hTERT、miR-29c、miR-124、miR-135a和miR-148a與胃癌的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶在胃癌中的表達(dá)及臨床意義
　　目的：
　　探討端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）mRNA及蛋白在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義。
　　方法：
　　收集60例有完整臨床病理資料的胃癌組織為實(shí)驗(yàn)組和30例正常胃組織為對照組。以實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain re

2、action，qRT-PCR）檢測組織樣本中hTERT mRNA表達(dá)水平，用MaxVisionTM即用型快速免疫組化一步法檢測組織樣本中hTERT蛋白表達(dá)。運(yùn)用方差分析、χ2檢驗(yàn)或連續(xù)校正χ2檢驗(yàn)、Spearman秩相關(guān)、生存分析等多種統(tǒng)計方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理。分析hTERT mRNA和蛋白在胃癌組織中的表達(dá)及兩者的相關(guān)性；探討hTERT mRNA與胃癌臨床病理特征及預(yù)后間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　hTERT mRNA在胃癌

3、組和正常組中均有表達(dá)，但胃癌組中hTERT mRNA的表達(dá)水平明顯高于正常組，兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；hTERT蛋白主要表達(dá)在胃癌細(xì)胞胞漿中，胃癌細(xì)胞核中也偶有表達(dá)，hTERT蛋白在胃癌組和正常組中的陽性表達(dá)率分別為83.3％，40.0%，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。hTERT mRNA和蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)（r=0.733，P<0.01）；hTERT mRNA與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及臨床分期相關(guān)（P<0.05

4、），與年齡、性別、腫瘤直徑、腫瘤部位、腫瘤分化程度及浸潤深度無關(guān)（P>0.05）。生存分析顯示高表達(dá)hTERT mRNA患者的中位生存時間為24個月，低表達(dá)者的中位生存時間為64個月，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.015）。
　　結(jié)論：
　　hTERT基因在胃癌組織中高表達(dá)，且能夠影響胃癌進(jìn)展和預(yù)后。因此，hTERT有望成為評估胃癌進(jìn)展和預(yù)后的指標(biāo)之一。
　　第二部分評估m(xù)iR-29c、miR-124、miR-13

5、5a和miR-148a對胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期的預(yù)測能力
　　目的:
　　檢測胃癌組織中miR-29c、miR-124、miR-135a和miR-148a的表達(dá)水平，探討其對胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期的預(yù)測能力。
　　方法:
　　收集60例有完整臨床病理資料的胃癌組織為實(shí)驗(yàn)組，30例正常胃組織作為對照組。以實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reac

6、tion，qRT-PCR）檢測組織樣本中miR-29c、miR-124、miR-135a和miR-148a的表達(dá)水平。運(yùn)用Mann-Whitney U test或者Kruskal-Wallis H test、Logistic回歸、Spearman秩相關(guān)、受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC曲線）、McNemar test等多種分析方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理。分析miR-29

7、c、miR-124、miR-135a和miR-148a在胃癌組織中的表達(dá)及與胃癌臨床病理特征間的關(guān)系，進(jìn)一步分析其對胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期的預(yù)測能力。
　　結(jié)果:
　　miR-29c、miR-124、miR-135a和miR-148a在胃癌組織中表達(dá)下調(diào)（P<0.05）。miR-124和miR-135a在胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和臨床III–IV期中的低表達(dá)（P<0.01）提示了與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期的潛在相關(guān)。Spearman秩

8、相關(guān)分析顯示miR-124與miR-135a呈正相關(guān)（r=0.730）。ROC曲線分析顯示miR-124在識別胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期方面具有較好的預(yù)測能力。取最佳截斷值為0.013，miR-124診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的靈敏性和特異性均為80.0%；同時其診斷胃癌Ι-II期的靈敏性為71.9%，特異性為75.0%。對于胃癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的診斷，miR-124與CT影像的診斷特異性沒有明顯不同（0.800 vs0.900，P=0.508），但miR