簡介：華中科技大學碩士學位論文人骨肉瘤原代細胞條件培養(yǎng)基中骨形態(tài)蛋白（BMP）的實驗研究姓名冷燕奎申請學位級別碩士專業(yè)骨外科指導教師吳華陳安民20040401華中科技人學同濟EF學院碩卜學位論義人骨肉瘤原代細胞條件培養(yǎng)基中骨形態(tài)蛋白BMP的實驗研究華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院骨利研究生冷燕奎導師吳華摘要【目的】探索從人骨肉瘤細胞條件培養(yǎng)基中提取骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP的方法，并測定其生物學活性?！痉椒ā繌呐R床截肢肢體中切取骨肉瘤組織，采用組織塊貼壁培養(yǎng)法，培養(yǎng)原代骨肉瘤細胞。收集人骨肉瘤細胞條件培養(yǎng)基，通過濃縮、透析、SEPHCRYIS100凝膠層析純化，用BMP單克隆抗體鑒定所需洗脫峰，SDSPAGE測定其分子量，小鼠肌袋實驗檢測其骨誘一導活性。I結果IBMP單抗鑒定所提取的蛋白為骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMPSDSPAGE電泳顯示其分子量約為21KD，動物實驗顯示能夠在小鼠肌肉內(nèi)產(chǎn)生異位骨化?！窘Y論】人骨肉瘤細胞條件培養(yǎng)基中含有骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP分離后具有良好的生物學活性，而骨肉瘤細胞可以在體外一長期培養(yǎng)

簡介：上海交通大學碩士學位論文三種缺損狀態(tài)的下頜骨假體的設計和生物力學評價及動物試驗研究姓名曲愛麗申請學位級別碩士專業(yè)機械設計及理論指導教師王成燾20060201上海交通大學碩士論文II且應該結合松質骨顆粒、骨髓或者組織工程化骨填充假體，以提高組織相容性；同時半側缺損假體用拉力螺釘連接能夠實現(xiàn)很好的應力傳遞作用；2從體部缺損假體設計中也同時考察了應用拉力螺釘時不同截骨平面角度對骨假體系統(tǒng)應力的影響，得出了切除角度越大，則系統(tǒng)的受力越均勻的結論。同時體部缺損假體的孔中植入松質骨后也可以達到骨細胞生長所需的應力水平；3頦部假體上的應力基本關于正中對稱，而且處于拉壓應力并存狀態(tài)。4為提高假體與骨之間連接的穩(wěn)定性，建議采用在假體上設計凸臺。5利用反求工程軟件進行了實驗用動物假體的設計和加工，實現(xiàn)了從CT圖片提取點云構建曲線光順曲面假體、模板設計加工的全過程，為今后動物實驗提供了可行的道路。本文對三種缺損假體植入人體后的骨假體系統(tǒng)進行了應力分析，得出了不同缺損部位假體植入人體后引起的人體生物力學的變化和應力水平的變化，為下頜骨缺損重建提供了全面的力學參考。關鍵詞下頜骨修復體有限元動物實驗

簡介：【目的】系統(tǒng)檢測MIRNA在DYSFERLIN肌病中的表達，初步探討MIRNA與DYSFERLIN肌病的關系；結合靶基因預測及細胞學實驗，探討MIR708MIMIC對成肌細胞的影響?！痉椒ā?結合臨床表現(xiàn)、HE染色和肌酶特殊染色、免疫組化等方法，篩選DYSFERLIN肌病病例為實驗組，非特異性改變肌組織為對照組，取部分組織行MIRNA芯片分析。2靶基因預測網(wǎng)站預測作用于DYSF基因的MIRNA，結合MIRNA芯片結果，選擇與DYSFERLIN肌病關系密切的MIRNA，TAQMAN探針實時定量PCRRTPCR檢測其在人肌肉組織及小鼠成肌細胞C2C12增殖和分化過程中的表達。3合成MIR708MIMIC，轉染成肌細胞C2C12，光學顯微鏡下觀察成肌細胞生長分化情況，利用CCK8檢測MIR708MIMIC對C2C12細胞生長增殖的影響，用流式細胞術檢測轉染MIR708MIMIC后的增殖期C2C12細胞周期和凋亡情況，RTPCR、WESTERNBLOT檢測肌細胞增殖分化相關基因的表達?！窘Y果】1免疫組化顯示DYSFERLIN蛋白在正常肌細胞的肌膜上呈線性表達，而在DYSFERLIN肌病組織中，DYSFERLIN蛋白表達明顯減弱或缺失。光鏡下DYSFERLIN肌病組織病理學改變肌纖維呈輕重度圓形萎縮伴多量肥大肌纖維形成，散在肌纖維見鑲邊空泡，個別肌纖維溶解壞死，內(nèi)核纖維明顯增多，間質纖維脂肪組織增生。2MIRNA芯片結果顯示DYSFERLIN肌病組織，116個MIRNA表達上調(diào)，176個MIRNA表達下調(diào)，部分MIRNA表達水平異常與肌病時細胞內(nèi)各種酶活性的調(diào)節(jié)、細胞代謝的調(diào)控及MAPK、WNT信號通路等病理過程相關。結合芯片結果與靶基因預測結果，選擇與DYSF基因關系密切的3個MIR122、346、708。其中MIR122、346下調(diào)，MIR708上調(diào)。3篩選9例DYSFERLIN肌病標本進行MIRNA檢測，與非特異性改變肌組織對比，MIR122、346、708表達均升高（P值分別為004，004，003），其中MIR708在DYSFERLIN肌病患者肌組織的表達模式與芯片結果一致。4檢測MIR122、346、708在C2C12成肌細胞生長分化過程中的表達，顯示增殖期MIR122、346、708表達量較低，分化早期MIR122、346、708均升高，但隨著C2C12分化時間的延長，MIR122表達水平基本不變，MIR346、708表達下調(diào)，其中MIR708下調(diào)更明顯，達到增殖期水平。5C2C12細胞轉染MIR708MIMIC后，光學顯微鏡下可見成肌細胞增殖受到明顯抑制。CCK8檢測顯示MIMIC組C2C12抑制率為（1540±00052）％，（P0004），明顯高于NC組（287±00034）；流式細胞術結果顯示轉染MIR708MIMIC后，C2C12細胞周期變化明顯，S期明顯縮短（2087），G1期明顯延長6864，NC組分別為4566、4269，而細胞凋亡指數(shù)MIMIC組與NC組無顯著差異；RTPCR及WESTERNBLOT結果顯示與陰性對照（NC組）相比，轉染MIR708MIMIC后MYOD、MYOG、MHC、DYSF蛋白表達水平無明顯變化?！窘Y論】1DYSFERLIN肌病可引起多種MIRNA表達模式的改變，這些MIRNA可能通過肌動蛋白骨架形成的調(diào)控、細胞內(nèi)各種酶活性的調(diào)節(jié)、細胞代謝的調(diào)控及MAPK、WNT信號通路的調(diào)節(jié)等環(huán)節(jié)參與DYSFERLIN肌病病理生理過程。2MIR708可能是成肌細胞增殖的調(diào)控分子，但與成肌細胞分化和凋亡無明顯相關，其在DYSFERLIN肌病中的作用機制有待于進一步探討。

簡介：目的研究葛根素對去卵巢大鼠骨代謝的影響探討其抗骨質疏松作用的相關機理并比較葛根素與雌激素的差別方法雌性清潔級SD大鼠32只隨機分為4組單純卵巢切除組雌激素組葛根素組與假手術組除假手術組外其余各組分別予卵巢切除術后1周雌激素組予雌激素治療苯甲酸雌二醇200UGKG皮下注射每周2次葛根素組予葛根素治療葛根素注射液80MGKG皮下注射每日1次假手術組和單純卵巢切除組予生理鹽水治療與葛根素組相同體積的生理鹽水皮下注射每日1次作為對照治療10周后留取24小時尿測尿鈣、磷、肌酐、脫氧吡啶啉稱重后心臟取血取血漿測血鈣、磷分離血清測血堿性磷酸酶、甘油三酯、膽固醇、雌二醇、一氧化氮濃度、總一氧化氮合酶及誘導型一氧化氮合酶濃度分離子宮稱濕重后置于福爾馬林液中作子宮病理切片分離大鼠右側股骨行骨密度檢測取右側脛骨及第一腰椎脫鈣后行骨病理切片取左側股骨遠端置液氮中抽提骨組織總RNA行RTPCR分析骨中三種一氧化氮合酶MRNA的表達情況取左側脛骨近端勻漿后測定骨組織一氧化氮、總一氧化氮合酶及誘導型一氧化氮合酶濃度結論葛根素能可以明顯提高骨質疏松模型大鼠的骨密度改善骨小梁的微結構減少骨吸收引起的尿DPD排泄的增加具有明顯抗骨質疏松治療作用葛根素可以通過促進ENOSMRNA的表達抑制INOSMRNA的表達調(diào)節(jié)全身與局部NO水平起到抗骨質疏松的作用在副作用方面葛根素的促子宮內(nèi)膜增生作用遠較雌激素為輕并具有降脂作用

簡介：目的采用免疫組化的方法觀察復方冰蜜生肌膏對兔感染傷口新生皮膚中血小板源性生長因子PDGF蛋白表達量變化的影響。方法采用隨機分組法建立兔感染性皮膚缺損動物模型，三組動物模型分別用復方冰蜜生肌膏、百多邦莫羅匹星軟膏均勻涂抹傷口，生理鹽水組單用生理鹽水紗布覆蓋傷口，各組動物每兩天各用復方冰蜜生肌膏、百多邦莫羅匹星軟膏、生理鹽水紗布換藥一次。術后第5、10、15、20天分批處死兔子，并切取新生皮膚標本，用福爾馬林固定后送至病理室處理，對標本進行免疫組化染色，通過電子計算機圖象分析系統(tǒng)進行陽性細胞主要包括成纖維細胞、炎性細胞和內(nèi)皮細胞，以免疫組化染色胞漿或和胞膜著棕色為陽性細胞計數(shù)和記錄陽性細胞率，測定面密度和平均光密度值，來觀察PDGF蛋白表達量的變化。結果對第5、10、15、20天分別切取的新生皮膚標本進行免疫組化染色和電腦圖象分析，顯示復方冰蜜生肌膏組陽性細胞數(shù)及陽性細胞率明顯增加，示PDGF含量明顯增加，與百多邦組、生理鹽水組相比較有顯著性差異P＜005。結論復方冰蜜生肌膏能明顯促進傷口肉芽組織中PDGF的表達，加速傷口的愈合，從而促進皮膚缺損的修復。

簡介：研究目的檢測主要成分為磷酸鎂MPC的新型無機骨水泥體外粘接固定新鮮豬脛骨內(nèi)側骨折的抗拉強度。了解該無機骨水泥在家豬體內(nèi)固定治療骨折的效果，探討其對家豬體內(nèi)電解質離子濃度（磷、鎂、鈣）的影響，觀察其是否影響骨折愈合過程及吸收降解情況等。研究方法1從市場購買新鮮豬脛骨60只，編號后采用CHISS軟件隨機分為A、B、C、D、E、F六組，每組10只。通過骨鑿制備新鮮豬脛骨內(nèi)側1CM2骨折斷面，用MPC骨粘合劑進行粘接后加壓固定15分鐘。將這些新鮮豬脛骨標本粘接體在室溫23℃和37℃、模擬體液兩種不同條件下分別固化05H、2H、24H后，對豬脛骨粘接體進行抗拉強度的生物力學測試。2健康家豬15頭，通過骨鑿制備豬雙側脛骨內(nèi)側1CM2骨折斷面。采用打耳號法標記，通過CHISS軟件將其隨機分組。選取一側脛骨為實驗側，采用MPC粘接，另一側為對照側，采用40MM40CM松質骨螺釘內(nèi)固定，對于手術部位術后均不采取外固定措施。于術前和術后1個月、3個月、6個月測定血電解質離子濃度，并分別于術后3個時間點取出手術脛骨，進行大體觀察、影像學檢查和不脫鈣骨切片觀察。研究結果1經(jīng)MPC粘接固定的新鮮豬脛骨標本粘接體在室溫23℃和37℃、模擬體液兩種條件下固化05H、2H、24H后平均抗拉強度分別為98310±14961NCM2和9133±910NCM2、11733±2293NCM2和11428±1219NCM2、11878±2001NCM2和11959±2096NCM2。室溫23℃和模擬體內(nèi)環(huán)境條件下固化05H、2H和24H后，MPC粘接新鮮豬脛骨標本的抗拉強度差異不具有統(tǒng)計學意義。室溫23℃條件下固化05H、2H后平均抗拉強度分別為24H后的828％和988％，37℃、模擬體液條件下固化05H、2H后平均抗拉強度分別為24H后的764％和956％。2對術前和術后不同時間點家豬體內(nèi)血電解質離子濃度進行測定并作方差分析，發(fā)現(xiàn)術前、術后1個月、3個月、6個月家豬體內(nèi)血磷、血鎂、血鈣離子濃度差異不具有統(tǒng)計學意義。3通過大體觀察、影像學檢查和和不脫鈣骨切片觀察發(fā)現(xiàn)，經(jīng)MPC粘接和螺釘固定的豬脛骨內(nèi)側骨折，1個月后骨折部位對位對線良好，達到骨折的臨床愈合，未出現(xiàn)愈合延遲，且MPC在家豬體內(nèi)可以降解吸收，僅3個月時一例螺釘固定骨折的家豬脛骨出現(xiàn)畸形愈合。結論1新型無機骨水泥對新鮮豬脛骨骨折有一定的粘接固定作用，在室溫和模擬體內(nèi)環(huán)境條件下均可固化，且在室溫23℃條件下固化2H即可達到較好粘接強度，與臨床手術完成時間基本相同，因此可應用于臨床實踐，用作骨折斷面的直接粘接固定。2新型無機骨水泥植入家豬體內(nèi)后在正常新陳代謝情況下可以完全平衡，對其血清電解質離子濃度幾乎沒有影響。3新型無機骨水泥使用方便，易操作，對家豬體內(nèi)骨折的粘接固定也有良好的效果。MPC在家豬體內(nèi)可降解，且能達到與骨折愈合相近的速度，未對骨折愈合產(chǎn)生不良影響，實現(xiàn)了骨折斷面的直接粘接固定。

簡介：目的研究在正常骨骼肌肌膜上不表達的MHCⅠ抗原在特發(fā)性炎性肌?、騇的表達，探討MHCⅠ表達在ⅡM診斷和鑒別診斷中的價值。方法對15例ⅡM患者骨骼肌標本進行MHCⅠ免疫組化染色研究其中多發(fā)性肌炎14例、皮肌炎1例，并以5例正常骨骼肌標本和25例其它神經(jīng)肌肉病為對照其中肢帶型肌營養(yǎng)不良18例、脂質沉積性肌病4例，糖原累積病1例，運動神經(jīng)元病2例。在光鏡下采用前瞻性盲法操作判斷每份標本的染色結果，計算各組的MHCⅠ陽性表達率，比較各組陽性表達率的差異，并計算ⅡM組MHCⅠ表達的敏感性和特異性。結果ⅡM組的肌纖維MHCⅠ陽性表達率為867％1315，其它神經(jīng)肌肉病組為24％625，正常骨骼肌組均未見MHCⅠ表達。ⅡM組MHCⅠ的陽性表達率明顯高于對照組P＜0005，其敏感性為867％，特異性為76％。結論在ⅡM，肌纖維MHCⅠ表達明顯增加，且其敏感性和特異性均較高。MHCⅠ免疫組化染色是ⅡM一項較好的輔助病理診斷方法。

簡介：第一章淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨量、骨生物力學、骨形態(tài)學與骨代謝生化指標的影響第一部分淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨量的影響目的探討淫羊藿黃酮干預對被動吸煙大鼠骨量的影響。方法分組選用2月齡SPRAGUEDAWLEYSD大鼠60只，隨機分為6組，每組10只，各組雌雄各半，雌雄分籠飼養(yǎng)。A組空白對照組，常規(guī)方法飼養(yǎng)，不給予被動吸煙；B組被動吸煙組，不給予灌服藥物；C組被動吸煙鈣組，灌服高效鈣75MGKGD維生素D21IUKGD；D組被動吸煙低劑量，灌服淫羊藿黃酮75MGKGD；E組被動吸煙中劑量，灌服淫羊藿黃酮150MGKGD；F組被動吸煙高劑量，灌服淫羊藿黃酮300MGKGD。按“密室熏煙法給予實驗組B組、C組、D組、E組、F組、大鼠被動吸煙4個月。實驗第4月末處死大鼠，取出大鼠雙側脛骨、雙側股骨、雙側肱骨和全部腰椎，測定雙側股骨、雙側脛骨、雙側肱骨和全部腰椎骨密度。結論淫羊藿黃酮可有效防治被動吸煙誘導的大鼠骨密度值的降低，使大鼠骨密度維持于較高水平。第二部分淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨生物力學的影響目的探討淫羊藿黃酮干預對被動吸煙大鼠骨生物力學性能的影響。方法實驗動物干預完畢后測定1第四腰椎體力學性能指標中彈性模量、最大載荷、最大應力、變形位能、結構剛度；2股骨結構力學性能指標中最大載荷、破壞載荷、變形位能、結構剛度；3股骨材料力學性能指標中彈性模量、最大應力、最大應變、破壞應力、破壞應變。結論淫羊藿黃酮可有效防治被動吸煙誘導的大鼠骨生物力學性能的降低，使其維持于較高水平。第三部分淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨形態(tài)學的影響目的探討淫羊藿黃酮干預對被動吸煙大鼠骨形態(tài)學的影響。方法實驗動物在處死前14、13D和4、3D分別皮下注射四環(huán)素和鈣黃綠素作體內(nèi)熒光標記，干預完畢后測定或觀察1脛骨上段松質骨骨形態(tài)計量學靜態(tài)指標中骨小梁面積百分數(shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)目、骨小梁分離度；2脛骨上段松質骨成骨細胞、破骨細胞計數(shù)；3股骨頭掃描電鏡形態(tài)分析指標中骨小梁拱橋結構、骨表面形態(tài)、骨小梁平均直徑、骨面積百分比。結論淫羊藿黃酮可有效防治被動吸煙誘導的大鼠骨形態(tài)學性能的降低，使其維持于較高水平。第四部分淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨代謝生化指標的影響目的探討淫羊藿黃酮干預對被動吸煙大鼠骨代謝生化指標的影響。方法每周測定大鼠體重；在實驗第8周時用代謝籠收集24小時尿液，斷尾尾靜脈放血。實驗第4月末，處死大鼠前一天用代謝籠收集24小時尿液，處死大鼠后心腔內(nèi)抽血，測定1體重隨時間增長情況；2臟／體比值指標中肝、脾、腎、子宮、卵巢重量；3股骨骨鈣含量、骨磷含量、骨礦物質含量；4血清骨鈣素和抗酒石酸酸性磷酸酶及尿脫氧吡啶啉5在第8周時血CA、血P、血ALP、尿CA、尿P、尿HOP；6在第4月末時血CA、血P、血ALP、尿CA、尿P、尿HOP。結論淫羊藿黃酮可有效防治被動吸煙誘導的大鼠骨代謝生化指標的惡化，使其維持于較正常的水平。第二章淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨組織腫瘤壞死因子和白介素1表達的影響及其相關性目的探討淫羊藿黃酮防治被動吸煙大鼠骨質疏松的可能分子機理。方法實驗動物干預完畢后取出脛骨，制備標本，RTPCR法檢測RNFMRNA和IL1MRNA表達，并應用曲線擬合分析其相關性。結論淫羊藿黃酮可抑制被動吸煙大鼠骨組織TNF和IL1MRNA的表達，可能是其防治骨質疏松的分子機理之一。第三章淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨組織骨橋蛋白表達的影響目的進一步探討淫羊藿黃酮防治被動吸煙大鼠骨質疏松的可能分子機理。方法實驗動物干預完畢后取出脛骨制備標本RTPCR法檢測OPNMRNA表達WESTERNBLOTTING測定OPN蛋白表達水平免疫沉淀法檢測OPN蛋白磷酸化程度。結論淫羊藿黃酮干預可抑制被動吸煙大鼠骨組織OPNMRNA、OPN蛋白的表達及其蛋白磷酸化程度可能是其防治骨質疏松的分子機理之一。

簡介：分類號學號R7268200939502≯、匆墨最囂擎屁學校代碼10661密級碩士學位論文學術型學位先天性肌性斜頸病變組織中細胞外間質的變化特點THECHARACTERISTICSOFTHEINTERCELLULARSUBSTANCEINPATHOLOGICALTISSUEOFCONGENITALMUSCULARTORTICOLLIS專業(yè)叢』L置科研究方向嬰』L斜亟2012年5月遵義醫(yī)學院碩士研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。學位論文中除了特別加以標注和致謝的地方外，不包含其他人或其它機構已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究的啟發(fā)和所做的貢獻均已在學位論文中作了明確的說明并表示了謝意。學位論文作者簽名鋤諞毫簽字日期訪I乙年R月刁日遵義醫(yī)學院學位論文版權使用授權書本人完全了解遵義醫(yī)學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即遵義醫(yī)學院有權保留并向有關部門或機構送交學位論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權遵義醫(yī)學院可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以公布學位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其它復制手段保存學位論文，即遵義醫(yī)學院具有學位論文的數(shù)字化制品復制權，信息網(wǎng)絡傳播權和匯編權。保密的學位論文在解密后適用本授權書。學位論文作者簽名螄黿／簽字日期訓乙年丁月哆日導師虢‘協(xié)鞏簽字日期M7，年S7月矽日

簡介：北京協(xié)和醫(yī)學院中國醫(yī)學科學院整形外科醫(yī)院學校代碼10023學號S2012004025碩士學位論文專業(yè)學位單側完全性唇腭裂及非唇腭裂上頜后縮的上頜骨特征研究所院姓名指導教師導師小組學科專業(yè)研究方向完成日期整形外科醫(yī)院姜嬋媛尹寧北尹寧北趙振民王永前外科學整形外科20】S4】2北京協(xié)和醫(yī)學院中國醫(yī)學科學院整形外科醫(yī)院目錄㈣Y28㈣1必8128中文摘要56英文摘要一78前言9。10U日Ⅱ舌。1第一部分研究目的和內(nèi)容1116第二部分結果1719第三部分討論一一2O21第四部分結論22文獻綜述一2327參考文獻一2833附錄3442致謝43

簡介：目的通過觀察酒精性肝纖維化形成過程中肝組織內(nèi)骨調(diào)素OSTEOPONTIN、OPN、CD68、CD44S、ΑSMA變化規(guī)律及其相互關系初步探討骨調(diào)素在酒精性肝纖維化形成過程中的作用及其機制方法用56％酒精玉米油吡唑混合液灌胃制造酒精性肝纖維化大鼠模型選用純系SPRAGUEDAWLEY雄性大鼠66只體重在180G200G之間56％酒精選用食用酒精配制而成吡唑為SIGMA公司產(chǎn)品由北京中山生物公司購得將大鼠隨機分成6組每組11只A組為正常對照組予以正常飲食B組、C組、D組、E組、F組大鼠每天清早用56％酒精玉米油吡唑混合液灌胃另外間斷給予高脂飼料其中56％酒精的攝入量為8GKGD12GKGD第14周8GKGD、第58周10GKGD、第916周12GKGD隨時間的延長而遞增玉米油的攝入量為2GKGD吡唑的攝入量為24MGKGD造模過程中要不斷觀察動物一般狀況及體重的變化并每周稱重一次根據(jù)體重調(diào)整酒精、玉米油、吡唑的攝入量B組、C組、D組、E組、F組分別于灌胃2周、4周、8周、12周、16周后行股靜脈采血處死大鼠并留取肝組織標本分別測定肝功能ALT、AST、血清肝纖維化指標HA、LN、CⅣ并作肝組織常規(guī)HE、MASSON膠原染色及通過免疫組化染色、原位雜交技術動態(tài)觀察肝組織中骨調(diào)素、CD68、ΑSMA、CD44S表達、分布狀況、定量和相關分析結論在酒精性肝纖維化大鼠模型中OPN在肝組織中表達顯著上調(diào)并可能在酒精性肝纖維化的發(fā)病過程中發(fā)揮重要的作用

簡介：目的通過對比應用THOFIX重建外固定架和帶血管腓骨移植術治療脛骨大段骨缺損的臨床療效，探討脛骨大段骨缺損的最佳治療方式，從而為脛骨大段骨缺損的治療提供相關佐證。方法收集2010年1月至2014年2月間收治40例40處脛骨大段骨缺損患者資料，分兩組，一組采用THOFIX重建外固定架進行骨延長治療，另一組采用帶血管腓骨移植技術治療。所有患者去除硬化骨、死骨后，行THOFIX重建外固定架或腓骨移植前測量骨缺損長骨。THOFIX重建外固定架治療組于截骨術后第7～10天開始行骨搬運，1MMD，均勻分4次。帶血管腓骨移植治療組腓骨移植后行外固定支架固定或石膏外固定。兩組均記錄骨痂形成時間、外固定佩戴時間。拆除外固定架后，根據(jù)X線片計算THOFIX重建外固定架治療組的骨痂直徑率CDR及帶血管腓骨移植治療組的最小骨痂直徑與骨缺損端比率。根據(jù)ENNEKING評分標準評價治療效果，根據(jù)膝關節(jié)HSS、踝關節(jié)BAIRDJACKSON功能評分標準對患者術前術后關節(jié)功能進行評分，收集整理數(shù)據(jù)，進行統(tǒng)計學分析。結果兩組40例患者均得到隨訪，隨訪時間10～48個月，平均185個月。THOFIX重建外固定架治療組平均骨缺損長度950±286CM，帶血管腓骨移植治療組平均骨缺損長度905±238CM，兩組骨缺損長度比P＞005，差異無統(tǒng)計學意義。THOFIX重建外固定架治療組和帶血管腓骨移植治療組平均骨痂形成時間分別為88個月、78個月，平均外固定時間分別為116個月、130個月。THOFIX重建外固定架治療組的骨痂直徑率CDR平均為088±004，帶血管腓骨移植治療組最小骨痂直徑與骨缺損端直徑比平均為071±007，兩組比較P＜005，差異具有統(tǒng)計學意義。兩組治療前組間膝關節(jié)HSS評分、踝關節(jié)BAIRDJACKSON評分對比P＞005，差異無統(tǒng)計學意義。治療前后自身對比，各評分均明顯改善（P＜005），均有統(tǒng)計學差異。術后兩組間對比，THOFIX重建外固定架治療組在ENNEKING評分、膝關節(jié)HSS評分、踝關節(jié)BAIRDJACKSON評分方面均優(yōu)于帶血管腓骨移植治療組P＜005，差異具有統(tǒng)計學意義。結論1應用THOFIX重建外固定架和帶血管腓骨移植術治療脛骨大段骨缺損均有良好的臨床效果。2應用THOFIX重建外固定架治療脛骨大段骨缺損比采用帶血管腓骨移植術效果更加顯著，所需時間短、功能恢復更好。3應用THOFIX重建外固定架治療脛骨大段骨缺損具有安全、微創(chuàng)、操作簡單并能早期功能鍛煉等優(yōu)點，更適合基層醫(yī)院開展。4帶血管腓骨移植術治療脛骨大段骨缺損的最小骨痂直徑與骨缺損端比率較小，容易發(fā)生再骨折，故適當延長堅強外固定6個月以上對確保療效十分必要。

簡介：目的比較骨性關節(jié)炎OSTEOARTHRITIS，OA患者和健康人群的雌激素受體ER基因及Ⅱ型膠原C0L2A1基因限制性片段長度多態(tài)性RFLP，分析兩種基因的不同基因表型與骨密度BMD、軟骨寡聚基質蛋白COMP等骨及軟骨代謝相關指標的關系，為進一步明確0A的遺傳發(fā)病機制，從分子遺傳角度篩查0A高危人群，進行早期預防以及在臨床開展基因診斷和治療提供必要的理論依據(jù)。研究運動與OA發(fā)生的關系，為進一步明確運動在OA預防和治療中的作用以及運動療法的設置和實施提供科學依據(jù)。方法采用聚合酶鏈反應一限制性片段長度多態(tài)性PCRRFLP技術檢測70例OA患者和105名健康對照者ER基因BTGⅠ位點和Ⅱ型膠原基因519位多態(tài)性，比較OA組和對照組中兩種基因基因型分布頻率的差別。使用酶聯(lián)免疫吸附法ELISA檢測受試者血清中COMP水平，比較OA組和對照組COMP、BMD等指標的差別，分析基因多態(tài)性與COMP、BMD的相關性。根據(jù)受試者運動情況將其分為運動組102人和非運動組73人，分析運動與OA發(fā)生頻率的關系。結果10A組與對照組ER基因BTGⅠ位點在基因型頻率分布上存在顯著性差異P005。3OA組的COMP水平明顯高于對照組，具有顯著性差異P005，且與ER基因BTGⅠ多態(tài)性不存在相關性。5OA組與對照組在體重及體重指數(shù)BMI方面無顯著性差異P005。6運動組的OA發(fā)生頻率明顯低于非運動組，具有顯著性差異P005。結論1ER基因BTGⅠ位點的多態(tài)性與OA的發(fā)生有關，ER等位基因型的改變很可能參與了OA的發(fā)病，BB基因型是OA的危險基因型。而COL2A1上519位點多態(tài)性與OA無關。2COMP在OA患者血清中高水平存在，且與ER基因BTGⅠ多態(tài)性具有一定的相關性。COMP能夠反映關節(jié)軟骨退變情況，可作為提示OA發(fā)生發(fā)展的生物學標志物，用于OA的早期診斷及病變檢測。3適度運動能夠降低OA的發(fā)生頻率，對OA發(fā)病起到一定的防治作用。

簡介：分類號密級一UDC論文編G碩士學位論文MASTERTHESIS加載水平力的微型種植體對幼犬下頜骨生長發(fā)育的影響許穎華大連醫(yī)科大學學位論文版權使用授權書本學位論文作者及指導教師完全了解大連醫(yī)科大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意大連醫(yī)科大學保留并向國家有關部門或機構送交學位論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權大連醫(yī)科大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。論文作者簽名指導教師簽名簽字日期夕艘孕_年卓月葒日攔

簡介：骨組織的損傷與修復一直是臨床課題研究的難點與熱點。對于骨組織的再生不足的問題，研究者一直期望能夠找到適宜的條件或理想的種子細胞來促進骨的再生與修復。2003年原林教授提出的“筋膜學”認為人體是由尚未分化的非特異性結締組織（筋膜）支架所構成的“支持與儲備系統(tǒng)”和以已分化功能細胞為基礎的“功能系統(tǒng)”共同構成。支持與儲備系統(tǒng)不斷的為功能系統(tǒng)的更新和功能活動提供源源不斷的營養(yǎng)物質，功能系統(tǒng)在支持與儲備系統(tǒng)支持下維持結構與功能的穩(wěn)定。功能系統(tǒng)的功能發(fā)揮要基于已經(jīng)特化了的功能細胞的基礎之上，而支持與儲備系統(tǒng)的筋膜支架是以干細胞為核心，通過分化出各種定向干細胞，為功能系統(tǒng)的更新提供源源不斷的細胞補充，并為功能系統(tǒng)的各種細胞的更新、代謝提供一個穩(wěn)定的內(nèi)部環(huán)境。受損組織器官的修復過程實際是支持儲備系統(tǒng)中未完全分化的細胞向該組織器官內(nèi)原有細胞定向分化的補充的過程，并且為功能系統(tǒng)中細胞的新陳代謝提供營養(yǎng)物質，維持其內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。間充質細胞的多組織來源與筋膜結締組織支架的全身分布是一致的，其縱向、橫向分化的生物學特性與筋膜學提出的筋膜結締組織對機體的支持儲備作用也是一致的。真皮層的成纖維細胞DFB及脂肪源干細胞ADSCS都是來源于中胚層的間充質細胞，二者在生物學特性及形態(tài)上有相似性，且二者都具有一定的定向分化能力。ADSCS是筋膜中未分化干細胞的一種儲備形式，具有多分化潛能，能夠跨胚層分化。DFB具有產(chǎn)生纖維（膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維）與有機質的功能，尤其在組織修復過程中其分泌功能更加明顯。ADSCS具有低免疫原性，免疫調(diào)節(jié)功能和分泌細胞因子等能力為異體移植提供了有利條件，使脂肪源干細胞成為生物治療的亮點之一。人體參與組織損傷與修復的細胞主要是成纖維細胞與未分化的間充質細胞。骨的損傷修復過程大致可分為血腫的機化，骨痂的形成與塑性三個過程。有研究表明在血腫機化過程中，成纖維細胞也參與了成骨分化的過程。如何能夠最大限度發(fā)揮成纖維細胞的成骨分化潛能一直是研究者關注的焦點。ADSCS由ZUK等人首次發(fā)現(xiàn)并提取培養(yǎng)。與其他成體干細胞比較，ADSCS具有來源廣泛、取材方便，創(chuàng)傷小且不存在免疫排斥反應等優(yōu)點。這類細胞具有較強的增殖能力和多向分化潛能，在適當?shù)恼T導條件下能向成脂肪、成軟骨、成骨、成肌、成神經(jīng)及心肌等定向分化。傳統(tǒng)成骨誘導液成分DMEM10％FBS1％雙抗1％Β甘油酸磷酸鈉01％地塞米松05％維生素C已被證實對成纖維細胞及脂肪源干細胞有一定的成骨誘導分化功能，但其具體機制尚待進一步探索和研究。維甲酸RA是體內(nèi)維生素A的代謝中間產(chǎn)物，有研究表明其對間充質細胞的成骨過程有著重要的調(diào)節(jié)作用。對維甲酸作為成骨誘導因素的研究發(fā)現(xiàn)，維甲酸可以促進胎鼠顱骨閉合和牙齒的生長。國內(nèi)也有研究發(fā)現(xiàn)一定濃度的維甲酸可以成纖維細胞內(nèi)鈣結節(jié)的沉積。傳統(tǒng)成骨誘導液成分與維甲酸二者對間充質細胞的成骨分化誘導效果與機制是否完全相同，這對于間充質細胞作為骨組織工程種子細胞具有重要的意義。目的通過RA與傳統(tǒng)成骨誘導液對DFB與ADSCS兩類間充質細胞成骨誘導的對比，進一步了解不同種類間充質細胞在成骨方面的差異，從而為筋膜學提供更多的理論依據(jù)，并對骨組織工程在骨的再生與修復方面提供更多實踐支持。1、分離并離體培養(yǎng)大鼠ADSCS并對其細胞表面標記物及多向分化潛能進行鑒定2、分離并離體培養(yǎng)大鼠皮膚DFB并對其進行波形蛋白鑒定3、分別使用RA與傳統(tǒng)成骨誘導液對兩類細胞進行為期2周的成骨誘導，檢測各項細胞生長指標，如細胞生長曲線，骨堿性磷酸酶活性，茜素紅染色，RTPCR檢測骨鈣素的表達，分析差異。方法1、取57D齡的SD乳鼠背部皮膚，酶消化法分離、培養(yǎng)DFB。通過形態(tài)學、免疫組化等手段來鑒定其是否為成纖維細胞。2取同只乳鼠的腹股溝脂肪墊，酶消化法分離培養(yǎng)ADSCS。通過形態(tài)學，流式細胞學及多向誘導分化實驗鑒定其是否為ADSCS。3、待細胞分別培養(yǎng)并傳至第3代，用025％胰酶消化下來，用完全培養(yǎng)基重懸，并調(diào)整密度為5104ML接種于六孔板內(nèi)。分別用傳統(tǒng)成骨誘導液與RA誘導2周，每孔2ML細胞懸液。本課題組前期的實驗研究發(fā)現(xiàn)，RA對DFB及對ADSCS誘導影響最大的濃度為105MOLL。本實驗共分為6組DFB空白族，DFB傳統(tǒng)組，DFB維甲酸組，ADSCS空白組，ADSCS傳統(tǒng)組，ADSCS維甲酸組。4、在誘導過程中選取0D、3D、7D、14D、4個時間點繪制各組細胞生長曲線。2周后對各組細胞進行茜素紅染色，骨堿性磷酸酶活性的測定，RTPCR檢測骨鈣素的表達情況。5、統(tǒng)計學方法采用SPSS130統(tǒng)計軟件處理，實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，采用單因素方差分析，分析對比差異。結果1、原代DFB接種到培養(yǎng)瓶內(nèi)48H內(nèi)逐漸貼壁，開始細胞數(shù)量較少，生長緩慢，3D后細胞換液。57D后細胞大量生長，鏡下細胞呈梭形或者多角形，排列緊密，呈旋渦狀。將細胞傳至3代。DFB波形蛋白免疫熒光鑒定，鏡下藍色為DAPI染的胞核部分，綠色為FITC熒光標記，顯示波形蛋白。2、原代ADSCS接種到培養(yǎng)瓶內(nèi)48H內(nèi)逐漸貼壁，開始細胞數(shù)量較少，生長緩慢，3D后細胞換液。57D后細胞大量生長，鏡下細胞與成纖維細胞形態(tài)學相似，呈梭形或者多角形，細胞排列緊密。ADSCS通過流式細胞儀檢測鑒定，脂肪源干細胞表面標記，CD29陽性，CD106陰性，CD49D陰性。體外誘導可向成骨、成脂肪分化。3、從細胞生長曲線圖中我們可以看出，誘導因素的加入減緩了各誘導組細胞的增殖速度?？瞻捉M細胞的增殖速度都高于本類細胞的實驗組。4、DFB與脂ADSCS經(jīng)2周的統(tǒng)成骨誘導與RA誘導后，茜素紅染色均有明顯的鈣結節(jié)著色，而各自的空白對照組則未見著色。各類細胞組間骨堿性磷酸酶檢測P＜005有統(tǒng)計學差異。5、RTPCR檢測結果顯示各干預組均有骨鈣素的表達，空白組則未見表達。結論1、來源于DFB與ADSCS都具有長梭形、多角形的形態(tài)學特征，可以形成細胞集落，形態(tài)學上無明顯差異DFB經(jīng)免疫熒光鑒定有大量陽性細胞，可以判定該類細胞絕大多數(shù)為真皮層來源的成纖維細胞。2、ADSCS表面標記物檢測中，特異性表面標志物CD29表達率分別為90％以上，而CD49D陰性表達，而CD106弱表達陽性，說明該類細胞具有干細胞特征的表面標記物，且又不是來源于造血系和上皮系的組織，該類細胞經(jīng)定向誘導后可以成骨、成脂肪，與間充質干細胞多向分化的功能一致?？梢耘袛嘣谥緣|筋膜結締組織中存在未分化間充質干細胞。3、DFB與ADSCS在傳統(tǒng)成骨誘導與RA誘導的情況下，細胞內(nèi)均有鈣結節(jié)的沉積，并且兩類細胞與各自的空白對照組相比骨堿性磷酸酶活性均有顯著升高P＜005。在DFB組中，RA誘導的骨堿性磷酸酶活性比傳統(tǒng)成骨誘導高，而在ADSCS組中，結果卻相反。4、RTPCR檢測結果顯示各干預組均有不同程度的骨鈣素表達。綜上所述，RA與傳統(tǒng)成骨誘導液均可以促進DFB及ADSCS的成骨分化，并且因細胞種類不同而顯著效果不同，其發(fā)生機制仍有待進一步探索研究。筋膜學認為，以干細胞為核心的支持儲備系統(tǒng)在人體正常生理活動、損傷與修復過程中發(fā)揮著重要的作用，它以自身的不斷再生與更新，源源不斷地為功能系統(tǒng)提供必要的營養(yǎng)物質以維持人體各項生理功能。人體的結締組織屬于支持持儲備系統(tǒng)的范疇，在結締組織中蘊含著豐富的成纖維細胞與各種成體干細胞，因此對支持儲備系統(tǒng)功能完全透徹的理解必將對組織損傷與修復有一個全新的認識。