草莓再生體系的優(yōu)化及轉(zhuǎn)JERF-,33-基因提高其抗病性的研究.pdf

1、草莓是一種重要的多年生常綠草本植物，其果實味道鮮美，營養(yǎng)豐富，經(jīng)濟價值高，既可用于鮮食，又可用于加工，深受人們的喜愛。但由于各種病害的危害，草莓的產(chǎn)量和品質(zhì)受到嚴(yán)重的影響。因此提高其抗病性對草莓生產(chǎn)具有重要的實際意義。草莓轉(zhuǎn)基因已有成功的報導(dǎo)。 通過轉(zhuǎn)基因的手段來增強植物的抗病性是一種行之有效的方法，轉(zhuǎn)入特定的病程相關(guān)基因(PR 基因)能增強植物對某種或某幾種特定病害的抵抗能力，但要獲得多抗、高抗的品種，就必須同時轉(zhuǎn)入多個基因，

2、就目前技術(shù)而言是難以做到的。導(dǎo)入調(diào)節(jié)抗逆基因表達的轉(zhuǎn)錄因子基因可能對全面增強作物抗逆性提供了一種全新的途徑。 本研究主要以豐香、章姬為試材，對再生體系進行了優(yōu)化，在此基礎(chǔ)上，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將轉(zhuǎn)錄因子基因JERF<,33>基因?qū)氩葺?。對抗性植株進行PCR、DNA 點雜交檢測，獲得了轉(zhuǎn)基因草莓植株。對轉(zhuǎn)基因植株接種炭疽病試驗發(fā)現(xiàn)，其抗炭疽病能力顯著增強。 本試驗獲得的主要結(jié)果如下： 1. 建立了豐香、章姬的葉片

3、高效再生體系，其再生率均達到 100％，其中豐香最適培養(yǎng)基配方為 1/2MS+2，4-D0.10mg/L+TDZ4.0mg/L，其平均再生芽數(shù)為3.5個，章姬最適培養(yǎng)基配方為1/2MS+2，4-D0.07 mg/L+TDZ4.0 mg/L，平均再生芽數(shù)目達到4.6個。 2.草莓葉片外植體進行一個星期的暗培養(yǎng)有利于其不定芽再生率的提高。 3.對章姬草莓葉片進行轉(zhuǎn)基因，經(jīng)過Km篩選再生出的植株進行PCR檢測，其陽性率為5.4