TGF-β1參與慢性胰腺炎大鼠腹部痛覺過敏的機制研究.pdf

1、目的：
　　TGFβ1即轉(zhuǎn)化生長因子beta1是一種小分子蛋白因子，有報道顯示TGFβ1在炎癥局部組織中分泌量顯著增加，并在局部組織的傷口愈合以及促使纖維化過程中扮演著重要角色。然而，TGFβ1在外周傷害性感覺傳遞過程中所起的作用尚不太清楚。本研究旨在探討TGFβ1對外周初級感覺神經(jīng)元興奮性的急性作用及其在慢性胰腺炎大鼠的痛覺過敏中扮演的角色。
　　方法：
　　1.在180-200 g雄性SD大鼠胰管內(nèi)注射三硝基苯磺酸

2、（TNBS）誘導(dǎo)慢性胰腺炎（CP）模型。
　　2.胰腺壁注射熒光素（Dil）逆行標記胰腺特異性背根神經(jīng)節(jié)（DRG）神經(jīng)元。運用全細胞膜片鉗方法研究TGFβ1對胰腺相關(guān)DRG神經(jīng)元膜電位和興奮性的作用。
　　3.運用鈣成像方法研究TGFβ1對胰腺相關(guān)DRG神經(jīng)元胞內(nèi)鈣離子濃度的影響。
　　4.運用 Western Blotting檢測 TGFβ1及其受體在大鼠胰腺和胰腺相關(guān)節(jié)段DRG（T9-T13）中的表達水平。

3、　　5.運用Von frey filament（VFF）評測正常大鼠或CP大鼠在注射藥物前后痛行為反應(yīng)。
　　結(jié)果：
　　1.全細胞膜片鉗記錄顯示，灌流TGFβ1引起胰腺特異性DRG神經(jīng)元細胞膜去極化并進一步誘發(fā)動作電位，升高神經(jīng)元興奮性；與對照組比較，灌流 TGFβ1使CP大鼠胰腺相關(guān)DRG神經(jīng)元去極化及放電更加顯著。
　　2.鈣成像結(jié)果顯示，灌流TGFβ1可使正常大鼠胰腺相關(guān)DRG神經(jīng)元胞內(nèi)鈣離子濃度上升；與對照組

4、比較，灌流TGFβ1使CP大鼠胰腺相關(guān)DRG神經(jīng)元胞內(nèi)鈣離子濃度上升更加顯著。
　　3.與對照組比較，CP大鼠胰腺中 TGFβ1及其前體表達水平顯著升高，胰腺相關(guān)DRG中的TGFβ1及其前體，TGFβI型和II型受體表達水平顯著升高。
　　4.鞘內(nèi)注射TGFβ1誘發(fā)正常大鼠產(chǎn)生腹部痛覺過敏；鞘內(nèi)注射TGFβ受體拮抗劑SB431542明顯緩解CP大鼠的痛覺過敏。
　　結(jié)論：
　　我們的研究提示TGFβ1對初級感覺神