì)胞爬行。本實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建了工程菌RHOP1PBV221ECOLIDH5A和RHOP1PBV221ECOLIBL21，探索并建立了發(fā)酵、純化、復(fù)性等RHOP1制備工藝，獲得了高純度的有活性的RHOP1，實(shí)驗(yàn)室其他作者已經(jīng)探索了其與部分載體材料的復(fù)合。前期的實(shí)驗(yàn)證明，RHOP1明膠海綿植入劑在小動(dòng)物上具有良好的骨誘導(dǎo)活性。本工作以臨床應(yīng)用為目的，針對(duì)臨床口腔科適應(yīng)癥，選擇易生物降解的生物工程材料，以實(shí)驗(yàn)室已有工藝制備RHOP1復(fù)合植入劑，選擇與人更接近的大動(dòng)物進(jìn)一步驗(yàn)證其骨誘導(dǎo)性，并探討其骨誘導(dǎo)機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)依據(jù)。研究方法1RHOP1明膠海綿植入劑制備發(fā)酵基因工程技術(shù)構(gòu)建的工程菌RHOP1PBV221ECOLIBL21和OP1PBV221ECOLIDH5A，經(jīng)超聲裂解法破裂后收集包涵體，通過SPSEPHAROSE純化后進(jìn)行梯度透析復(fù)性，純化獲得高純度的RHOP1。將吸收性明膠海綿加工成直徑為5MM、厚度為2MM的圓片狀，與透析復(fù)性的RHOP1混勻后置于冷凍干燥機(jī)中凍干，使RHOP1干粉充分吸附在明膠海綿載體上，制備RHOP1明膠海綿植入劑。2RHOP1植入劑對(duì)牙槽骨再生的作用本實(shí)驗(yàn)將RHOP1植入劑應(yīng)用于犬拔牙創(chuàng)的研究，分別設(shè)立對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，于2周、4周、8周時(shí)取材，進(jìn)行大體標(biāo)本觀察、X線檢測(cè)和組織學(xué)檢查，觀察RHOP1體內(nèi)誘導(dǎo)成骨活性。3RHOP1對(duì)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用本實(shí)驗(yàn)通過體外培養(yǎng)方法獲得骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，分別設(shè)立對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，利用RHOP1對(duì)其誘導(dǎo)分化，進(jìn)行堿性磷酸酶ALP活性檢測(cè)、茜素紅鈣結(jié)節(jié)染色觀察RHOP1體內(nèi)誘導(dǎo)成骨活性。4RHOP1植入劑對(duì)成骨組織的蛋白質(zhì)組學(xué)研究蛋白質(zhì)組學(xué)是以基因組編碼的全部蛋白質(zhì)為研究對(duì)象，旨在從分子水平及整體水平研究蛋白質(zhì)的組成及其動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，從而深入認(rèn)識(shí)有機(jī)體的各種生理和病理過程。本實(shí)驗(yàn)通過雙向電泳技術(shù)研究了RHOP1明膠海綿復(fù)合體埋植于肌肉組織后對(duì)成骨組織的蛋白質(zhì)組學(xué)研究。研究結(jié)果1菌體經(jīng)發(fā)酵誘導(dǎo)表達(dá)后，SDSPAGE電泳顯示目的蛋白約占菌體蛋白總量的30％，經(jīng)SPSEPHAROSE純化后，RHOP1單體純度高達(dá)90％以上，純化后的RHOP1經(jīng)梯度透析的方法復(fù)性，RHOP1以單體和二聚體的形式存在。2RHOP1植入劑具有明顯的促進(jìn)牙槽骨再生的作用，并且可以縮小拔牙創(chuàng)，減少出血，從而促進(jìn)拔牙創(chuàng)的愈合，可以為早期義齒修復(fù)、早期牙種植做準(zhǔn)備，而且該材料制作方便，操作簡(jiǎn)單，有望經(jīng)過進(jìn)一步研究成為臨床促牙槽骨再生的生物材料。3RHOP1成骨作用明顯，在體外有良好的骨誘導(dǎo)活性，為其在組織工程學(xué)方面的應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。4實(shí)驗(yàn)顯示對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組凝膠蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)分別為732個(gè)和784個(gè)。這些蛋白質(zhì)等電點(diǎn)和分子量分布范圍較廣，蛋白質(zhì)點(diǎn)主要分布在等電點(diǎn)為47，分子量為24KD66KD的范圍。分析發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組之間存在差異蛋白質(zhì)點(diǎn)共92個(gè)差異蛋白質(zhì)點(diǎn)，其中28個(gè)點(diǎn)僅在對(duì)照組中表達(dá)，30個(gè)點(diǎn)僅在實(shí)驗(yàn)組中表達(dá)，23個(gè)點(diǎn)在實(shí)驗(yàn)組中高表達(dá)，11個(gè)點(diǎn)在實(shí)驗(yàn)組中低表達(dá)。說明RHOP1植入劑對(duì)組織蛋白表達(dá)有重要影響，可能對(duì)成骨起重要的誘導(dǎo)作用。結(jié)論在實(shí)驗(yàn)室已篩選的技術(shù)工藝基礎(chǔ)上，制備了RHOP1明膠海綿植入劑，并證實(shí)該植入劑具有體內(nèi)外骨誘導(dǎo)活性。

簡(jiǎn)介：人體在不同的生理狀態(tài)下會(huì)產(chǎn)生不同的生理電信號(hào)通過電極采集生理電信號(hào)進(jìn)行模式識(shí)別就可以分析出人體的生理狀態(tài)。傳統(tǒng)的針電極表面金屬電極和貼片電極等在臨床應(yīng)用的過程中使用不方便需要較高的專業(yè)技巧導(dǎo)致患者皮膚過敏、皮炎甚至損傷。隨著穿戴式醫(yī)療監(jiān)護(hù)設(shè)備技術(shù)的發(fā)展出現(xiàn)了新型的織物電極技術(shù)?？椢镫姌O使用便捷應(yīng)用靈活可清洗折疊反復(fù)、長(zhǎng)期應(yīng)用并且不會(huì)對(duì)人體造成任何不適和傷害。所以織物電極可以廣泛的應(yīng)用在臨床病理診斷醫(yī)療監(jiān)護(hù)系統(tǒng)等各種臨床實(shí)踐中。本文詳細(xì)的分析研究了織物電極以及將其應(yīng)用于多功能肌電假肢的實(shí)時(shí)控制系統(tǒng)中主要研究?jī)?nèi)容如下首先研究分析了傳統(tǒng)臨床應(yīng)用電極所存在的缺陷和織物電極在各個(gè)領(lǐng)域的發(fā)展現(xiàn)狀根據(jù)所需電極特性制定了織物電極制作方案。該方案參考了傳統(tǒng)電極的性能又避免了傳統(tǒng)電極存在的問題發(fā)揮了織物電極的優(yōu)良特性。其次通過研究分析織物電極的函數(shù)轉(zhuǎn)換皮膚電極阻抗以及電極結(jié)構(gòu)、位置等設(shè)計(jì)原理從電極的制作工藝、電極導(dǎo)電材料和基材的選擇以及電極的結(jié)構(gòu)形態(tài)等方面完成了織物電極的設(shè)計(jì)與制作建立了完整的織物電極信號(hào)采集系統(tǒng)并對(duì)制作出的織物電極進(jìn)行了電極阻抗、皮膚電極阻抗、信噪比和信號(hào)幅值等方面的性能分析。最后將織物電極信號(hào)采集系統(tǒng)應(yīng)用于多功能肌電假肢虛擬現(xiàn)實(shí)的控制系統(tǒng)中。設(shè)計(jì)了基于織物電極的實(shí)時(shí)控制實(shí)驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)中受試者通過織物電極信號(hào)采集系統(tǒng)控制虛擬現(xiàn)實(shí)中的肌電假肢完成十個(gè)腕部和手部動(dòng)作證明了織物電極可以應(yīng)用在多功能肌電假肢控制系統(tǒng)中驗(yàn)證了本研究在實(shí)際應(yīng)用的可行性和重要性。

簡(jiǎn)介：本文主要研究了電化學(xué)方法在NITI合金表面沉積類骨羥基磷灰石BONELIKEHA的工藝。運(yùn)用掃描電子顯微鏡SEM、X射線衍射XRD、紅外光譜IR和透射電子顯微鏡TEM等檢測(cè)手段對(duì)所獲得涂層的形貌、組成和結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，在37℃小電流密度4MACM2下，涂層的主要成分為MGOH2和吸附了較多的CA的ACP。NITI合金基體表面沉積的類骨HA是依附在ACP的表面形核長(zhǎng)大。ACP的生長(zhǎng)方向是垂直于基體成片狀。隨著電化學(xué)參數(shù)的正向變化，類骨HA涂層的表面形貌均呈現(xiàn)球狀團(tuán)簇→細(xì)片狀聚集→球狀團(tuán)簇的變化趨勢(shì)，這種變化是由于競(jìng)爭(zhēng)生長(zhǎng)機(jī)制造成的，包括過飽和與溶解度、形核和長(zhǎng)大的競(jìng)爭(zhēng)。XRD結(jié)果表明，002與211晶面的峰強(qiáng)比在078左右，遠(yuǎn)大于HA標(biāo)準(zhǔn)峰的比值。說明在NITI合金基體表面的HA涂層在002晶面上存在沿C軸擇優(yōu)取向，且取向程度與電化學(xué)參數(shù)無關(guān)。在一些參數(shù)條件下，涂層中出現(xiàn)了CACO3晶體。采用統(tǒng)計(jì)平均的方法測(cè)得在SBF溶液電化學(xué)沉積HA的體系中，短時(shí)間內(nèi)PH隨時(shí)間呈現(xiàn)周期變化，長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)PH是隨著時(shí)間延長(zhǎng)而增大，隨著溫度的增加而漸小，電流密度的增大而升高。計(jì)算了理論分解電壓為175V。確立了陰極附近的PH值是電流密度，陰極電位和溫度的函數(shù)關(guān)系。推測(cè)本實(shí)驗(yàn)條件下得到的類骨HA化學(xué)式CAMG10PO4CO3OH6OH2，定義了陰極表面PH值PHS擴(kuò)散影響區(qū)。結(jié)合雙電層與吸附理論，建立了HA在溶液中形核和在NITI合金表面兩種模式的沉積模型。

簡(jiǎn)介：目的觀察慢性氟中毒大鼠骨組織的形態(tài)學(xué)改變和檢測(cè)骨組織中SPARC和MMP9MRNA及其蛋白的表達(dá)變化，為氟中毒骨骼損傷的早期預(yù)防和控制提供科學(xué)依據(jù)。方法36只SD大鼠按體重、性別隨機(jī)分3組，每組12只，組內(nèi)雌雄各半。對(duì)照組飲水含氟量＜1MG／L、低氟組飲水加氟量5MG／L、高氟組飲水加氟量50MG／L。飼養(yǎng)大鼠8個(gè)月，觀察氟斑牙發(fā)生情況及測(cè)定尿氟含量，明確氟中毒模型建立成功后股動(dòng)脈放血處死大鼠，氟離子電極法測(cè)各組大鼠尿氟、骨氟含量；收集血清，用酶聯(lián)免疫吸附法（ENZYMELINKEDIMMUNOSBNENTASSAY，ELISA）檢測(cè)大鼠血清中骨堿性磷酸酶（BONEALKALINEPHOSPHATASEBALP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TARTRATERESISTANTACIDPHOSPHATASEFM5B，TRACP5B）的含量；蘇木素伊紅HEMATOXYLINEOSIN，HE染色后光鏡下觀察股骨下段骨組織形態(tài)學(xué)改變并進(jìn)行骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)測(cè)量；免疫組織化學(xué)（IMMUNOHISTOCHEMISTRY，IHC）和原位雜交技術(shù)INSITUHYBRIDIZATIONISH分別檢測(cè)骨組織中的SPARC和MMP9的蛋白及其MRNA表達(dá)水平。結(jié)果1、慢性氟中毒大鼠模型復(fù)制成功，表現(xiàn)為染氟組大鼠出現(xiàn)不同程度氟斑牙損害，高氟組最為嚴(yán)重，對(duì)照組未出現(xiàn)氟斑牙，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P2、染氟組大鼠血清BALP含量均增高，各組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P3、染氟組大鼠骨組織呈骨皮質(zhì)增厚、骨小梁增寬、骨髓腔間隙變窄等骨質(zhì)硬化表現(xiàn)。與對(duì)照組比較，染氟組大鼠的骨皮質(zhì)厚度、骨小梁寬度、骨髓腔間隙及骨小梁密度差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P4、與對(duì)照組比較，染氟組大鼠骨組織成骨細(xì)胞中SPARCMRNA及其蛋白表達(dá)水平逐漸增高，各組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P5、與對(duì)照組比較，染氟組大鼠骨組織破骨細(xì)胞中MMP9MRNA及其蛋白表達(dá)水平隨氟濃度的增加而升高，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P結(jié)論1慢性飲水型氟中毒大鼠模型復(fù)制成功，染氟組大鼠出現(xiàn)骨代謝紊亂，成骨活躍和破骨增強(qiáng)，骨轉(zhuǎn)換加速，但隨氟濃度的增加成骨作用更明顯，表現(xiàn)為骨硬化型骨損傷。2SPARC在骨代謝異常中表達(dá)水平升高，推測(cè)過量氟可通過上調(diào)成骨細(xì)胞中SPARC蛋白和MRNA的表達(dá)來調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的增殖、分化過程，從而促進(jìn)骨形成。3MMP9的表達(dá)水平增高，推測(cè)與過量氟上調(diào)大鼠骨組織破骨細(xì)胞中MMP9的表達(dá)來促進(jìn)骨吸收過程有關(guān)。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多牽引成骨過程中生理性負(fù)重對(duì)新生血管影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多脫細(xì)胞牛松質(zhì)骨的生物相容性及修復(fù)兔橈骨缺損的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的各種原因引起的大段骨缺損很難愈合，隨著組織工程學(xué)理論與技術(shù)的發(fā)展，將具有成骨能力的種子細(xì)胞復(fù)合可降解生物材料構(gòu)建成具有生命活力的組織工程人工骨移植到骨缺損處，發(fā)揮骨誘導(dǎo)、骨傳導(dǎo)甚至直接成骨作用，成為這一棘手問題的新的解決方案。中醫(yī)認(rèn)為，骨折后如腎生養(yǎng)精髓不足，則無以養(yǎng)骨而難以愈合，中醫(yī)治療骨折促進(jìn)骨折愈合，無不從補(bǔ)腎壯骨入手。如果能夠證實(shí)補(bǔ)腎壯骨中藥具有促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞MESENCHYMAISTEMCELLS，MSC增殖、分化或兩者兼有的功能，就能從骨生長(zhǎng)的細(xì)胞學(xué)層面上闡述這類藥物的具體作用機(jī)制和靶點(diǎn)。通過本研究希望解答以下問題1中藥骨碎補(bǔ)促進(jìn)骨折愈合接骨續(xù)筋的細(xì)胞學(xué)機(jī)制，即是否是骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨細(xì)胞骨生長(zhǎng)骨愈合的過程，為印證髓滿骨充理論提供依據(jù)；2中藥參與培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞特性維持的能力，即是否具有穩(wěn)定增殖和傳代的能力；3中藥參與培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞能否分化為成骨細(xì)胞，即骨髓基質(zhì)細(xì)胞的多潛能分化和定向分化能力的維持；4骨碎補(bǔ)提取物在細(xì)胞培養(yǎng)過程中的量效關(guān)系；5這種特定條件下培養(yǎng)的種子細(xì)胞與生物基質(zhì)材料的復(fù)合是怎樣的，即能否制成具有生命活性的組織工程人工骨；6該人工骨植入骨缺損處后的成骨效能如何。一、骨碎補(bǔ)提取液對(duì)兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖的影響方法1分組實(shí)驗(yàn)共分五組①空白對(duì)照組標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液；②誘導(dǎo)對(duì)照組成骨條件誘導(dǎo)培養(yǎng)液；③中藥Ⅰ組含骨碎補(bǔ)20MGML的培養(yǎng)液；④中藥Ⅱ組含骨碎補(bǔ)2MGML的培養(yǎng)液；⑤中藥Ⅲ組含骨碎補(bǔ)02MGML的培養(yǎng)液。將從2月齡純種新西蘭大白兔提取的骨髓懸液分離漂洗出骨髓基質(zhì)細(xì)胞，加入以上培養(yǎng)液中培養(yǎng)。結(jié)果1細(xì)胞生長(zhǎng)狀況中藥Ⅰ組細(xì)胞貼壁數(shù)量少，生長(zhǎng)緩慢，細(xì)胞形態(tài)細(xì)長(zhǎng)，胞質(zhì)較少，細(xì)胞萎縮脫落?？瞻捉M細(xì)胞基本呈長(zhǎng)梭形，其他各組細(xì)胞逐漸增多，伸出偽足，呈梭形、星形、多角形等不同形狀。胞漿內(nèi)有較多小顆粒，核仁明顯，一周左右細(xì)胞基本長(zhǎng)滿并呈集落存在。2細(xì)胞活力及生長(zhǎng)曲線的測(cè)定結(jié)果誘導(dǎo)組與空白組未見顯著性差異，中低濃度提取液有促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖作用，而低濃度較中濃度作用更強(qiáng)，高濃度提取液抑制骨髓基質(zhì)細(xì)胞的增殖，還能導(dǎo)致其凋亡。3細(xì)胞分裂指數(shù)的測(cè)定結(jié)果測(cè)量分裂指數(shù)記錄并繪制成曲線，將貼片的細(xì)胞行HE染色，中藥Ⅰ組明顯抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，曲線低平。結(jié)論中低濃度骨碎補(bǔ)提取液促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖，而高濃度提取液抑制細(xì)胞增殖，甚至引起凋亡，條件誘導(dǎo)培養(yǎng)液對(duì)細(xì)胞增殖的影響不明顯。二、骨碎補(bǔ)提取液對(duì)兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化的影響方法骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)同上。結(jié)果1倒置相差顯微鏡觀察中藥Ⅰ組細(xì)胞脫壁漂浮，數(shù)量明顯減少，細(xì)胞邊緣粗糙皺縮，核固縮，裂解。中藥Ⅱ、Ⅲ組、誘導(dǎo)對(duì)照組細(xì)胞呈梭形、多角形，融合為單層后繼續(xù)增殖成復(fù)層生長(zhǎng)，形成多個(gè)島狀致密細(xì)胞群，中間細(xì)胞排列緊密，漸被含有高折射的空泡和深色顆粒的基質(zhì)包埋形成白色鈣化結(jié)節(jié)?？瞻讓?duì)照組，融合為單層后細(xì)胞發(fā)生接觸抑制，最終停止分裂增殖。2掃描電鏡觀察中藥Ⅱ、Ⅲ兩組細(xì)胞多為單層細(xì)胞結(jié)構(gòu)，細(xì)胞為梭形或多角形，帶多個(gè)突起，數(shù)目不等，長(zhǎng)短粗細(xì)各異，可見細(xì)長(zhǎng)微絲形成細(xì)胞間的連接，細(xì)胞表面及細(xì)胞間可見鈣鹽結(jié)晶沉積。3堿性磷酸酶染色中藥Ⅱ、Ⅲ組和誘導(dǎo)組染色陽性率分別為356％、314％和724％，空白組僅為36％。誘導(dǎo)組與空白對(duì)照組及中藥各組之間有極顯著性差異P＜0001，中藥Ⅱ、Ⅲ組與空白組之間也有極顯著性差異P＜0001，中藥兩組之間無明顯差異P＞005。4Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色各組Ⅰ型膠原在細(xì)胞內(nèi)和基質(zhì)均有陽性染色，誘導(dǎo)組與空白組有極顯著性差異P＜0001，中藥Ⅱ、Ⅲ組雖明顯低于誘導(dǎo)組P＜005，但都明顯或顯著高于空白組分別為P＜005，P＜001，而中藥兩組之間無明顯差異P＞005。5鈣結(jié)節(jié)染色中藥Ⅱ、Ⅲ組在每個(gè)標(biāo)本上均可見到金黃色鈣結(jié)節(jié)，低倍視野平均為1～2個(gè)，少于誘導(dǎo)組的平均3～4個(gè)，而空白組僅偶見鈣結(jié)節(jié)。結(jié)論高濃度骨碎補(bǔ)醇提液引起了BMSCS的死亡或凋亡，不利于BMSCS向成骨細(xì)胞分化。中、低濃度骨碎補(bǔ)醇提液具有促進(jìn)BMSCS向成骨細(xì)胞分化的作用。三、成骨細(xì)胞與多孔支架材料的生物相容性研究方法傳代增殖的兔成骨細(xì)胞制成5104ML濃度的細(xì)胞懸液，置入已有支架材料的培養(yǎng)板中，使細(xì)胞懸液充分滲入支架材料孔隙內(nèi)聯(lián)合培養(yǎng)，8小時(shí)后加入條件培養(yǎng)液，其后隔日更換培養(yǎng)液，連續(xù)培養(yǎng)。結(jié)果1倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察培養(yǎng)7天，緊密貼附于支架表面的成骨細(xì)胞分化增殖連接成片，細(xì)胞多為梭形、三角形向周圍伸出偽足，分泌的基質(zhì)包繞于細(xì)胞周圍，充填于支架材料周邊孔隙中，可見鈣結(jié)節(jié)。2堿性磷酸酶染色培養(yǎng)2周鈣鈷法在成骨細(xì)胞的胞漿中呈現(xiàn)淺棕色至棕黑色顆粒。3成骨細(xì)胞在支架材料上的成活和增殖能力測(cè)定值為0221±0017，對(duì)照組為0140±0015，P〈001〉，表明支架有利于細(xì)胞的附著和增殖。結(jié)論成骨細(xì)胞在生物支架上分布均勻，粘附力強(qiáng)，并能很好地分化增殖及分泌新的骨基質(zhì)，生物活性玻璃能夠?yàn)榉N子細(xì)胞提供良好的載體和生存環(huán)境，二者生物相容性好。四、組織工程人工骨修復(fù)兔骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究方法將20只新西蘭大白兔分為4組，在其橈骨缺損處分別植入組織工程人工骨Ⅰ組、生物活性玻璃Ⅱ組、自體髂骨Ⅲ組，每組6只，另2只保留骨缺損作為空白對(duì)照組Ⅳ組?？p合肌層皮膚包扎。術(shù)后每天肌注青霉素，連續(xù)三天，常規(guī)飼養(yǎng)。結(jié)果1大體觀察12周Ⅰ組骨缺損區(qū)修復(fù)良好，與正常骨無差異；Ⅱ組骨缺損初步修復(fù)，有少量連續(xù)骨痂通過；Ⅲ組骨缺損完全修復(fù)，有連續(xù)性骨痂通過骨折端，質(zhì)地堅(jiān)硬；Ⅳ組假關(guān)節(jié)形成。2X線觀察12周ⅠⅢ組骨缺損完全修復(fù)，可見皮質(zhì)骨及髓腔形成，皮質(zhì)骨厚度接近正常骨；Ⅱ組有少量連續(xù)性骨痂通過斷端；Ⅳ組骨端硬化分離，形成假關(guān)節(jié)。3組織學(xué)觀察12周Ⅰ組移植顆粒間骨橋和小梁狀結(jié)構(gòu)已建立，髓腔進(jìn)一步開通，逐步恢復(fù)自然骨的特點(diǎn)。Ⅱ組顆粒周圍形成少量新骨，顆粒間骨橋連接不緊密，骨小梁也不明顯。4掃描電鏡12周Ⅲ組已形成隆起密集的結(jié)合，Ⅰ組分界模糊過渡自然，結(jié)合部密集。Ⅱ組也有明顯的修復(fù)，但不緊密。Ⅳ組全部為纖維組織，中央有裂隙。5生物力學(xué)測(cè)試結(jié)果顯示Ⅲ組橈骨扭轉(zhuǎn)強(qiáng)度最高，與Ⅰ組無明顯差異P＞005。Ⅱ組及Ⅳ組修復(fù)效果較差，有明顯差異。結(jié)論成骨細(xì)胞與生物活性玻璃復(fù)合的組織工程骨的成骨能力與自體髂骨的修復(fù)結(jié)果相似，明顯優(yōu)于其它組，該人工骨能很好地修復(fù)骨缺損。