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文檔簡介
1、目的:本研究旨在以亞硒酸鈉和姜黃素為原料,合成姜黃素-硒配合物,研究該配合物的高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析測定方法和穩(wěn)定性,探討該配合物對鎘染毒大鼠肝損傷的干預(yù)作用。
方法:1、姜黃素-硒配合物的合成:以亞硒酸鈉和姜黃素為原料,合成姜黃素-硒配合物;用柱層析法純化姜黃素-硒配合物;利用紅外光譜法(infrared spectroscopy,IR)、
2、高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(high performance liquid chromatography mass spectrometry,HPLC-MS)和原子熒光光譜法(atomic fluorescence spectrometry,AFS)鑒定姜黃素-硒配合物的化學(xué)結(jié)構(gòu);采用紫外可見光譜法、HPLC建立姜黃素-硒配合物的HPLC分析測定方法;通過檢測姜黃素-硒配合物在不同溫度下,光照和黑暗下的降解速率,研究姜黃素-硒配合物對溫度和
3、光照的穩(wěn)定性。2、姜黃素-硒配合物對鎘染毒大鼠肝損傷的干預(yù)作用:SD大鼠30只,隨機(jī)分成5組:對照組、鎘染毒組、姜黃素-硒配合物低劑量干預(yù)組、姜黃素-硒配合物中劑量干預(yù)組和姜黃素-硒配合物高劑量干預(yù)組。除對照組外,各組腹腔注射氯化鎘生理鹽水溶液2mg/kg/2d染毒,共6次,對照組腹腔注射等量生理鹽水。姜黃素-硒配合物低、中、高劑量干預(yù)組分別灌胃姜黃素-硒配合物的羧甲基纖維素鈉混懸液1.44mg/kg/d、2.88mg/kg/d、4.5
4、6mg/kg/d,共6周,鎘染毒組和對照組灌胃等量羧甲基纖維素鈉水溶液。最后一次給藥24h后,心臟取血,離心取血清,檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase,AST)活力;取肝組織,檢測肝組織丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水
5、解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)活性和鎘含量;對肝臟進(jìn)行組織切片,蘇木精-伊紅(HE)染色,觀察肝組織病理學(xué)改變。
結(jié)果:1、姜黃素-硒配合物合成結(jié)果顯示:姜黃素-硒配合物中姜黃素與硒的物質(zhì)的量比為1:1,含硒量16.6%;HPLC分析測定條件為,流動相乙腈:水:冰乙酸=95:4.5:0.5(V:V:V),檢測波長380nm,溫度25℃,流速1m
6、l/min;繪制出姜黃素-硒配合物和姜黃素在不同溫度下、光照和黑暗下的降解速率曲線。2、姜黃素-硒配合物對鎘染毒大鼠肝損傷的干預(yù)作用研究結(jié)果顯示:鎘染毒大鼠血清ALT和AST活力、肝組織MDA含量和Caspase-3活性較對照組顯著升高,肝組織SOD活力顯著下降;給藥干預(yù)組大鼠血清ALT和AST活力、肝組織MDA含量和Caspase-3活性較鎘染毒組顯著下降,肝組織SOD活力顯著升高。肝組織鎘含量檢測結(jié)果顯示姜黃素-硒配合物不能顯著降低
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