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  • 骨肌 (共10000 份)
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    • 簡介:目的探討SY膠囊對膝骨性關(guān)節(jié)炎的治療作用及其機(jī)制。方法采用小鼠二甲苯耳腫脹模型、小鼠棉球致肉芽腫模型、小鼠乙酸致痛模型、小鼠熱刺激致痛模型,觀察SY膠囊的抗炎鎮(zhèn)痛作用;采用改良HULTH法致兔膝OA模型,從組織形態(tài)學(xué)、關(guān)節(jié)軟骨蛋白聚糖含量、關(guān)節(jié)沖洗液中MMP1、TIMP1、IL1、TNFΑ、TGFΒ含量、血液流變學(xué)等方面,觀察SY膠囊對OA的治療作用及其機(jī)制。結(jié)果1抗炎作用SY膠囊高、中劑量組能降低二甲苯致小鼠耳腫脹度(P2鎮(zhèn)痛作用SY膠囊高、中劑量組能減少乙酸所致的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)(P3對兔膝骨關(guān)節(jié)炎的治療作用SY膠囊高、中劑量組能降低關(guān)節(jié)軟骨損傷大體形態(tài)學(xué)評分(P4對兔膝骨關(guān)節(jié)炎的治療作用機(jī)制研究1對關(guān)節(jié)沖洗液中基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑的影響SY膠囊高、低劑量組能夠降低關(guān)節(jié)沖洗液中MMP1含量(P2對細(xì)胞因子的影響SY膠囊高、低劑量組能降低關(guān)節(jié)沖洗液中IL1含量(P3對血流變的影響SY膠囊各劑量組能降低全血粘度(P結(jié)論SY膠囊具有治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的作用,能改善骨性關(guān)節(jié)炎所表現(xiàn)出的疼痛、腫脹等癥狀;SY膠囊能減輕OA模型兔膝關(guān)節(jié)軟骨和滑膜的病理損傷,降低病理評分,增加軟骨中蛋白聚糖含量,表明其具有減輕軟骨和滑膜損傷,抑制軟骨降解的作用。其作用機(jī)制與降低關(guān)節(jié)沖洗液中IL1、TNFΑ、MMP1含量,改善血液循環(huán)有關(guān)。
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      上傳時(shí)間:2024-03-10
      頁數(shù): 52
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    • 簡介:1分類號密級公開國際十進(jìn)分類號(UDC)第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文微波高溫滅活及自體髂骨異體骨粒復(fù)合骨水泥修復(fù)治療膝關(guān)節(jié)周圍骨巨細(xì)胞瘤(題名和副題名)孫海濱(作者姓名)指導(dǎo)教師姓名周勇教授(主任醫(yī)師)指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院骨科申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱外科學(xué)(骨外)論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時(shí)間2009年03月至2011年04月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)3微波高溫滅活及自體髂骨異體骨粒復(fù)合骨水泥微波高溫滅活及自體髂骨異體骨粒復(fù)合骨水泥修復(fù)治療膝關(guān)節(jié)周圍骨巨細(xì)胞瘤修復(fù)治療膝關(guān)節(jié)周圍骨巨細(xì)胞瘤研究生孫海濱學(xué)科專業(yè)外科學(xué)(骨外)所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院骨科導(dǎo)師周勇教授(主任醫(yī)師)輔導(dǎo)教師楊彤濤副教授關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞自體髂骨;異體骨粒;骨水泥;骨缺損;骨巨細(xì)胞瘤中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)二O一一年四月
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      上傳時(shí)間:2024-03-10
      頁數(shù): 60
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    • 簡介:目的探討骨質(zhì)疏松性骨折愈合困難的原因?yàn)榕R床治療骨質(zhì)疏松性骨折探索新的可行性途徑和方法方法①供體動(dòng)物的準(zhǔn)備雌性SD大鼠40只作為供體動(dòng)物隨機(jī)分為去勢組和對照組每組20只去勢組切除雙側(cè)卵巢以復(fù)制骨質(zhì)疏松模型對照組行偽手術(shù)4個(gè)月后處死動(dòng)物取肢體長骨分別行骨礦含量測定及骨基質(zhì)明膠制備②骨基質(zhì)明膠植入物的制備將聚自去勢組和對照組的長骨分別去除骨膜、骨髓按URIST方法制備骨基質(zhì)明膠③體內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)雌性SD大鼠17只作為宿主動(dòng)物雙側(cè)股部切開左、右側(cè)肌袋分別植入去勢動(dòng)物骨基質(zhì)明膠和對照動(dòng)物骨基質(zhì)明膠動(dòng)物飼養(yǎng)14天處死分別取出肌袋植入物組織行性磷酸酶活性、鈣含量測定及組織學(xué)檢查結(jié)論骨質(zhì)疏松骨骼的骨誘導(dǎo)活性較正常骨骼明顯降低表明骨質(zhì)疏松性骨折愈合困難的原因與骨質(zhì)疏松狀態(tài)下骨生長因子的缺乏或功能減退有關(guān)提示通過補(bǔ)充外源性骨生長因子或促進(jìn)內(nèi)源性骨生長因子的表達(dá)加強(qiáng)骨誘導(dǎo)可能是治療骨質(zhì)疏松性骨折有效的途徑和方法
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      上傳時(shí)間:2024-03-12
      頁數(shù): 59
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    • 簡介:目的對三維立體泡沫狀7525PLGA材料支架生物相容性及成骨能力進(jìn)行初步研究探討材料進(jìn)行藻酸鈣改性后的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和成骨能力觀察改性材料復(fù)合生物活性因子VEGF、RHBMP2后產(chǎn)生骨誘導(dǎo)作用的可行性評價(jià)PLGA支架在矯形外科應(yīng)用的前景通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證可吸收的骨構(gòu)建材料的可靠性為進(jìn)一步的材料應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)1PLGAPLGACAGPLGACAGRHBMP2和PLGACAGVEGF符合骨缺損修復(fù)需要的材料2上述的體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示PLGAPLGACAGPLGACAGRHBMP2PLGAGAGVEGF有良好的生物相容性CAGRHBMP2和VEGF都具有提高成骨能力的作用3MTT法是一種檢測成骨細(xì)胞增殖的好方法大鼠成骨細(xì)胞適合用于骨組織生物材料細(xì)胞毒性檢測4PLGACAG復(fù)合物具有良好骨傳導(dǎo)能力并提高了成骨的質(zhì)量PLGACAG是一種新型的骨植入材料5藻酸鈣改性的三維多孔立體泡沫狀PLGA材料是RHBMP2、VEGF的良好載體并具有良好的成骨能力能有提高骨形成的速度、數(shù)量和質(zhì)量
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      上傳時(shí)間:2024-03-12
      頁數(shù): 63
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    • 簡介:骨質(zhì)疏松癥OSTEOPOSISOP是老齡化社會(huì)中影響健康的一個(gè)嚴(yán)重問題許多國家為此投入了大量經(jīng)費(fèi)進(jìn)行研究近年來我國正逐步向老齡化社會(huì)過渡老年性骨質(zhì)疏松癥患者迅速增加據(jù)估計(jì)目前我國的骨質(zhì)疏松患者已超過九千萬人骨質(zhì)疏松的重點(diǎn)是防而不是治只有做到早期診斷才能做到早期預(yù)防因此骨質(zhì)疏松癥的診斷成為國際學(xué)術(shù)界和醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)和前沿課題作為臨床工作的基礎(chǔ)松質(zhì)骨狀況評價(jià)及骨質(zhì)疏松癥診斷的新參量及其方法的研究顯得尤其重要超聲技術(shù)因費(fèi)用低、無電離輻射、簡便、速度快、可攜帶等優(yōu)點(diǎn)而在診斷骨質(zhì)疏松癥方面受到廣泛關(guān)注并取得了很大的進(jìn)展然而現(xiàn)有用透射法測量的超聲傳導(dǎo)速度SOS和寬帶超聲衰減BUA雖與骨礦密度BMD有高度的相關(guān)性但不能全面反映松質(zhì)骨質(zhì)量及骨微結(jié)構(gòu)信息而松質(zhì)骨中的散射很少受到重視本課題的目的是探索用超聲背散射信號評價(jià)松質(zhì)骨狀況及其診斷骨質(zhì)疏松癥的新參量及新方法分析并探討背散射信號及其系數(shù)在診斷骨質(zhì)疏松癥中的作用并用背散射信號測量骨小梁的間距等得到對超聲診斷骨質(zhì)疏松癥有直接意義的結(jié)果在理論上分析了超聲在松質(zhì)骨中的傳播特性及散射機(jī)理建立了一種蜂窩狀的松質(zhì)骨理論散射模型并分析了散射對超聲衰減的影響在實(shí)驗(yàn)上采用背散射法測量背散射信號及其背散射系數(shù)和背散射信號的頻譜最大值偏移量SMS等參量并進(jìn)行了詳細(xì)的分析和討論最后采用AR倒譜法分析了牛脛骨、人尸體跟骨和人在體跟骨松質(zhì)骨中骨小梁的平均間距分析結(jié)果表明1超聲波的傳播方向和骨小梁方向的夾角在60°附近快縱波和慢縱波的相速度都有一個(gè)轉(zhuǎn)折點(diǎn)入射角度在60°以上角度越大時(shí)骨髓和骨小梁被鎖得越緊因此阻止了慢縱波的傳播2超聲通過純水后的幅度譜和功率譜最大通過松質(zhì)骨時(shí)快縱波的幅度譜和功率譜較大而慢縱波的幅度譜和功率譜最小在松質(zhì)骨中慢縱波的衰減大于快縱波的衰減3由于散射而引起的衰減占松質(zhì)骨中總的超聲衰減的26﹪左右4從牛脛骨、人尸體跟骨和人在體跟骨松質(zhì)骨的背散射實(shí)驗(yàn)及理論分析結(jié)果中發(fā)現(xiàn)背散射系數(shù)隨入射頻率和松質(zhì)骨表觀密度的增加而非線性的增加一般整個(gè)背散射系數(shù)曲線可以分成三段第一段和第三段背散射系數(shù)的斜率較大而第二段背散射系數(shù)的斜率較平坦5隨松質(zhì)骨表觀密度的增大背散射信號頻譜的最大值向低頻方向的偏移量增大根據(jù)其頻譜最大值偏移量SMS的大小可評價(jià)其松質(zhì)骨狀況和患骨質(zhì)疏松的程度6松質(zhì)骨的密度與骨小梁的平均間距成一定的關(guān)系隨松質(zhì)骨表觀密度的減小骨小梁的平均間距增大在用超聲評價(jià)松質(zhì)骨狀況及診斷骨質(zhì)疏松癥時(shí)背散射信號具有重要作用背散射系數(shù)BSC和頻譜最大值偏移量SMS可以用于評價(jià)松質(zhì)骨狀況和骨質(zhì)疏松癥的診斷中用背散射法測量背散射信號時(shí)只用單一換能器使骨超聲診斷設(shè)備更簡單其實(shí)現(xiàn)方式在將來松質(zhì)骨狀況的評價(jià)及骨質(zhì)疏松癥的臨床診斷中有更理想的可操作性
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      上傳時(shí)間:2024-03-10
      頁數(shù): 106
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    • 簡介:後旦大學(xué)博士學(xué)位論文學(xué)校代碼10246學(xué)號10111220029分娩性臂叢麻痹手內(nèi)肌與肱二頭肌中影響失神經(jīng)肌肉萎縮進(jìn)程的蛋白質(zhì)表達(dá)差異的基礎(chǔ)研究EXPERIMENTALSTUDYOFDIFFERENTIALPROTEINEXPRESSIONINTHEATROPHYOFDENERVATEDINTRINSICMUSCLEOFANTERIORPAWANDBICEPSMUSCLEINDUCEDBYOBSTETRICBRACHIAIPLEXUSPALSY院系學(xué)科、專業(yè)博士生導(dǎo)師導(dǎo)師組成員完成日期華山醫(yī)院外科學(xué)手外科陳樂滋陳亮教授顧玉東院士董震教授重展教搜胡韶楠副教授2013年4月3日本課題由國家自然科學(xué)基金81171777資助ITRAQTUNELROSGOCCMFBPPPARPEBPLMAPK英文縮略語ISOBARICTAGSFORRELATIVEANDABSOLUTEQUANTIFICATIONTERMINALDEOXYNUCLEOTIDYLTRANSFERASEMEDIATEDNICKENDLABELINGREACTIVEOXYGENSPECIESGENEONTOLOGYCELLULARCOMPONENTMOLECULARFUNCTIONBIOLOGICALPROCESSPEROXISOMEPROLIFERATORACTIVATEDRECEPTORPHOSPHATIDYLETHANOLAMINEBINDINGPROTEIN1MITOGENACTIVATEDPROTEINKINASE
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      上傳時(shí)間:2024-03-10
      頁數(shù): 96
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    • 簡介:目的一般認(rèn)為,退變性腰椎側(cè)凸是指在骨骼發(fā)育成熟之后,在冠狀面上出現(xiàn)的側(cè)凸COBB角大于10度的脊柱畸形。其發(fā)病原因復(fù)雜,病程相對較長,呈逐漸發(fā)展性趨勢其大多發(fā)生于50歲以上的中老年人,且發(fā)生率約為6~68%隨著年齡的增長發(fā)病率逐漸增加。在成年人脊柱側(cè)凸患者中,退變性腰椎側(cè)凸常伴有明顯的腰痛、神經(jīng)根源性疼痛和間歇性跛行,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。因此,研究其發(fā)病原因,制定合理有針對性的治療方案,已經(jīng)成為廣大脊柱外科醫(yī)生的研究目標(biāo)。近年來,對其形成和發(fā)展的相關(guān)因素研究較多,認(rèn)為椎間盤和關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)不對稱性退變是其發(fā)病的原因,且始于椎間盤退變同時(shí)認(rèn)為側(cè)凸的進(jìn)展與椎間盤退變、椎間盤不對稱、骨密度等因素有關(guān)。但它的具體機(jī)制仍然不清楚。椎旁肌,首先,對維持脊柱穩(wěn)定性發(fā)揮著重要作用其次,它是軀干活動(dòng)的主要?jiǎng)恿ψ詈?,它作為人體軀干姿勢反射弧的效應(yīng)器,與脊柱畸形也存在非常密切的關(guān)系。目前,國內(nèi)外專家學(xué)者對其與青少年特發(fā)性、先天性脊柱側(cè)凸和脊柱后凸等的相關(guān)研究較多,對退變性腰椎側(cè)凸與椎旁肌的研究相對較少。我們應(yīng)用MRI為評估手段,探究退變性腰椎側(cè)凸患者兩側(cè)椎旁肌的退變,并分析其退變與椎體側(cè)方移位、腰椎側(cè)凸角、腰椎前凸角和頂椎旋轉(zhuǎn)的關(guān)系,旨在揭示椎旁肌退變在退變性腰椎側(cè)凸的發(fā)生、發(fā)展中的重要作用,為退變性腰椎側(cè)凸的預(yù)防和治療提供理論依據(jù)。方法采用系統(tǒng)回顧性研究的方法,選取2005年6月2012年12月78例無神經(jīng)癥狀的退變性腰椎側(cè)凸患者為研究對象(側(cè)凸組),選取同時(shí)期無腰椎側(cè)凸和神經(jīng)癥狀的腰椎退行性疾病患者為對照組兩組間性別、年齡和體質(zhì)量質(zhì)數(shù)相匹配,所有的患者都自愿地參加本次試驗(yàn),并答應(yīng)在試驗(yàn)過程中盡自的義務(wù)。所有患者均行腰椎X線和MRI檢查。應(yīng)用IMAGEJ軟件測量2組MRIT2WI上L1S1椎間盤水平兩側(cè)椎旁肌的脂肪浸潤百分比,具體方法如下首先測量椎旁肌的面積,即利用T2WI取L1S1椎間盤平掃(3層),選取中間層為研究對象,其橫截面積均由IMAGEJ軟件測量,其結(jié)果為“A”然后,測量椎旁肌脂肪浸潤面積,即采用IMAGEJ閾值技術(shù),在閾值技術(shù)應(yīng)用時(shí),脂肪組織為紅色,測量其面積,其結(jié)果為“B”最后,得出多裂肌脂肪浸潤百分比BA100%。所測數(shù)據(jù)應(yīng)用配對T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,如兩側(cè)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,用不對稱度描述椎旁肌的不對稱性,其數(shù)值為兩側(cè)脂肪浸潤百分比的差值。兩側(cè)多裂肌脂肪浸潤百分比首先進(jìn)行配對T檢驗(yàn)比較,如兩側(cè)多裂肌脂肪浸潤百分比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其差值為不對稱度,用不對稱度描述椎旁肌不對稱退變。側(cè)凸組在腰椎正位X線上測量腰椎側(cè)凸角、頂椎旋轉(zhuǎn)和椎體側(cè)方移位,在腰椎側(cè)位X線上測量腰椎前凸角。分析椎旁肌退變不對稱度與椎體側(cè)方移位、腰椎側(cè)凸角、腰椎前凸角和頂椎旋轉(zhuǎn)程度的關(guān)系。結(jié)果1、側(cè)凸組凸側(cè)和凹側(cè)多裂肌脂肪浸潤百分比在L12,L23,L34,L45,L5S1水平分別為1013%±537%,1128%±718%,1604%±990%,2483%±1164%3510%±1445%和1544%±708%2237%±1153%2648%±1168%,3707%±1511,4413%±1791%,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義T7452,9858,10223,10295,8730P<005,凹側(cè)大于凸側(cè)。其不對稱度為1008%±680%。相關(guān)性分析示不對稱度與腰椎側(cè)凸角,椎體側(cè)方移位和頂椎旋轉(zhuǎn)存在正相關(guān)(0<R<1,P<005),與腰椎前凸角呈負(fù)相關(guān)1<R<0,P<005?;貧w分析顯示腰椎側(cè)凸角及腰椎前凸角與不對稱度存在直線回歸關(guān)系F80762和6658,P<005。2、對照組左側(cè)和右側(cè)多裂肌脂肪浸潤百分比在L12,L23,L34,L45,L5S1水平之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義T0609,1649,0666,1256,1503P>005。結(jié)論退變性腰椎側(cè)凸兩側(cè)椎旁肌存在不對稱性退變,凹側(cè)大于凸側(cè)腰椎側(cè)凸角越大、腰椎前凸角減小、頂椎旋轉(zhuǎn)越重和椎體側(cè)方移位會(huì)加重這種不對稱度椎旁肌不對稱性退變對判斷脊柱側(cè)凸的進(jìn)展具有潛在的臨床意義。
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    • 簡介:目的制作絲素蛋白羥基磷灰石復(fù)合物SILKFIBROINHYDROXYAPATITECOMPOSITESFHA,并觀察其對磷酸鈣骨水泥CALCIUMPHOSPHATECEMENTCPC力學(xué)性能的影響,同時(shí)評估改性后磷酸鈣骨水泥其他方面性能。方法1通過絲素蛋白的礦化自組裝方法制備絲素蛋白羥基磷灰石復(fù)合物,利用傅里葉紅外光譜分析儀FTIR及X線衍射儀XRD對此復(fù)合物進(jìn)行組成基團(tuán)及晶體結(jié)構(gòu)的表征。2按照1、2、3、4的質(zhì)量分?jǐn)?shù)將其與絲素蛋白溶液一起加入磷酸鈣骨水泥中,制作各組磷酸鈣骨水泥固化樣品,測定各組磷酸鈣骨水泥的抗壓強(qiáng)度,并與CPC加去離子水固化組對比。3觀察絲素蛋白溶液對磷酸鈣骨水泥抗?jié)⑸⑿阅艿挠绊憽?X線衍射儀對改良前后磷酸鈣骨水泥固化產(chǎn)物晶體結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征,掃描電鏡觀察橫斷面表面形貌。5各組材料浸出液培養(yǎng)成骨細(xì)胞,MTT法評價(jià)絲素蛋白溶液及絲素蛋白羥基磷灰石復(fù)合物對磷酸鈣骨水泥細(xì)胞毒性的影響。結(jié)果1FTIR及XRD結(jié)果顯示制得產(chǎn)物為絲素蛋白羥基磷灰石復(fù)合物;2以去離子水固化組磷酸鈣骨水泥的抗壓強(qiáng)度約為31MPA,絲素蛋白溶液為液相組強(qiáng)度提高到約35MPA(P結(jié)論在磷酸鈣骨水泥中加入3WT的絲素蛋白羥基磷灰石復(fù)合物,能顯著提高磷酸鈣骨水泥的抗壓強(qiáng)度。而絲素蛋白溶液作為液相可改善磷酸鈣骨水泥的抗?jié)⑸⑿阅?。絲素蛋白、絲素蛋白羥基磷灰石復(fù)合物的加入對固化終產(chǎn)物的成分無明顯改變。同時(shí),絲素蛋白、絲素蛋白羥基磷灰石復(fù)合物都不表現(xiàn)出細(xì)胞毒性。
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    • 簡介:本文介紹了表面肌電的產(chǎn)生機(jī)理、研究意義及其檢測分析方法,著重論述了表面肌電信號在肌肉疲勞研究中的意義和各種研究方法。采用可重復(fù)性好、受噪聲影響小的電刺激方式誘發(fā)表面肌電信號SEMG。用恒流源電刺激器刺激腓總神經(jīng),得到的誘發(fā)肌電信號放大和數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)采用專用生理信號測量系統(tǒng)來實(shí)現(xiàn),有效的降低了噪聲的影響。采用小波分析的方法研究肌肉疲勞過程中表面肌電信號的變化特征。在匹配濾波理論的基礎(chǔ)上,選擇與M波形狀匹配的墨西哥帽小波函數(shù),根據(jù)其兩個(gè)半波的小波變換系數(shù)模極大值與尺度的關(guān)系,分別分析兩個(gè)半波在時(shí)域波形的擴(kuò)展程度,定義以小波變換尺度為主要依據(jù)的肌肉疲勞指數(shù),實(shí)現(xiàn)疲勞狀態(tài)的定量描述。同時(shí)給出了用傳統(tǒng)中值頻率法的分析結(jié)果和LIPSCHITZ指數(shù)的分析結(jié)果。疲勞肌電的小波分析法克服了傅里葉變換在時(shí)域中沒有分辨率,信號在某一時(shí)刻變化將影響整個(gè)頻譜特性的缺點(diǎn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有較好的重復(fù)性。在此基礎(chǔ)上確定特異性和可靠性良好的表征肌肉疲勞的SEMG指標(biāo),為進(jìn)一步應(yīng)用這些指標(biāo)評價(jià)肌肉功能狀態(tài)提供理論依據(jù)。
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    • 簡介:目的從理論角度分析總結(jié)老年性骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病原因,并通過實(shí)驗(yàn)研究探討骨碎補(bǔ)總黃酮對骨髓基質(zhì)細(xì)胞脂質(zhì)化的影響,以及對成骨細(xì)胞衰變和凋亡的影響,從臨床角度觀察其治療老年性骨質(zhì)疏松癥的效果,為臨床應(yīng)用提供科學(xué)理論依據(jù)。方法臨床研究選擇股骨近端BMD較同性別年輕成人均值低25SD以上,診斷為老年性骨質(zhì)疏松癥者70例。采用隨機(jī)對照的方法,分為治療組口服強(qiáng)骨膠囊36例,對照組口服鈣爾奇D34例,依據(jù)對腰背痛及腰痛綜合評分進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察;依據(jù)“疼痛VAS線段分級法”對腰背痛靜止痛、翻身痛、久坐痛、起身痛、彎腰痛、步行痛、睡眠痛、叩擊痛、壓痛進(jìn)行量化動(dòng)態(tài)觀察;依據(jù)“BARTHEL指數(shù)評定法”對老年性骨質(zhì)疏松癥日常生活活動(dòng)能力ADL進(jìn)行觀察;采用雙能X線骨密度儀對腰椎L2L4、股骨近端各部位股骨頸NECK、股骨三角區(qū)WARD、股骨粗隆TROCH進(jìn)行骨密度BMD定量檢測;應(yīng)用放射免疫法對骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)進(jìn)行測定,骨形成指標(biāo)骨鈣素BGP、I型前膠原氨基端前肽PINP;骨吸收指標(biāo)I型膠原交聯(lián)羧基末端肽ICTP等,評價(jià)骨碎補(bǔ)總黃酮治療老年性骨質(zhì)疏松癥的臨床效果。實(shí)驗(yàn)研究通過WST8分析骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞活性的影響;以地塞米松誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞脂質(zhì)化后,建立脂肪細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞的共培養(yǎng)體系,用骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清干預(yù)后,以TUNEL法檢測骨髓基質(zhì)細(xì)胞的凋亡情況;采用三丁基過氧化氫TBHP體外誘導(dǎo)大鼠成骨細(xì)胞衰老,用骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清干預(yù)后,以SAΒ半乳糖苷酶SENESCENCEASSOCIATEDΒGALACTOSIDASE化學(xué)染色,觀察細(xì)胞衰老情況;將大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)于含有腫瘤壞死因子ΑTNFΑ或骨碎補(bǔ)總黃酮加TNFΑ培養(yǎng)基中后,通過熒光染色細(xì)胞核DNA及電鏡下超微結(jié)構(gòu)觀察,檢測成骨細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果1“疼痛六點(diǎn)行為評分法BRS6”觀察結(jié)果顯示,治療前老年性骨質(zhì)疏松癥患者的腰背痛及腰痛多在III~V級之間,疼痛無法忽視,對同常生活有一定的影響。運(yùn)用強(qiáng)骨膠囊骨碎補(bǔ)總黃酮治療3個(gè)月后疼痛分級多降至到I~I(xiàn)I級,自覺疼痛基本消失。說明骨碎補(bǔ)總黃酮在一定程度上能夠改善老年性骨質(zhì)疏松癥引起的腰背痛及腰痛,緩解疼痛的幅度以治療的前3個(gè)月最為明顯。2“疼痛VAS線段分級法”觀察結(jié)果顯示,治療前靜止時(shí)腰背痛、久坐時(shí)腰背痛、步行時(shí)腰背痛均呈現(xiàn)中度疼痛,翻身時(shí)腰背痛、起身時(shí)腰背痛、彎腰時(shí)腰背痛、腰背壓痛與叩擊痛多表現(xiàn)重度疼痛,而以彎腰時(shí)腰背痛、腰背叩擊痛尤為顯著,部分病人腰背痛對睡眠會(huì)有一定影響。運(yùn)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療3個(gè)月后,各種行為方式引起的腰背痛均有不同程度的改善,其中治療1個(gè)月后腰背痛對睡眠的影響較小,治療2個(gè)月后多數(shù)靜止痛、久坐痛基本消失,治療3個(gè)月多數(shù)翻身痛、起身痛、步行痛、壓痛可緩解,但部分病人仍然呈現(xiàn)出一定程度的彎腰痛和腰背叩擊痛。由此可見,骨碎補(bǔ)總黃酮對老年性骨質(zhì)疏松癥病人靜態(tài)生活方式出現(xiàn)的腰背痛改善迅速且明顯,對動(dòng)態(tài)生活方式引起腰背痛加重,以及外界干預(yù)加重的腰背痛也有一定的作用,但相對較慢。3“BARTHEL指數(shù)評定法”對日常生活活動(dòng)能力ADL進(jìn)行觀察結(jié)果顯示治療前多數(shù)病人BARTHEL指數(shù)評分為60~40分,表現(xiàn)中度殘疾,有功能障礙,生活需要幫助;治療3個(gè)月后積分可達(dá)到90分以上,生活基本自理,生活獨(dú)立性有一定程度的改善,生活質(zhì)量有很大提高。4雙能X線骨密度儀對老年性骨質(zhì)疏松癥腰椎L2L4、股骨近端各部位股骨頸NECK、股骨三角區(qū)WARD、股骨粗隆TROCH進(jìn)行應(yīng)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療前后骨密度BMD定量檢測結(jié)果表明,應(yīng)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療6個(gè)月后各部位BMD均有一定程度的升高;與對照組鈣爾奇D相比,除外腰椎L2L4的骨密度改善程度無差異,骨碎補(bǔ)總黃酮的治療效果更為明顯,二者對比,有顯著性差異。說明骨碎補(bǔ)總黃酮對老年性骨質(zhì)疏松癥具有提高整體骨量的作用,同時(shí)能夠提高股骨近端骨強(qiáng)度,預(yù)防髖部骨折。5骨代謝標(biāo)志物檢測結(jié)果表明,老年性骨質(zhì)疏松癥BGP、PINP比較正常成年人均有一定程度降低,說明老年性骨質(zhì)疏松癥成骨細(xì)胞功能衰退,合成膠原減少,成骨能力較弱;運(yùn)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療6個(gè)月后,BGP、PINP均有一定程度上升,說明骨碎補(bǔ)總黃酮具有促進(jìn)低轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥骨膠原的合成,提高骨轉(zhuǎn)換,增加骨形成等作用。老年性骨質(zhì)疏松癥ICTP比較正常成年人有一定程度升高,說明老年性骨質(zhì)疏松癥骨溶解增加,骨吸收相對較快。運(yùn)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療6個(gè)月后,ICTP有一定程度上降低,說明骨碎補(bǔ)總黃酮具有減緩低轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥骨吸收狀況的功效。6骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞活性的影響研究結(jié)果表明,經(jīng)骨碎補(bǔ)總黃酮干預(yù)后大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞數(shù)量顯著增加,說明骨碎補(bǔ)總黃酮能夠提高大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的活性,并具有促進(jìn)其增殖分裂的作用。7骨碎補(bǔ)總黃酮對TNFΑ誘導(dǎo)的大鼠成骨細(xì)胞凋亡的抑制作用研究結(jié)果表明,在用空白血清培養(yǎng)的成骨細(xì)胞中加入TNFΑ,可見到成骨細(xì)胞出現(xiàn)凋亡征象,凋亡的成骨細(xì)胞顯著增多;而用骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清培養(yǎng)的成骨細(xì)胞,凋亡細(xì)胞明顯減少,雖然仍有細(xì)胞凋亡的形態(tài)改變,但可部分對抗TNFΑ所致的成骨細(xì)胞凋亡。8骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對脂質(zhì)化大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用研究結(jié)果表明,脂肪細(xì)胞能夠誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的凋亡,用骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清干預(yù)后,凋亡細(xì)胞明顯減少,說明骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對脂質(zhì)化大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用。9骨碎補(bǔ)總黃酮對大鼠成骨細(xì)胞衰老的影響研究表明,經(jīng)TBHP處理后的成骨細(xì)胞SAΒ半乳糖苷酶的細(xì)胞化學(xué)染色陽性的細(xì)胞數(shù)明顯增多,而用骨碎補(bǔ)總黃酮干預(yù)的衰老細(xì)胞明顯減少,說明骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對TBHP誘導(dǎo)的大鼠成骨細(xì)胞衰老具有保護(hù)作用。結(jié)論1隨著人類壽命的延長和人口老齡化,老年性骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率逐漸增加,嚴(yán)重危害著老年人的健康和生命。2老年性骨質(zhì)疏松癥是機(jī)體自然衰退、老化過程的組成部分,骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化方向改變和成骨細(xì)胞的生物學(xué)功能衰退是其發(fā)病的細(xì)胞病理學(xué)基礎(chǔ),而五臟虛損和氣血功能紊亂與其發(fā)病密切相關(guān),其中腎虛為其核心病機(jī)。3臨床研究表明骨碎補(bǔ)總黃酮具有促進(jìn)老年性骨質(zhì)疏松癥骨膠原的合成,提高骨轉(zhuǎn)換,增加骨形成,減緩骨吸收狀況等作用,進(jìn)而提高老年性骨質(zhì)疏松的整體骨量,緩解腰背痛,提高股骨近端骨強(qiáng)度,預(yù)防髖部骨折,提升獨(dú)立性生活水準(zhǔn),全面提高老年性骨質(zhì)疏松癥患者的生命質(zhì)量。4實(shí)驗(yàn)研究表明骨碎補(bǔ)總黃酮能夠提高大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的活性,促進(jìn)其增殖分裂,并對脂質(zhì)化大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用,而且骨碎補(bǔ)總黃酮含藥血清對TNFΑ誘導(dǎo)的大鼠成骨細(xì)胞凋亡和TBHP誘導(dǎo)的大鼠成骨細(xì)胞衰老均具有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果說明,骨碎補(bǔ)總黃酮對增強(qiáng)老年性骨質(zhì)疏松癥成骨作用具有重要的意義。
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    • 簡介:浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文納米陶瓷仿生人工骨的研制及體內(nèi)外活性研究姓名徐俊華申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師王慧明20040501浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文植入四種支架材料和一空白對照,共計(jì)8只其中4只單純植入支架材料,另4只植入自體成骨細(xì)胞材料復(fù)合培養(yǎng)塊。分別在2、4、8、12周處死兔子,數(shù)字X線、常規(guī)組織切片觀察支架材料在體內(nèi)的組織相容性、生物括性。結(jié)果精制的I膠原吸光度在225NM左右,甘氨酸含量24857,不含色氨酸凍干I型膠原支架呈疏松海綿狀,具有100300UM的孔徑和90%以上的孔隙率。兩種納米陶瓷人工骨支架材料呈疏松海綿狀,具有100300UM的孔徑和90%以上的孔隙率,X線衍射分析內(nèi)部納米陶瓷為納米尺度,晶體發(fā)育不完善,具有類似天然骨的結(jié)構(gòu),掃描電鏡觀察兩種納米磷酸鹽均沉積在膠原支架表面,類似于天然骨中磷酸鹽排列在膠原表面的結(jié)構(gòu)。兔基質(zhì)細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)擴(kuò)增、誘導(dǎo)后具有典型的成骨細(xì)胞形態(tài)特征。堿性磷酸酶染色陽性鈣化結(jié)節(jié)VONKOSSA染色陽性,細(xì)胞周期及DNA分析GOGI的比例為893%G2S的比例為107%。G2/G1的DNA含量比為1956。兔成骨細(xì)胞細(xì)胞在支架材料周圍表面生長良好具有成骨細(xì)胞典型形態(tài)。四種支架材料植入兔顱骨缺損模型對比研究,未出現(xiàn)急性或慢性的免疫排斥,兩種納米陶瓷人工骨內(nèi)在4周左右出現(xiàn)大量新生毛細(xì)血管,12周新生骨完全修復(fù)骨缺損,并形成成熟的骨小梁結(jié)構(gòu)。對照支架不能完全修復(fù)顱骨缺損,納米陶瓷人工骨約3個(gè)月左右降解完全。成骨細(xì)胞支架材料復(fù)合培養(yǎng)組成骨速度快于同期單純材料植入組。結(jié)論精制膠原符合I型膠原特征,凍干I型膠原塊具有適合作為人工骨支架材料的空間結(jié)構(gòu)。兔基質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)擴(kuò)增、誘導(dǎo)可以分化為成骨細(xì)胞,并具有高增殖能力,適合作為骨組織工程的種子細(xì)胞。兩種納米陶瓷人工骨支架材料具有與天然骨類似的微觀結(jié)構(gòu)和適宜作為人工骨支架材料的三維空間結(jié)構(gòu)接種在四種支架材料上復(fù)合培養(yǎng)未發(fā)現(xiàn)材料細(xì)胞毒性,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)具有良好的成骨效果和適宜的體內(nèi)降解速率,并具有優(yōu)良的生物活性,具有骨傳導(dǎo)和骨引導(dǎo)的優(yōu)點(diǎn),成骨效果良好,優(yōu)于顆粒羥基磷灰石/I型膠原復(fù)合人工骨支架材料和I型膠原支架材料。成骨細(xì)胞支架材料復(fù)臺(tái)培養(yǎng)組成骨效果優(yōu)于同期單純材料植入組。關(guān)鍵詞骨組織工程成骨細(xì)胞骨髓基質(zhì)細(xì)胞納米羥基磷灰石磷酸鈣支架骨生成
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    • 簡介:【目的】通過CT平描及三維重建,設(shè)計(jì)患者下頜模型,擬出所需截骨位置及厚度。測量術(shù)前及術(shù)后12個(gè)月面部軟組織變化與其面部輪廓形態(tài)改變。【研究方法】采集160例下頜角肥大患者,術(shù)前通過,三維重建下頜骨數(shù)字化模型,設(shè)計(jì)所需截骨位置及厚度。術(shù)后一年隨訪CT平掃,測量術(shù)前及術(shù)后12個(gè)月面部咬肌區(qū)和顳肌區(qū)厚度、表面積、體積,同時(shí)測量面部輪廓形態(tài)改變。【結(jié)果】下頜角肥大患者,經(jīng)截骨術(shù)后,術(shù)前與術(shù)后1年中面部軟組織變化明顯。經(jīng)配準(zhǔn)及測量后,所得結(jié)果如下術(shù)前正位雙下頜角寬度與雙顴間距比值為1(103±011),術(shù)后正位新的雙下頜角間距與雙顴間距比值為1(12±021);術(shù)前耳垂至下頜角高度與面下13高度比值為1(15±012),術(shù)后耳垂至新下頜角高度與面下13高度比值為1(192±015)。術(shù)前下頜角角度為(109±17)°,截骨術(shù)后下頜角測量角度為(121±21)°?;颊呓?jīng)截骨術(shù)后1年,咬肌明顯萎縮。右側(cè)萎縮892±132MM左側(cè)萎縮974±247MM。雙側(cè)顳肌增生,右側(cè)增生204±012MM,左側(cè)增生273±017MM。在咬肌區(qū)部分,表面積萎縮149%,總面積萎縮128。進(jìn)一步測量其雙側(cè)顳肌區(qū)表面積變化,顳肌區(qū)代償增生,右側(cè)56806MM2左側(cè)87859MM2。顳肌區(qū)體積改變,右側(cè)32837MM2左側(cè)41295MM2。顳肌區(qū)表面積增生171,總面積增加133?!窘Y(jié)論及意義】下頜角肥大患者經(jīng)下頜角截骨術(shù)后1年,面部外形獲得較美觀量化數(shù)值。實(shí)現(xiàn)術(shù)前設(shè)計(jì)截骨量的多寡,可進(jìn)行對術(shù)后軟組織變化預(yù)估。如此可為臨床下頜角截骨矯治術(shù)后面部變化預(yù)測和手術(shù)設(shè)計(jì)提供參考依據(jù)。
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    • 簡介:修復(fù)大尺寸的組織缺損一直是富有挑戰(zhàn)的難題,組織工程的發(fā)展為其提供了新的思路??山到饩埘ゲ牧暇哂辛己玫纳锵嗳菪?、易加工性以及可調(diào)控降解性能等優(yōu)點(diǎn),因此常被選作組織工程多孔支架的基體材料,相關(guān)研究對于促進(jìn)組織工程材料早日大規(guī)模臨床應(yīng)用十分重要。盡管這類材料已經(jīng)被多次報(bào)道,仍然有一些重要而基礎(chǔ)的問題沒有被專門予以研究。例如許多人都在提及聚酯降解產(chǎn)物導(dǎo)致的副作用,但是卻鮮見專門的研究探討這個(gè)副作用到底有多強(qiáng)、其決定性因素是化學(xué)物質(zhì)還是PH。又例如羥基磷灰石在天然骨中大量存在,依照仿生學(xué)思路的啟發(fā),人們自然設(shè)想,可將鈣磷無機(jī)生物材料與聚酯進(jìn)行復(fù)合用于修復(fù)長干骨缺損但是,這種復(fù)合除了使用共混的方式以外,也可將羥基磷灰石以表面涂層的方式引入聚酯多孔支架的孔表面,這樣不僅可保留可降解聚酯多孔支架優(yōu)異的加工性能、降解性能和力學(xué)性能,而且有望使得其孔壁的化學(xué)組成利于骨組織修復(fù)。如果原則上可行,又如何快速有效地實(shí)現(xiàn)高分子多孔支架內(nèi)表面的無機(jī)生物材料修飾,所得的復(fù)合支架效果是否得到改善這個(gè)工作還自然引申出一個(gè)更加基礎(chǔ)的問題,即,羥基磷灰石等無機(jī)材料與骨髓基質(zhì)干細(xì)胞等重要的種子細(xì)胞之間的相互作用。其中圖案化技術(shù)是用于研究細(xì)胞與材料間相互作用的有力工具,近年來聚合物材料、金屬材料的圖案化技術(shù)有了長足的發(fā)展,但是無機(jī)材料的圖案化技術(shù)在方法學(xué)上卻有待突破。有鑒于此,本博士學(xué)位論文擬專門探討聚酯降解產(chǎn)物的體外細(xì)胞毒性、發(fā)展聚酯多孔支架的制備和孔表面無機(jī)材料修飾的技術(shù)、并研究細(xì)胞與材料間的相互作用,工作涉及了生物醫(yī)用材料研發(fā)中從基礎(chǔ)研究到臨床應(yīng)用中不同維度的科學(xué)技術(shù)問題。本文的主要?jiǎng)?chuàng)新性工作包括1研究了聚酯多孔支架降解產(chǎn)物對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體外活力和成骨分化的影響。研究聚酯多孔支架24周體外降解行為,并考察不同時(shí)間點(diǎn)的降解產(chǎn)物對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞活力和分化的影響,結(jié)果表明聚酯多孔支架的降解遵循本體降解規(guī)律,其24周降解時(shí)間內(nèi)的降解產(chǎn)物不產(chǎn)生顯著的細(xì)胞毒性。通過直接將乳酸等物質(zhì)加入細(xì)胞培養(yǎng)液中,考察乳酸對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞活力和分化的影響,結(jié)果確認(rèn)PH是高濃度乳酸引起細(xì)胞毒性的主要原因,D,L乳酸較之L乳酸有稍強(qiáng)的細(xì)胞毒性,大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)對兩種乳酸的耐受臨界濃度均為20MMOLL左右??梢哉J(rèn)為,植入在有充分體液交換的位置時(shí),不必過多地?fù)?dān)憂聚酯多孔支架降解產(chǎn)物對周圍細(xì)胞和組織的不利影響。2發(fā)展了一種在聚酯多孔支架孔表面快速修飾沉積納米羥基磷灰石涂層的方法,并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的合作研究考察了其體內(nèi)長干骨缺損的修復(fù)效果。提出一種簡便易行的方法,主要步驟包括對聚酯多孔支架進(jìn)行等離子體處理以及在改進(jìn)模擬體液中的浸泡,該方法可以快速地(9小時(shí))在聚酯多孔支架的孔表面修飾沉積均勻的納米羥基磷灰石涂層,較之傳統(tǒng)的方法(至少1周)大大地節(jié)省了時(shí)間并保證了材料性能的穩(wěn)定性。通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)評價(jià)了該改進(jìn)所得的無機(jī)聚酯復(fù)合體系多孔支架的生物相容性,結(jié)果確證聚酯多孔支架和無機(jī)聚酯復(fù)合體系多孔支架均具有良好的生物相容性,其中后者能更好地促進(jìn)成骨細(xì)胞和骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的生長。通過合作研究,在新西蘭兔橈骨骨段建立15MM的臨界缺損,將接種有兔自體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的多孔支架植入缺損處并考察其修復(fù)效果。影像學(xué)和組織學(xué)結(jié)果表明,在植入無機(jī)聚酯復(fù)合體系多孔支架實(shí)驗(yàn)組的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中,12周后在橈骨缺損處形成了連續(xù)的皮質(zhì)骨并基本實(shí)現(xiàn)髓腔再通,證明了無機(jī)聚酯復(fù)合體系多孔支架能夠促進(jìn)骨缺損的修復(fù)另外,聚酯多孔支架和無機(jī)聚酯復(fù)合體系多孔支架在長期的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,均未發(fā)現(xiàn)不良的組織相容性或無菌性炎癥的情況,也證實(shí)了不必?fù)?dān)憂聚酯多孔支架降解產(chǎn)物的細(xì)胞毒性。3綜合數(shù)種技術(shù)手段首次提出了制備具有細(xì)胞黏附反差的羥基磷灰石微圖案陣列的方法。綜合光刻技術(shù)、表面改性引進(jìn)表面電荷以及改進(jìn)模擬體液沉積的方法,得到了規(guī)整的羥基磷灰石微圖案陣列。對所得羥基磷灰石微圖案陣列背景進(jìn)行鈍化處理后,實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞在羥基磷灰石微米島上的定位黏附,為將來進(jìn)一步研究細(xì)胞與無機(jī)生物材料間相互作用提供了一種新的方法。本博士學(xué)位論文研究了常見的可降解聚酯多孔支架制備技術(shù)、尤其是提出了快速在孔表面引入無機(jī)涂層的思路、研發(fā)了高效的改性技術(shù),并通過復(fù)合羥基磷灰石涂層修飾的聚酯多孔支架與骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在動(dòng)物體內(nèi)成功地修復(fù)了長干骨缺損。論文還專門探討了常見的可降解聚酯降解產(chǎn)物對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體外行為的影響,對于人們普遍關(guān)心的聚酯酸性產(chǎn)物的細(xì)胞毒性問題給出了確切的定性結(jié)論和有關(guān)臨界濃度的定量數(shù)據(jù),結(jié)果表明沒有必要過分擔(dān)心聚酯降解產(chǎn)物的細(xì)胞毒性。論文除了研究骨髓基質(zhì)干細(xì)胞與聚酯及其降解產(chǎn)物的相互作用,還為深入研究細(xì)胞與無機(jī)生物材料間相互作用突破了制備無機(jī)生物材料微圖案陣列的技術(shù)瓶頸。本博士學(xué)位論文探討了有關(guān)可降解聚酯及其多孔支架的若干基礎(chǔ)問題,并提出了材料技術(shù)改進(jìn)的方案,有望為可降解聚酯類生物醫(yī)用材料以及無機(jī)有機(jī)復(fù)合材料的研發(fā)提供指導(dǎo)。
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