峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用對(duì)結(jié)腸癌立體多細(xì)胞球及裸鼠移植瘤的影響.pdf

1、目的:本次實(shí)驗(yàn)研究首先在細(xì)胞層面上，探討混合物峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用對(duì)人結(jié)腸腺癌DLD-1立體多細(xì)胞球模型和人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116立體多細(xì)胞球模型的作用和可能的作用機(jī)制，在動(dòng)物層面上探討峨?yún)⑹兔巡课粚?duì)人結(jié)腸癌HT-29荷瘤裸鼠模型的療效觀察，為了闡述峨?yún)⑹兔巡课蛔鳛橐粋€(gè)混合物開(kāi)發(fā)新藥的價(jià)值，為今后的藥物研發(fā)和臨床提供實(shí)驗(yàn)參考價(jià)值。
　　方法:
　　(1)cck8法檢測(cè)峨?yún)⑹兔巡课环謩e對(duì)人結(jié)腸腺癌細(xì)胞DLD-1和

2、人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116平面和立體多細(xì)胞球模型的抑制作用，并探討這種抑制作用與峨?yún)⑹兔巡课凰幬餄舛鹊年P(guān)系;
　　(2)流式細(xì)胞技術(shù)分析峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用對(duì)人結(jié)腸腺癌細(xì)胞DLD-1和人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116立體多細(xì)胞球模型的細(xì)胞周期以及細(xì)胞凋亡的作用，并探討這種作用與峨?yún)⑹兔巡课凰幬餄舛鹊年P(guān)系;
　　(3) Western blot技術(shù)分析峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用對(duì)人結(jié)腸腺癌細(xì)胞DLD-1和人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT

3、116立體多細(xì)胞球模型中p-AKT和INOS蛋白的表達(dá);
　　(4)在細(xì)胞層面上，cck8法檢測(cè)峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用對(duì)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞立體多細(xì)胞球模型的抑制作用。在動(dòng)物層面上，峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用對(duì)HT-29荷瘤裸鼠給藥，觀察裸鼠的活動(dòng)狀態(tài)，記錄裸鼠的體重，測(cè)量腫瘤的體積，計(jì)算抑瘤率。
　　結(jié)果:
　　(1)峨?yún)⑹兔巡课粚?duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞DLD-1、HCT116平面模型、立體多細(xì)胞球模型都有不同程度

4、的抑制作用，對(duì)DLD-1平面模型IC50=56.67μg/ml，立體多細(xì)胞球模型IC50=89.78ug/ml，對(duì)HCT116平面模型IC50=35.79μg/ml，立體多細(xì)胞球模型IC50=60.59ug/ml，隨著峨?yún)⑹兔巡课凰幬餄舛鹊纳撸@種抑制作用會(huì)逐漸地增強(qiáng);
　　(2)峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用可以提高對(duì)DLD-1、HCT116立體多細(xì)胞球模型的抑制作用，這種抑制作用隨峨?yún)⑹兔巡课凰幬餄舛鹊纳叨鰪?qiáng);

5、　　(3)5-FU作為周期特異性藥物可阻滯DLD-1、HCT116細(xì)胞于S期，而峨?yún)⑹兔巡课粍t阻滯DLD-1細(xì)胞于G0/G1期，阻滯HCT116細(xì)胞于G2/M期，兩種藥物聯(lián)合使用，可以使DLD-1細(xì)胞阻滯在S期和G0/G1期，使HCT116細(xì)胞阻滯在S期和G2/M期;
　　(4)混合物峨?yún)⑹兔巡课缓团R床常用藥5-FU兩藥單用都可以促進(jìn)DLD-1、HCT116細(xì)胞的凋亡，兩種藥物聯(lián)合使用可以增強(qiáng)抑制作用，誘導(dǎo)更多的細(xì)胞凋亡，并且

6、當(dāng)峨?yún)⑹兔巡课粷舛鹊纳?，DLD-1細(xì)胞和HCT116細(xì)胞的凋亡率也逐漸增加;
　　(5)峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用可以抑制DLD-1、HCT116細(xì)胞中p-AKT蛋白與INOS蛋白的表達(dá);
　　(6)峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU兩藥單藥可以抑制HT-29移植瘤的生長(zhǎng)，使裸鼠的腫瘤體積變小。兩藥聯(lián)用可以增強(qiáng)療效，并且抑制作用隨著峨?yún)⑹兔巡课凰幬餄舛鹊脑黾佣鰪?qiáng)。
　　結(jié)論:
　　(1)峨?yún)⑹兔巡课粚?duì)人結(jié)腸腺癌

7、DLD-1細(xì)胞和人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞平面、立體多細(xì)胞球模型都可以抑制細(xì)胞的增殖，降低細(xì)胞的活力。這種抑制作用隨峨?yún)⑹兔巡课凰幬餄舛鹊纳叨鰪?qiáng);
　　(2)峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU聯(lián)用對(duì)人結(jié)腸腺癌DLD-1和人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的抑制作用，導(dǎo)致兩個(gè)細(xì)胞的周期阻滯發(fā)生了變化，細(xì)胞的凋亡率也有所升高，這種作用可能與影響了細(xì)胞中p-AKT和INOS蛋白的表達(dá)有關(guān);
　　(3)峨?yún)⑹兔巡课慌c5-FU兩藥單藥可以抑制HT-