辣椒遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化及轉(zhuǎn)錄因子JERF-33＃導(dǎo)入的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、從番茄cDM表達文庫中分離到的JERF-33?；?qū)儆贏P2/EREBP轉(zhuǎn)錄因子家族,此類型轉(zhuǎn)錄因子中包含一個保守的60個氨基酸左右的DNA結(jié)合域,能和GCC盒相互作用,調(diào)控抗病、抗逆相關(guān)基因的表達.該試驗旨在將JERF-33?；?qū)肜苯分?以提高辣椒的綜合抗性.要將JERF-33＃基因?qū)肜苯分?首先必須建立一個穩(wěn)定的遺傳轉(zhuǎn)化體系.而辣椒基因工程發(fā)展的最大障礙是遺傳轉(zhuǎn)化率太低.該研究以三個甜(辣)椒品種為試材,通過導(dǎo)入報告基因—綠色

2、熒光蛋白基因,分別就農(nóng)稈菌懸浮培養(yǎng)基的pH值、共培養(yǎng)添加物、共培養(yǎng)時間和溫度對外源基因?qū)说挠绊戇M行了較為系統(tǒng)而深入的研究,建立起農(nóng)桿菌介導(dǎo)的辣椒遺傳轉(zhuǎn)化體系.該研究結(jié)果表明:(1)農(nóng)桿菌懸浮培養(yǎng)基pH為5.2時最有利農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化.(2)農(nóng)桿菌共培養(yǎng)培養(yǎng)基中添加AS200μM時,抗性愈傷組織熒光表達率最高.(3)22℃時共培養(yǎng),農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化率最高.(4)共培養(yǎng)4天最有利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化.在此基礎(chǔ)上,建立起了優(yōu)化的辣椒遺傳轉(zhuǎn)化體系,并利用此體系

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