油桐尺蠖核型多角體病毒p35基因的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文研究了油桐尺蠖核型多角體病毒(Buzurasuppressarianuclearpolyhedrosisvirus，簡稱BsNPV)p35基因的抗凋亡功能。采用PCR的方法從BsNPV基因組中擴(kuò)增出p35基因，并對它進(jìn)行了序列測定，與其他病毒的p35基因相比，它的保守性非常強。把BsNPVp35基因克隆到原核表達(dá)載體pGEX-KG上，最終得到含有重組表達(dá)載體pGBp35的BL21重組菌。用IPTG對重組菌進(jìn)行誘導(dǎo)，并對它進(jìn)行時相分析

2、。采用不連續(xù)系統(tǒng)垂直板SDS-PAGE對誘導(dǎo)后的蛋白進(jìn)行分析。結(jié)果表明：表達(dá)蛋白的分子量約為62kD，大于35kD，這是由于pGEX-KG表達(dá)載體表達(dá)的是一融合蛋白，在P35蛋白之前還帶有27kD的GST蛋白，兩者融合而成。 我們還把BsNPVp35基因克隆到真核表達(dá)載體pIZ/V5-His上，并且突變了p35基因的終止密碼子，在其后連接報道基因egfp，并使它們的讀碼框一致，重組載體命名為pIZ/V5-p35-egfp。用pI

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