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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:用不同方法提取分析酢漿草的活性成分,對(duì)酢漿草不同成分進(jìn)行分析,觀察其不同成分對(duì)a-萘異硫氰酸酯所致肝損害大鼠模型的保護(hù)作用。
方法:
1.本研究通過(guò)提取酢漿草不同的成分,分別是:①將干粉浸入適量蒸餾水并置于磁力攪拌上,加熱,攪拌,然后過(guò)濾,濃縮,冷凍干燥,得到酢漿草Ⅰ。②加入用鹽酸、乙醇提取,浸泡或水浴加熱,間隙攪拌,待反應(yīng)結(jié)束后,過(guò)濾,濃縮至膏狀,得到酢漿草Ⅱ。③加入乙醇,加熱回流提取,用乙醚清洗,分離上層溶
2、液,滴加碳酸氫鈉溶液,用三氯化碳萃取兩次,取水層,加入鹽酸溶液,沉淀,干燥后得到酢漿草Ⅲ。對(duì)酢漿草提取成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析得出其主要成分,對(duì)其進(jìn)行抗氧化、清除超氧自由基等能力進(jìn)行檢測(cè)。
2.用已提取的酢漿草Ⅰ、酢漿草Ⅱ、酢漿草Ⅲ分別給模型大鼠灌胃,觀察酢漿草各活性成分對(duì)大鼠肝損傷模型的生活狀態(tài)、肛溫、生化指標(biāo)、NO等的影響。
結(jié)果:
1.用三種不同方法提取的酢漿草的活性成分,為酢漿草Ⅰ、酢漿草Ⅱ、酢漿草Ⅲ。經(jīng)結(jié)
3、構(gòu)分析得到酢漿草Ⅰ主要活性成分為多糖類化合物,酢漿草Ⅱ的主要活性成分為花青素類化合物,酢漿草Ⅲ的主要活性成分為黃酮類化合物。三種不同活性成分的性狀顏色都不同,并在抗氧化實(shí)驗(yàn)及干預(yù)肝損傷實(shí)驗(yàn)中均有不同作用??寡趸芰Σ捎皿w外清除自由基實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果為,對(duì)DPPH自由基的清除率隨濃度的增加而增大。
2.酢漿草各活性成分在a-萘異硫氰酸酯(ANIT)誘導(dǎo)的大鼠肝損傷模型有一定干預(yù)作用,實(shí)驗(yàn)中ANIT中毒的大鼠模型出現(xiàn)體重驟減,新陳代
4、謝發(fā)生紊亂,出現(xiàn)食欲下降,精神萎靡等癥狀,表明造模成功。但是當(dāng)加入酢漿草三種成分提取物溶液時(shí)均可一定程度緩解以上大鼠出現(xiàn)的癥狀。與造模組相比較,酢漿草可以顯著增加大鼠的體重,降低大鼠的肛溫。但是酢漿草Ⅱ?qū)υ炷=M大鼠的體重沒(méi)有影響。在測(cè)定各組大鼠中堿性磷酸酶(ALP)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總膽素(TB)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中,可以清晰看出造模組血清中各ALP、AST、ALT、TB含量顯著增高。然而加入酢漿草各成分進(jìn)行干預(yù),血
5、清中ALP、AST、ALT、TB含量顯著低于造模組,其中酢漿草Ⅲ組測(cè)定的各指標(biāo)含量顯著低于酢漿草Ⅰ、酢漿草Ⅱ組,這說(shuō)明酢漿草Ⅲ對(duì)肝損傷的保護(hù)作用最大,可以顯著改善肝損傷。
3.本實(shí)驗(yàn)還測(cè)定肝臟造模后血液中一氧化氮含量發(fā)現(xiàn),血液紅細(xì)胞中一氧化氮(NO)含量明顯升高。NO含量升高會(huì)導(dǎo)致氧化應(yīng)激反應(yīng)加劇從而使過(guò)氧化物增加,影響肝臟的功能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,酢漿草各成分均會(huì)使造模后的大鼠血液紅細(xì)胞中NO含量降低。
結(jié)論:
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